@泰山医学院 省级精品课程申报 兔导尿管法:选用维性家兔,麻醉后由尿道插入导尿管(管顶端应先涂抹液体石蜡,以保证顺 利插入),压迫下腹排空膀胱后再收集尿液 附1尿中氯离子测定法 【原理】先用硝酸银(AgNO)结合尿中氯离子(Cr),略过量的硝酸银便与铬酸钾(K2CO) 作用,生成桔红色的铬酸银(AgCO4)。以消耗硝酸银的多少来计算尿中氯离子含量。反应式 如下: +agC1+aN 2AgN03+K2Cr0a—→Ag2Cr04↓+2XN02 【试剂】 1.硝酸银标准液(每ml相当于C10.606mg):准确称取硝酸银2.9063g,置1000ml容量瓶中, 加少许蒸馏水溶解,再加蒸馏水至刻度。 2.0.29g/ml铬酸钾溶液:取铬酸钾20g,以新鲜蒸馏水溶解并稀释至100ml。 【方法】用吸量管准确吸取尿液ml,置于三角烧瓶内,再加蒸馏水10ml和0.29g/ml的铬酸 钾2滴,摇匀。读出并记录滴定管内硝酸银的ml数。向三角烧瓶内慢慢滴入硝酸银标准液,边 滴边摇。至原颜色渐退时,一滴一滴缓慢加入,直至出现不退色的桔红色。读出滴定管内所余 硝酸银的数量,计算出硝酸银消耗的ml数。计算公式为: C1~含量(ag/al)=滴定时消耗硝酸银标准液的m1数×0.606 总尿c1量=30ain内尿量(al)×c1含量(ag/al) 附2尿钠测定(比浊法): 【原理】用无水乙醇沉淀尿中蛋白,得出无蛋白尿滤液,与焦性锑酸钾(K(Sb(OH%)作用 生成焦性锑酸钠沉淀,与标准管比较求尿钠含量。其化学反应式如下: NaCl+K[Sb(OH)J- →[S5(OHa】+Kc 【试剂】 1.20mg/ml焦性锑酸钾溶液:称取焦性锑酸钾(KSb(O6])10g溶于沸蒸馏水500ml内:煮 沸3~5min,流水冷却,加100mgml氢氧化钾15ml,过滤后储存于塑料瓶或涂有石蜡的棕色 玻璃瓶中备用。 2.钠标准液(1ml0.15mg钠):取分析纯氯化钠置于110~120℃烤箱内烘烤15h以上。称取 此干燥氯化钠0.3815g,用50ml蒸馏水溶解,再以无水乙醇加至1000ml并充分混匀
网泰山医学院 省级精品课程申报 3.无水乙醇 【方法】取尿0.1ml加入无水乙醇1.9ml后用力震摇。放置10min,离心沉淀蛋白,取上清液按 下法操作: 比浊法尿钠测定操作顺序表 测定管标准管空白管 尿上清液(m1) 0.5 钠标准液(@) 0.5 墓窗水(1) 、 0.5 2%焦性佛酸钾(▣1) 55 5 注:焦性锑酸钾需对准管底吹入,操作完毕后混匀,立即比浊,以空白管调零点,波长520m。 计算: 测定管光密度0.075 尿Na*含量(g/ml) 标准管光密度0.025 总尿Na(og)=尿Na含量(eg/al)×30ain尿量(ml) 式中:0.075表示标准液中实际含钠数(1ml=0.15mg钠,0.5ml=0.075ml钠):0.025表示测定液 含尿量(0.1ml尿加无水乙醇1.9ml,稀释至2ml,实际仅取0.5ml供测定用,故为0.025)。 【注意事项】 1,尿液中加入无水乙醇后应用力振摇,以使之快速沉淀,且蛋白沉淀颗粒均匀。2.标准液应 临用现配,否则,光密度增高影响结果。 3.操作完毕后应立即比浊,否则,久置颗粒变粗姥响结果。 【讨论题】 1.利尿药和脱水药的定义,利尿作用及临床应用有何不同? 2.比较各类利尿药对尿电解质排泄影响。 实验五药物对麻醉动物动脉血压的影响 [实验目的 1观察传出神经系统药物对动物(免、猫或大鼠)动脉血压的影响以及药物之间的相互作
