PAM Guide RNA sequence Matching genomic Cas9 sequence Genomic DNA Y TX0XX H 画 Donor DNA Repair Targeted genome editing Human cells Bacterial cells Zebrafish
ZFN TALEN CRISPR/Cas 锌结合模块 传录激活样效应因子 FCk核耀脯 Fok/核酸情 20的胞位点年列 Ortriririt EGAMACC时eAGL13G-下 12100 Fak/核酸南 锌指结合模块 Fek核酸隋 转录激活样效应因子 显微注射TALEN/ZFN/CRISPR进大鼠胚胎 mRNA 移植（胚胎） 获取 CANU 灯 ■EwAM CAV CWAM 雄原核 S 显微注射 假孕养母大鼠 幼鼠（初始种群）
1.共同点 结构的相似性：无论是ZFN、TALEN还是CRISPR/Cas9,都是由DA识别域和核酸内切酶 两部分组成。其中ZFN技术具有锌指结构域能够识别靶点DNA,而TALEN的DNA识别区域 是重复可变双残基的重复，DA剪切区域都是一种名为Fok的核酸内切酶结构域。 CRISPR的DNA识别区域是crRNA:或向导RNA,Cas蛋白负责DNA的剪切。当DNA结合域识 别靶点DNA序列后，核酸内切酶或Cas9蛋白将DNA剪切，靶DNA双链断裂，再启动DNA损 伤修复机制，实现基因敲除、插入等。 作用过程的相似性：通过DNA识别模块对特异性的DNA位点识别并结合，然后在 相关核酸内切酶的作用下完成特定位点的剪切，从而借助于细胞内固有的HD（同源 定向修复)或HEJ(非同源末端连接)途径修复过程完成特定序列的插入、删除及基 因融合
1.共同点 结构的相似性：无论是ZFN、TALEN还是CRISPR/Cas9，都是由DNA识别域和核酸内切酶 两部分组成。其中ZFN技术具有锌指结构域能够识别靶点DNA，而TALEN的DNA识别区域 是重复可变双残基的重复，DNA剪切区域都是一种名为Fokl的核酸内切酶结构域。 CRISPR的DNA识别区域是crRNA或向导RNA，Cas9蛋白负责DNA的剪切。当DNA结合域识 别靶点DNA序列后，核酸内切酶或Cas9蛋白将DNA剪切，靶DNA双链断裂，再启动DNA损 伤修复机制，实现基因敲除、插入等。 作用过程的相似性：通过ＤＮＡ识别模块对特异性的ＤＮＡ位点识别并结合，然后在 相关核酸内切酶的作用下完成特定位点的剪切，从而借助于细胞内固有的HDR（同源 定向修复）或NHEJ（非同源末端连接）途径修复过程完成特定序列的插入、删除及基 因融合