目的基因： β-actin基因·广泛存在于各物种细胞浆内，具有高度保守性的基因，即看家基因是主要的肌纤维：肌肉细胞与细胞骨架的主要编码成分，具有收缩功能），其蛋白表达丰富且相对稳定，可以作为其他基因和表达产物的参照物·公认的一种内参物
目的基因：β-actin基因 • 广泛存在于各物种细胞浆内，具有高度保守性的 基因，即看家基因 • 是主要的肌纤维：肌肉细胞与细胞骨架的主要编 码成分，具有收缩功能），其蛋白表达丰富且相 对稳定，可以作为其他基因和表达产物的参照物 • 公认的一种内参物
gene1..3454CDSjoin(945..1067,1202..1441,1883..2321,2417..2598,2711..2854)设计引物扩增具体位置gi372099105:c142907268-142902577MusmusculusstrainC57BL/6Jchrom0s0me5,GRCm38.pl57BL/6.H2881bp2261bp..第3.-5外显子部分区域·
>gi|372099105:c142907268-142902577 Mus musculus strain C57BL/6J chromosome 5, GRCm38.p1 C57BL/6J CTGTCGAGTCGCGTCCACCCGCGAGCACAGCTTCTTTGCAGCTCCTTCGTTGCCGGTCCACACCCGCCACCAGGTAAGCAGGGACGCCGGGCCCAGCGGGCCTTCG CTCTCTCGTGGCTAGTACCTCACTGCAGGGTCCTGAGGATCACTCAGAACGGACACCATGGGCGGGTGGAGGGTGGTGCCGGGCCGCGGAGCGGACACTGGCACAG CCAACTTTACGCCTAGCGTGTAGACTCTTTGCAGCCACATTCCCGCGGTGTAGACACTCGTGGGCCCGCTCCCGCTCGGTGCGTGGGGCTTGGGGACACACTAGGGT CGCGGTGTGGGCATTTGATGAGCCGGTGCGGCTTGCGGGTGTTAAAAGCCGTATTAGGTCCATCTTGAGAGTACACAGTATTGGGAACCAGACGCTACGATCACGCCT CAATGGCCTCTGGGTCTTTGTCCAAACCGGTTTGCCTATTCGGCTTGCCGGGCGGGCGGGCGGGCGGGCGGGCGCGGCAGGGCCGGCTCGGCCGGGTGGGGGCTG GGATGCCACTGCGCGTGCGCTCTCTATCACTGGGCATCGAGGCGCGTGTGCGCTAGGGAGGGAGCTCTTCCTCTCCCCCTCTTCCTAGTTAGCTGCGCGTGCGTATT GAGGCTGGGAGCGCGGCTGCCCGGGGTTGGGCGAGGGCGGGGCCGTTGTCCGGAAGGGGCGGGGTCACAGTGGCACGGGCGCCTTGTTTGCGCTTCCTGCTGGGTG TGGTCGCCTCCCGCGCGCGCACAAGCCGCCCGTCGGCGCAGTGTAGGCGGAGCTTGCGCCCGTTTGGGGAGGGGGCGGAGGTCTGGCTTCCTGCCCTAGGTCCGC CTCCGGGCCAGCGTTTGCCTTTTATGGTAATAATGCGGCCGGTCTGCGCTTCCTTTGTCCCCTGAGCTTGGGCGCGCGCCCCCTGGCGGCTCGAGCCCGCGGCTTGC CGGAAGTGGGCAGGGCGGCAGCGGCTGCTCTTGGCGGCCCCGAGGTGACTATAGCCTTCTTTTGTGTCTTGATAGTTCGCCATGGATGACGATATCGCTGCGCTGGTC GTCGACAACGGCTCCGGCATGTGCAAAGCCGGCTTCGCGGGCGACGATGCTCCCCGGGCTGTATTCCCCTCCATCGTGGGCCGCCCTAGGCACCAGGTAAGTGACC TGTTACTTTGGGAGTGGCAAGCCTGGGGTTTTCTTGGGGATCGATGCCGGTGCTAAGAAGGCTGTTCCCTTCCACAGGGTGTGATGGTGGGAATGGGTCAGAAGGACT