离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换纤维素 离子交换纤维素是携带功能基团纤维素衍生物,具有松散的亲水 性网状结构以及较大的表面积,大分子可以自由通过,因而对生物大 分子(如蛋白质)的交换容量比离子交换树脂大 阳离子型离子交换纤维素包括羟甲基纤维素(CM纤维素)等 阴离子型离子交换纤维素包括二乙基氨基乙基纤维素(DEAE纤 维素)
离子交换介质的基本性质 离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换纤维素: 离子交换纤维素: 离子交换纤维素 离子交换纤维素是携带功能基 是携带功能基团纤维素衍生物,具有松散的亲水 团纤维素衍生物,具有松散的亲水 性网状结构以及较大的表面积,大 性网状结构以及较大的表面积,大分子可以自由通过,因而对生物大 分子可以自由通过,因而对生物大 分子(如蛋白质)的交换容量比离子交换树脂大 分子(如蛋白质)的交换容量比离子交换树脂大 阳离子型 阳离子型离子交换纤维素包括羟甲基纤维素( 离子交换纤维素包括羟甲基纤维素 (CMCM纤维素)等 纤维素)等 维素) 维素) 阴离子型 阴离子型离子交换纤维素包括二乙基氨基乙基纤维素( 离子交换纤维素包括二乙基氨基乙基纤维素 (DEAE DEAE 纤纤
离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换葡聚糖: 离子交换葡聚糖是葡聚糖经环氧氯丙烷交联后形成的具有多孔三 维空间网状结构和离子交换功能基团的多糖衍生物( Sephadex G) Sephadex的优点如下: ●亲水性强、不会引起生物分子的变性和失活,母链对蛋白质、核 酸及其它生物分子的非特异性吸附能力小 电离基团在母体上取代程度高,交换容量大,装柱方便,流速快 既有离子交换作用,又有分子筛效应 因而 Sephadex是一类广泛应用的色谱分离介质
离子交换介质的基本性质 离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换葡聚糖: 离子交换葡聚糖: 离子交换葡聚糖 离子交换葡聚糖是葡聚糖经环 是葡聚糖经环氧氯丙烷交联后形成的具有多孔三 氧氯丙烷交联后形成的具有多孔三 维空间网状结构和离子交换功能基团的多糖衍生物( 维空间网状结构和离子交换功能基团的多糖衍生物(Sephadex G Sephadex G )) Sephadex Sephadex的优点如下: 的优点如下: 亲水性强、不会引起生物分子 亲水性强、不会引起生物分子的变性和失活,母链对蛋白质、核 的变性和失活,母链对蛋白质、核 酸及其它生物分子的非特异性吸附能力小 酸及其它生物分子的非特异性吸附能力小 电离基团在母体上取代程度高 电离基团在母体上取代程度高,交换容量大,装柱方便,流速快 ,交换容量大,装柱方便,流速快 既有离子交换作用,又有分子筛效应 既有离子交换作用,又有分子筛效应 因而因而Sephadex Sephadex是一类广泛应用的色谱分离介质 是一类广泛应用的色谱分离介质
离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换葡聚糖 常用的离子交换葡聚糖包括: 阳离子交换剂 CM-Sephadex C25,CM- Sephadex C50 Sephadex C-25, Sephadex C-50 阴离子交换剂 DEAE-Sephadex A-25, DEAE-Sephadex A50 QAE-Sephadex A-25, QAE-Sephadex A-50
离子交换介质的基本性质 离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换葡聚糖: 离子交换葡聚糖: 常用的离子交换葡聚糖包括: 常用的离子交换葡聚糖包括: 阳离子交换剂 阳离子交换剂 CM-Sephadex C-25 CM-Sephadex C-25,,CM-Sephadex C-50 CM-Sephadex C-50 Sephadex C-25 Sephadex C-25,,Sephadex C-50 Sephadex C-50 阴离子交换剂 阴离子交换剂 DEAE-Sephadex A-25 DEAE-Sephadex A-25,,DEAE-Sephadex A-50 DEAE-Sephadex A-50 QAE-Sephadex A-25 QAE-Sephadex A-25,,QAE-Sephadex A-50 QAE-Sephadex A-50
离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换琼脂糖: 离子交换琼脂糖是携带DEAE或CM基团的 Sepharose CL-6B DEAE-Sepharose(阴离子型)和 CM-Sepharose(阳离子型) 的离子交换介质具有硬度大、性质稳定,流速好,分离能力强等优点 尤其是介质受pH和离子强度的影响所引起的膨胀和收缩效应较小,因 此具有稳定的外形体积
离子交换介质的基本性质 离子交换介质的基本性质 常用的离子交换剂 离子交换琼脂糖: 离子交换琼脂糖: 离子交换琼脂糖 离子交换琼脂糖是携带 是携带DEAE DEAE 或或CMCM基团的 基团的Sepharose CL-6B Sepharose CL-6B DEAE-Sepharose DEAE-Sepharose ((阴离子型)和 阴离子型)和CM-Sepharose CM-Sepharose(阳离子型) (阳离子型) 尤其是介质受 尤其是介质受pHpH和离子强度的影响所引起的膨胀和收缩效应较小,因 和离子强度的影响所引起的膨胀和收缩效应较小,因 的离子交换介质具有硬度大、性质 的离子交换介质具有硬度大、性质稳定,流速好,分离能力强等优点 稳定,流速好,分离能力强等优点 此具有稳定的外形体积 此具有稳定的外形体积
离子交换介质的选择原则 一般而言: 酸性物质用阴离子交换剂分离 碱性物质用阳离子交换剂分离 氨基酸、核苷酸、蛋白质等两性电解质,可根据其p值及离子化 曲线来选择
离子交换介质的选择原则 离子交换介质的选择原则 一般而言: 一般而言: 酸性酸性物质用阴离子交换剂分离 物质用阴离子交换剂分离 氨基酸、核苷酸、蛋白质等 氨基酸、核苷酸、蛋白质等两性电解质,可根据其 两性电解质,可根据其pI pI 值值及离子化 及离子化 碱性碱性物质用阳离子交换剂分离 物质用阳离子交换剂分离 曲线曲线来选择 来选择