根据选用解离的试剂不同分为以下几种方法: 氢氧化钾解离法 硝酸-铬酸离析法 氯酸钾法
根据选用解离的试剂不同分为以下几种方法: 氢氧化钾解离法 硝酸-铬酸离析法 氯酸钾法
氢氧化钾解离法: 适用于柔软的植物材料。将切割好的材料置于坩埚中,加5 %氢氧化钾溶液适量,加热至用玻璃棒挤压能离散为止。如离 析的材料稍硬,可用6%~10%氢氧化钾液加热使之离析,尚 可更换一次试液。待材料能被轻压离散时,倾去碱液,用水洗 至中性,即可取所需部位加稀甘油制片观察。用氢氧化钾溶液 能逐渐除去细胞中的淀粉、蛋白质、油脂及色素,其作用较水 合氯醛强,并能使细胞膨胀,若作用时间较长,能使纤维性组 织解离,并可引起薄壁组织的破坏和变形。所以加热处理时间 不宜太长
氢氧化钾解离法: 适用于柔软的植物材料。将切割好的材料置于坩埚中,加5 %氢氧化钾溶液适量,加热至用玻璃棒挤压能离散为止。如离 析的材料稍硬,可用6%~10%氢氧化钾液加热使之离析,尚 可更换一次试液。待材料能被轻压离散时,倾去碱液,用水洗 至中性,即可取所需部位加稀甘油制片观察。用氢氧化钾溶液 能逐渐除去细胞中的淀粉、蛋白质、油脂及色素,其作用较水 合氯醛强,并能使细胞膨胀,若作用时间较长,能使纤维性组 织解离,并可引起薄壁组织的破坏和变形。所以加热处理时间 不宜太长
硝酸-铬酸离析法:适用于木质化组织,如木材、根、茎、树皮等材料, 将材料放入坩埚或试管中,加10%硝酸与10%铬酸的等量混合液,其量 为材料的20倍,放置浸渍的时间,视材料的性质而异,一般为1-2日或更 长的时间。也可以采用加温的办法来缩短浸渍时间,以材料用玻璃棒轻 压,可以离散为度,然后用水洗至中性,即可制片观察。 硝酸和铬酸均为强氧化剂,解离速度较快,如解离柔软较嫩的材料, 应注意掌握时间。经硝酸、铬酸解离的材料,草酸钙、碳酸钙结晶及淀 粉粒、脂肪油等均已消失
❖ 硝酸-铬酸离析法:适用于木质化组织,如木材、根、茎、树皮等材料, 将材料放入坩埚或试管中,加10%硝酸与10%铬酸的等量混合液,其量 为材料的20倍,放置浸渍的时间,视材料的性质而异,一般为1-2日或更 长的时间。也可以采用加温的办法来缩短浸渍时间,以材料用玻璃棒轻 压,可以离散为度,然后用水洗至中性,即可制片观察。 ❖ 硝酸和铬酸均为强氧化剂,解离速度较快,如解离柔软较嫩的材料, 应注意掌握时间。经硝酸、铬酸解离的材料,草酸钙、碳酸钙结晶及淀 粉粒、脂肪油等均已消失
氯酸钾法:本法适用于坚硬的材料,如木类及某些坚硬的 果皮、种皮等,将材料置坩埚或小烧杯中,加50%硝酸试 液约5m及氯酸钾粉少量,缓缓加热至沸,当气泡渐少时, 再及时加入少量的硫酸钾,以维持气泡稳定产生(约15~ 20分钟),至材料能分离开时,倾去试液,加水洗涤数次, 即可制片观察。采用此解离法制片需在通风处进行,以防 氯气中毒
氯酸钾法:本法适用于坚硬的材料,如木类及某些坚硬的 果皮、种皮等,将材料置坩埚或小烧杯中,加50%硝酸试 液约5ml及氯酸钾粉少量,缓缓加热至沸,当气泡渐少时, 再及时加入少量的硫酸钾,以维持气泡稳定产生(约15~ 20分钟),至材料能分离开时,倾去试液,加水洗涤数次, 即可制片观察。采用此解离法制片需在通风处进行,以防 氯气中毒
≈2.显微测微尺的使用 ●显微测微尺是用来测量显微镜下所见物体长度、大小的标尺,包括载台测微 尺和目镜测微尺。载台测微尺:为一特制的载玻片,在载玻片的中央封有 imm长的小尺,精确分成10大格,每大格又分10小格,共100小格,每小格 长度为0.0mm,即oμm标尺的外围有一小黑环,便于在显微镜下寻找标尺。 载台测微尺并不直接用来测量显微镜下物体的长度和大小,而是用以校正目 镜测微尺的。经过校正之后的目镜测微尺,方可用来测量显微镜下物体的大 小。目镜测微尺为一直径约20mm的圆形玻片,玻片的中央部分具有一小尺, 精确地分成50小格或100小格(图2—2)。使用目镜测微尺时,将目镜自镜筒 中抽出,旋开镜片,将目镜测微尺的标尺正面向上,安放在目镜中部的隔板 上,旋上镜片,放回原镜筒内,进行测量。由于目镜测微尺每小格的长度随 显微镜放大的倍数而改变,故在使用前必须将各物镜头逐一用载台测微尺加 以校正,以便确定在使用此显微镜时各组镜头下目镜测微尺每小格所代表的 实际长度
❖ 2.显微测微尺的使用 ❖ 显微测微尺是用来测量显微镜下所见物体长度、大小的标尺,包括载台测微 尺和目镜测微尺。载台测微尺:为一特制的载玻片,在载玻片的中央封有 lmm长的小尺,精确分成10大格,每大格又分10小格,共100小格,每小格 长度为 0.0lmm,即l0μm标尺的外围有一小黑环,便于在显微镜下寻找标尺。 载台测微尺并不直接用来测量显微镜下物体的长度和大小,而是用以校正目 镜测微尺的。经过校正之后的目镜测微尺,方可用来测量显微镜下物体的大 小。目镜测微尺为一直径约20mm的圆形玻片,玻片的中央部分具有一小尺, 精确地分成50小格或100小格(图2—2)。使用目镜测微尺时,将目镜自镜筒 中抽出,旋开镜片,将目镜测微尺的标尺正面向上,安放在目镜中部的隔板 上,旋上镜片,放回原镜筒内,进行测量。由于目镜测微尺每小格的长度随 显微镜放大的倍数而改变,故在使用前必须将各物镜头逐一用载台测微尺加 以校正,以便确定在使用此显微镜时各组镜头下目镜测微尺每小格所代表的 实际长度