pON-1MC5 reading frame1非· 常用载体 ens话amre时 面A工安g4因底单心A44 1、质粒 p0NB2 MCS (reading有am82头” PDNR-1.23 面山比（宜A或ET匹C立.电妙G1A5A 2、λ噬菌体 DN情-3 MCS irading frame3款· 3、哺乳动物 4些元5A上AA政的4AT点GAA 可 细胞载体 B-Galactosidase. 4、酵母载体 0 pug a 950 ImW ss'sIn 的sg83始总8 5、穿梭载体 8 房三关 cd857(nin月 FiGURE 2 Map of the Uni-ZAD XR insertion vector
常 用 载 体 1、质粒 2、λ噬菌体 3、哺乳动物 细胞载体 4、酵母载体 5、穿梭载体
半乳糖苷酶的蓝/白斑 筛选系统 Unpurified PCR product Ligate into pT-Adv 在质粒中含有LacZ基因的 a-肽的序列，当无外源DNA片段 插入时，质粒表达α-肽，它与 Col El 宿主菌的Lac ZM15基因的产物互 pT-Adv on 补，产生有活性的B-半乳糖苷 3.9kb Kan 酶，在含有指示剂X-ga|和诱导 剂IPTG存在的情况下，菌落呈蓝 Transform TOP10F cells plate on 色（质粒自身环化）；外源基因 LB/X-gal/PTG with amp or kan 插入后，肽基因阅读框架被破坏 细菌内无半乳糖苷酶活性存在 菌落呈白色（阳性克隆）
半乳糖苷酶的蓝/白斑 筛选系统 在质粒中含有LacZ基因的 α-肽的序列，当无外源DNA片段 插入时，质粒表达α-肽，它与 宿主菌的Lac ZM15基因的产物互 补，产生有活性的β-半乳糖苷 酶，在含有指示剂X-gal和诱导 剂IPTG存在的情况下，菌落呈蓝 色（质粒自身环化）；外源基因 插入后，肽基因阅读框架被破坏 ，细菌内无半乳糖苷酶活性存在 ，菌落呈白色（阳性克隆）