@泰山医学院 省级精品课程申报 2.分析药物的作用机制。 【实验原理] 传出神经系统药物通过作用于心脏和血管平滑肌上相应的受体(激动和阻断受体)产生心 血管效应,导致动脉血压的变化 实验材料 1.动物:猫(体重3kg左右)或大鼠(体重400g左右)或兔(体重2~3kg左右)。 2.药品:0.01mg/ml、lmg/ml氯化乙酰胆碱溶液(acetylcholine chloride solution:0.5mg/ml 甲基硫酸新斯的明碱溶液(neostigmine methylsulfate solution):10mg/ml硫酸阿托品溶液(atropine sulfate solution):0.lmg/ml盐酸肾上腺素溶液(adrenaline hydrochloride solution):0.lmg/ml重 酒石酸去甲肾上腺素溶液(noradrenaline bitarteate soution):0.05mg/ml硫酸异丙肾上腺素溶液 (isoprenaline sulfate solution):0mg/ml甲a磺酸酚妥拉明溶液(phentolamine methamesulfonate solution):10nmg/ml盐酸普萘洛尔溶液(propranolol oution):30mg/ml戊巴比妥钠溶液(sodiun pentobarbital solution)或200mg/ml乌拉坦(urethane solution):50oU/ml肝素溶液(heparin solution):生理盐水(normal saline)。 3器材:BL410生物机能实验系统,手术台,手术器械,动脉插管,动脉夹,静脉插管(或 代有三通的头皮针),气管插管,压力换能器,注射器(1ml、2m、20ml),三通活塞,纱布, 丝线,玻璃分针等。 方法脚 1.动物的麻醉与固定:取动物免(或猫或大鼠)1只,称重,耳缘静脉注射乌拉坦溶液1gkg (或30mgkg戊巴钠比妥溶液,猫30mgkg、大鼠40mg/kg),仰卧位固定于手术台上。 2.手术 ()气管插管用普通剪刀剪去颈部毛,正中切开颈部皮肤,分离气管,并做一倒T形切 口,插入气管插管并结扎固定,以保持呼吸畅通。 (2动脉插管在气管旁向下分离出一侧颈总动脉,将远心端用线节扎,近心端用动脉夹夹 闭,以阻断血流。在动脉夹与结扎线之间剪一v形口,向心方向插入与压力换能器相连并充满 肝素溶液的动脉插管(大鼠用细塑管),用线结扎固定。压力换能器与事先调试好的多媒体化生 物机能实验系统相连,打开动脉夹及换能器上的三通活塞,描记动脉血压变化情况。 3给药:在“记录状态”下,先记录一段正常血压曲线,然后依次由耳缘静脉分别注入下列 三组药物。每注入一种药物后,立即注入3ml生理盐水,将残留在管道内的药物全部输入到动 物体内。待血压基本恢复原水平或血压基本稳定后再注入下一种药物
