膜蛋白及其与膜脂关系的三维结构分析 ·跨膜蛋白既有疏水区域（跨膜区），也有亲水区域（膜表面 区)，其结构解析主要是应用低温电镜技术和X射线晶体 衍射技术
膜蛋白及其与膜脂关系的三维结构分析 • 跨膜蛋白既有疏水区域(跨膜区)，也有亲水区域（膜表面 区），其结构解析主要是应用低温电镜技术和X射线晶体 衍射技术
(三)去垢剂 一端亲水、一端疏水的两性小分子，是分离与研究膜蛋白 的常用试剂 插入膜脂与膜脂或膜蛋白的跨膜结构域等疏水部位结合， 形成可溶性的微粒 高浓度 米非 微团 去垢剂 低浓度 溶解但不 形成微团
（三）去垢剂 • 一端亲水、一端疏水的两性小分子，是分离与研究膜蛋白 的常用试剂 • 插入膜脂与膜脂或膜蛋白的跨膜结构域等疏水部位结合， 形成可溶性的微粒
(三)去垢剂 ·离子型去垢剂：如SDS,可破坏蛋白质中离子键和氢键等 非共价键，甚至改变蛋白质亲水部分的构象 ·非离子去垢剂：如Triton X-100,对蛋白质作用比较温和， 用于膜蛋白的分离与纯化 IONIC DETERGENTS H CH2-CH2-COO-Na+ HaC-(CH2)1 O-Na Sodium deoxycholate Sodium dodecylsulfate(SDS) NONIONIC DETERGENTS HOCH, (CH)-CH3 CH2-CH2-O)9.s-H (Average) Triton X-100 Octylglucoside (polyoxyethylene(9.5)p-f-octylphenol) (octyl-B-p-glucopyranoside) e10-22
（三）去垢剂 • 离子型去垢剂：如SDS，可破坏蛋白质中离子键和氢键等 非共价键，甚至改变蛋白质亲水部分的构象 • 非离子去垢剂：如Triton X-100，对蛋白质作用比较温和， 用于膜蛋白的分离与纯化
(三)去垢剂 Na"-K'pump te特ipid bilaye CYTOSOL hydrophobic tail hydrophilic head solubilized membrane detergent micelles +monomers proteins detergent monomers lipid-detergent micelles membrane protein detergent PURIFICATION OF micelles in lipid bilayer Na'-K'pump REMOVAL OF ADDITION OF DETERGENT PHOSPHOLIPIDS (mixed with detergent) 米茶 water-soluble protein- water-soluble detergent lipid-detergent complex lipid-detergent micelles+ monomers micelles functional Na'-K'pump incorporated into phospholipid vesicle Figure 10-30 Molecular Biology of the Cell(Garland Science 2008) Figure 10-31 Molecular Biology of the Cell(Garland Science 2008)
（三）去垢剂 Figure 10-30 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Figure 10-31 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
四、膜糖 ·糖脂 细胞质膜上的膜糖都位于质膜外表面， ·糖蛋白 内膜系统中的膜糖则面向细胞器腔面. transmembrane adsorbed transmembrane glycoprotein glycoprotein proteoglycan ●=sugar residue carbohydrate layer -glycolipid lipid bilayer CYTOSOL Figure 10-28b Molecular Biology of the Cell(Garland Science 2008)
四、膜糖 • 糖脂 • 糖蛋白 Figure 10-28b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) 细胞质膜上的膜糖都位于质膜外表面， 内膜系统中的膜糖则面向细胞器腔面