园泰山医学院 省级精品课程申报 实验指导 实验采取每组34人制，在专门的实验指导老师指导下完成实验操作。学生在实验前后需 要撰写实验预习报告、实验记录和实验报告：由任课老师对实验报告进行批改并对学生讲解， 并计入期终考试成绩， 药理学实验采用药理学教研室主编《药理学实验讲义》教材。 实验课实验项目表 实验序号 内容 实验学时 备注 实验一 1.药理学实验研究 2录像：实验动物基本操作技术等 3 必开实验 实验二 1.戊巴比妥钠半数有效量测定 必开实验 2.硫酸镁导泻实验 实骏 呋塞咪和高渗葡萄糖对家免的利尿作用 必开实验（综合性） 实验四药物对麻醉动物血压的影响 3 必开实验（综合性） 实验五体外溶血实验、硫酸链霉素毒性实验 3 必开实验（设计性） 实验六 普萘洛尔提高心肌耐缺氧能力的作用 必开实验（设计性） 1利多卡因对氯化钡诱发心律失常的治疗作 3 2.甲硝唑药动学参数测定 综合性 3 3.有机磷药物中毒及解牧： 哌替啶和乙酰水杨酸的镇痛作用 3 实验七、八 4,香丹注射液对垂体后叶素致家免心肌缺血 3 设计性 的保护作用 5.肝功能对药物作用的彪响 3 6.处方、病例讨论 3 7录像：中枢神经系统药物实验方法：化分 药物实验研究：糖皮质激素类药物实验研究 总学时 24 实验一药理学实验研究简介、实验动物基本操作技术 实验二戊巴比妥钠半数有效量(ED)的测定 【目的】 测定戊心比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED值。 【原理】 戊巴比妥钠为心比妥类镇静催眠药，用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应，常用翻正反射的消
@泰山医学院 Medical Universit 省级精品课程申报 失来判断。该指标仪有阳性（催眠）和阴性（个催眠）两种现象，属于质反应。 质反应量效曲线的横座标为对数剂量，而纵坐标采用阳性反应发生的频数时，一般为常态分布曲线。如 改用累加阳性频数为纵坐标时，可以得到标准S型曲线。该曲线的中央部分(50%反应处)接近一条直线。 斜度最大，其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量，通常称为半数效应量，如效应为 疗效，则称半数有效量(ED):效应为死亡，则称为半数致死量(LD0)。这些数值是表达药物作用强度 的重要参数。 测定ED0和LD和的方法基本一致，只是所观察的指标不同。前者以药效为指标，后者以动物死亡为指 标。常用的测定方法有Bliss法（正规机率单位法），Litchfield-Wilcoxon机率单位图解法，Kaerber面积法， 孙瑞元改进的Kacrber法（点斜法）及Dixon-Mood法（序贯法）等，其中孙氏改进的Kaerber法因其简捷性 和精确性史为常用。 孙氏改进的的Kaerber法的设计条件是：各级实验动物数相等，各组剂量呈等比数列，各组动物的反应 率大致符合常态分布。若以Xm为最大反应率组剂量的对数，i为组间剂量比的对数，P为各组反应率，Pm 为最高反应率，Pm为最低反应率，n为每实验组动物数。 EDso=lg[Xm-i (P-0.5)ti/4 (1-Pm-Pn)1 (2-) 含0%反应率时： ED0=1g'[Km-i(P-0.5)1 (2-2) ED0的95%可信限=1g(1gED50士1.96·S) (2-3) 其中S= 【材料】 1.动物：小鼠60只，体重18-24g。 2.药品：戊巴比妥钠溶液(sodium pentobarbital solution)2.00mgml、2.40mgml、2.89mgml、4.16mg/ml. 5.00mg/ml. 3.器材：小鼠笼，天平，0.5ml或0.25ml注射器. 【方法】 1.确定给药剂量：先以少量动物做预试验，以获得小鼠对戊巴比妥纳催眠反应为100%的最小剂量 (ED1)和反应率为0%的最大剂量(ED)。然后在此剂量范围内，按等比数列分成几个剂量组（一般4-8 组)，各组剂量的公比()为： ED100 EDo 求得r后，自第一剂量组(ED)开始乘以，可得相邻的下一个组的剂量。若共分为6个组，各组剂量分别 为EDa、rEDo、rEDo、EDo、EDo、rEDO 2.给药：取体重18-22g的健康小鼠60只，查附录4，随机分为6个组，每组10只.按表10一3所列 的各月给药浓度分别腹腔注射10mlkg:
网泰山医学院 省级精品课程申报 3.记录结果：以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹腔注射后15m内睡眠鼠 数，填入表2。 【结果整理】依表2所列，分别计算各组P和P2。再按(2-2)或(2-3)式计算ED0及ED0的95%可信限。 表2戊巴比妥钠ED0计算用表 药物浓度 给药剂量 组别小鼠数 对数剂量 催晒 P （mg/ml) (mg/kg) 限数 30 13010 28g 289 1460 45 347 1.5398 50.0 1609 【注意本项】 1,若用50只小鼠，随机分为5个剂量组进行实验，各组动物可参照20mgkg,25mgkg、31mgkg、39mgkg、 49mgkg给药，（药物浓度为2.45mgml、1.96mgml、1.57mg/ml、125mgml、1.00mgml)以20mlkg腹腔注 射。 2随机分组时，可先称各个小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别做好标记。再按确定组数查随机数 字表分组，使各组半均体重及体重分布尽可能一致。 3.本实验为定量实验，注射量必须准确。给药后要仔细观察药物反应，但不可过多翻动小鼠，以免影响 实验结果。 【讨论题】测定ED0的意义何在？ 实验三硫酸镁对小鼠的导泻作用 【目的 观察硫酸镁对肠管活动的影响，分析其导泻作用机理。 原理 口服硫酸镁后，因Mg+、SO2不易被胃肠吸收，在肠管内形成高渗透压，阻止水分的吸收， 使肠腔容积增大，从而刺激肠壁，引起肠推进性蠕动增强，呈现导泻作用。本实验以墨汁为指 示剂，通过肠膨胀、肠蠕动、粪便性状及墨汁在肠道内的推进速度等指标，观察了硫酸镁的导 泻作用。 材料 1.动物：小鼠16只，体重18-24g 2.药品：墨汁氯化钠溶液、10%墨汁硫酸镁溶液。 3.器材：小鼠笼，小鼠灌胃管，小剪刀，眼科镊子，尺子，搪瓷盘。 【方法]
图泰山医学院 省级精品课程申报 1.禁食与给药：每组取已禁食6-8h体重相似的小鼠2只，其中1只灌胃墨汁氯化钠，另 只灌胃墨汁硫酸镁，剂量为0.2m/10g。 2.观察结果：20min或30mim后，将小鼠颈椎脱白处死，立即剖腹暴露胃肠，比较两鼠肠 蠕动及膨胀情况。然后分离幽门至直肠的肠系膜，将肠拉直，测量幽门至墨汁前沿的距离及幽 门至直肠末端的距离，并计算二者的比值。最后剪开肠腔，观察各鼠粪便性状有何不同。 【结果整理] 将观察结果填入表3中，分析硫酸镁的作用。 表3硫酸镁对小鼠肠道的作用 观察项目 给药鼠 对照鼠 肠蠕动情况 肠膨胀情况 幽门-墨汁前沿距离 啪门-直肠木端距离 二者之比 粪便性状 注意事项 1给药量力求准确，实验操作时间尽量一致，以减少条件不同带来的误差 2.分离肠系膜及测量肠段时应轻拉，以免影响肠内容物的观察， 3.指示剂也可选择卡红或炭末等。 讨论题1 硫酸镁的导泻作用原理及临床应用。 实验四呋塞咪和高渗葡萄糖对家兔的利尿作用 【目的】 观察呋塞咪和高渗葡萄糖对家免尿量及电解质排泄的影响 【原理】 利尿药和脱水药均可引起动物尿量增加，但其作用机理及作用强度不同。利尿药的利尿效 力与Na、C「的排泄量是一致的，而高渗葡萄糖则不同，通过测定尿中离子浓度可加以鉴别。 【材料】
@秦山医学院 省级精品课程申报 1.动物：家兔12只。 2.药品：10mgml失塞咪溶液(furoseoide solution):0.5gml葡萄糖溶液(glucose solution): 30mg/ml戊巴比妥钠溶液(sodium pentobarbital solution):生理盐水(normal saline)。 3.器材：免手术台，磅秤，手术器械，开口器，导尿管，膀胱套管，注射器，量筒烧杯，滴定 管，滴定管夹，铁支架，三角烧瓶，1ml吸管，滴管等。 【方法】 1.灌水：取家兔12只，于实验前30min,按30mkg分别给兔灌水，然后随机分为甲、乙、丙 3组。 2.麻醉：在兔耳外缘静脉注射30mgml戊巴比妥钠溶液1mlkg(30mgkg)。麻醉后将兔仰位固 定于手术台上。 3,插膀胱套管：下腹部剃毛，在耻骨联合上缘沿正中线做长约5cm的皮肤切口再沿腹白线剪 开腹壁及腹膜，暴露膀胱在其腹侧面避开血管作一长1cm的切口，插入己充满液体的膀胱套管 (应对淮输尿管口)。然后结扎固定，松开夹在套管橡皮管上的血管钳，尿液即经橡皮管滴出。 将膀胱回纳腹腔（切勿扭曲），用盐水纱布覆盖切口。 4.甲组静脉注射10mg/ml速尿溶液0.5mlkg(5mgkg:乙组静脉注射0.5g/ml的葡萄糖溶液 3mlkg(1.5gkg):丙组静脉注射生理盐水3mlkg。给药后每隔5min收集一次尿液，连续6次， 合并各次尿液，记录药后3min总尿量，并测定尿中Cr或Na的含量（测定方法见附1、2）. 【结果整理】 1.综合各组实验数据，计算不同时间尿量的均数(X)及标准差(SD),并将尿量及尿中离子 测定结果填入表4内 表10-8 药物对家免尿量及尿中高子含量的影响（仅SD) 药后尿量（1） 总尿C1量 5m1n10m1n15m1n20m1n25m1n30m1n总尿量(ag/m1)(mg) 10amg/m1速尿 0.5g/m1葡萄糖 生理盐水 2.以尿量为纵座标，时间为横座标作直方图 注：本实验亦可选用下列方法： 输尿管插管法：将免剖腹暴露膀胱后，在其底部两侧找出输尿管，轻轻分离一侧输尿管，近膀 胱处结扎。在其上端输尿管壁剪一小口，向肾脏方向插入一细塑料管，结扎固定后收集尿液