网泰山医学院 省级精品课程申报 A组观察拟肾上腺素药对血压的作用及α-R阻断药对该作用的影响。 ①0.1mg/ml盐酸肾上腺素溶液10ugkg(0.1mkg) ②0.1mg/ml重酒石酸去甲肾上腺素溶液10ugkg(0.1mlkg) ③0.05mg/ml硫酸异丙肾上腺素溶液5ugkg(0.1mlg ①10mgml甲磺酸酚妥拉明溶液2mgkg(0.2mlg)缓慢注入 ⑤5min后,依次重复①、②、③ B组观察拟肾上腺素药对血压的作用及B-R阻断药对该作用的影响: ①0.1mgml盐酸肾上腺索溶液10ugkg(0.1mlkg) ②0.1mgml重酒石酸去甲肾上腺素溶液10μgkg(0.1mlkg) ③0.05mgml硫酸异丙肾上腺素溶液5μgkg(0.1mlkg) ④10mg/ml盐酸酚普萘洛尔溶液1mgkg(0.1mlg)缓慢注入 ⑤5mim后,依次重复①、②、③ C组:观察拟胆碱药对血压的作用及抗胆碱药对该作用的影响。 ①0.1mgml氯化乙酰胆碱溶液1μgkg(0.1mlkg) ②0.5mg/ml甲基硫酸新斯的明碱溶液50ugkg(0.1mlkg ③重复① ④10mg/ml硫酸阿托品溶液2mg/kg(0.2ml/kg) ⑤重复① ⑥1mgkg氯化乙酰胆碱溶液500gkg(0.5mlkg) 结果整理] 将描记血压曲线剪切、打印,分析药物作用。 【注意事项] 1.给药剂量可随动物实际反应情况酌情增减。 2.三组药物分别在三组动物上进行实验,效果更好。 3选用猫作实验的剂量与家兔基本相同。大鼠的剂量:肾上腺素30μgkg:去甲肾上腺素 30μgkg:异丙肾上腺素7.5ugkg:酚妥拉明3mgkg:普萘洛尔1.5mgkg:乙酰胆碱5μgkg:新 斯的明250ugkg:阿托品1mgkg 讨论题 根据实验结果,讨论所用药物对动物血压的影响及其作用机理
@泰山医学院 省级精品课程申报 实验六体外溶血实验 实验目的] 通过本实验认识溶血现象,并掌握溶血性试验的基本操作。 [实验原理] 溶血系指红细胞破裂、溶解的一种现象。多种中草药(如党参、桔梗、夹竹桃、远志、 三七等)含有皂苷,皂苷是一类表面活性剂,有很强的乳化力,具有溶血作用。另外,大 量输入低渗溶液以及含有某些甾体化合物的注射液也可以引起溶血。在溶血性检查中尚可 附带观察供试品有无红细胞凝集作用。 [实验材料] 家兔1只,体重2.53.0kg,唯雄不限(共采血之用)。 烧杯、竹签(去纤维蛋白用)、试管、试管架、滴管、吸管、离心机、恒温水浴。 5%远志煎剂或4%桔梗片煎剂。 方法与步骤剧 1.2%红细胞悬液的制备取新鲜兔血10一20ml,用竹签搅拌以除去纤维蛋白,再用生理 盐水冲洗3~5次。每次加生理盐水5~10ml,混匀后离心,弃去上清液,再加入生理盐水, 离心,直至上清液不呈红色为止。然后按所得红细胞的容积,用生理盐水配成2%的悬液: 2.取相同规格试管7支,编号,按表6依次加入各种溶液,第6管不加供试品,作为空白对 照,第7管不加供试品且用蒸馏水代替生理盐水,作为完全溶血对照。轻轻摇匀后置37℃ 的水浴中保温,观察0.5、1、2、3小时内各管的溶血情况 表6溶血实验加样表 试管 2 3 4 5 6 7 远志溶液(ml) 0.10.20.30.40.5 生理盐水(ml) 2.42.32.22.1 2.02.5 蒸馏水2.5 2%红细胞悬液(ml) 2.52.52.52.52.52.5 2.5 【结果处理] 全溶血:溶液澄明,红色,管底无红细胞残留 部分溶血:溶液澄明,红色或棕色,底部尚有少量红细胞残留。镜检红细胞稀少或变形。 不溶血:红细胞全部下沉,上层液体无色澄明。镜检红细胞不凝集。 凝集:业不溶血,但出现红细胞凝集,经振摇后不能分散,或出现药物性沉淀