CCTATGTGGGTGACGAGGCCCAGAGCAAGAGAGGTATCCTGACCCTGAAGTACCCCATTGAACATGGCATTGTTACCAACTGGGACGACATGGAGAAGATCTGGCAC CACACCTTCTACAATGAGCTGCGTGTGGCCCCTGAGGAGCACCCTGTGCTGCTCACCGAGGCCCCCCTGAACCCTAAGGCCAACCGTGAAAAGATGACCCAGGTCAG TATCCCGGGTAACCCTTCTCTTTGGCCAGCTTCTCAGCCACGCCCTTTCTCAATTGTCTTTCTTCTGCCGTTCTCCCATAGGACTCCCTTCTATGAGCTGAGTCTCCCT TGGATCTTTGCAGTTTCTGCTCTTTCCCAGACGAGGTCTTTTTTTCTCTCAATTGCCTTTCTGACTAGGTGTTTAAACCCTACAGTGCTGTGGGTTTAGGTACTAACAATG GCTCGTGTGACAAAGCTAATGAGGCTGGTGATAAGTGGCCTTGGAGTGTGTATTGAGTAGATGCACAGTAGGTCTAAGTGGAGCCCCTGTCCTGAGACTCCCAGCACA CTGAACTTAGCTGTGTTCTTGCACTCCTTGCATGTCTCAGATCTATCCATACAGTTTCACCTGCCCTGAGTGTTTCTTGTGGCTTTCTGAACTTGACAACATTATTTATTT TTCTCTACAGATCATGTTTGAGACCTTCAACACCCCAGCCATGTACGTAGCCATCCAGGCTGTGCTGTCCCTGTATGCCTCTGGTCGTACCACAGGCATTGTGATGGA CTCCGGAGACGGGGTCACCCACACTGTGCCCATCTACGAGGGCTATGCTCTCCCTCACGCCATCCTGCGTCTGGACCTGGCTGGCCGGGACCTGACAGACTACCTC ATGAAGATCCTGACCGAGCGTGGCTACAGCTTCACCACCACAGCTGAGAGGGAAATCGTGCGTGACATCAAAGAGAAGCTGTGCTATGTTGCTCTAGACTTCGAGCAG GAGATGGCCACTGCCGCATCCTCTTCCTCCCTGGAGAAGAGCTATGAGCTGCCTGACGGCCAGGTCATCACTATTGGCAACGAGCGGTTCCGATGCCCTGAGGCTCT TTTCCAGCCTTCCTTCTTGGGTAAGTTGTAGCCTAGTCCTTTCTCCATCTAAAGGTGACAAAACTCCTGAGGCCATAGTACAAGTTAAGTCTGATTTCTGTCACTCTTCT CTTAGGTATGGAATCCTGTGGCATCCATGAAACTACATTCAATTCCATCATGAAGTGTGACGTTGACATCCGTAAAGACCTCTATGCCAACACAGTGCTGTCTGGTGGT ACCACCATGTACCCAGGCATTGCTGACAGGATGCAGAAGGAGATTACTGCTCTGGCTCCTAGCACCATGAAGATCAAGGTAAGCTAAGCATCCTTAGCTTGGTGAGGG TGGGCCCTGTGGTTGTCAGAGCAACCTTCTAGGTTTAAGGGGAATCCCAGCACCCAGAGAGCTCACCATTCACCATCTTGTCTTGCTTTCTTCAGATCATTGCTCCTCC TGAGCGCAAGTACTCTGTGTGGATCGGTGGCTCCATCCTGGCCTCACTGTCCACCTTCCAGCAGATGTGGATCAGCAAGCAGGAGTACGATGAGTCCGGCCCCTCCA TCGTGCACCGCAAGTGCTTCTAGGCGGACTGTTACTGAGCTGCGTTTTACACCCTTTCTTTGACAAAACCTAACTTGCGCAGAAAAAAAAAAAATAAGAGACAACATTG GCATGGCTTTGTTTTTTTAAATTTTTTTTAAAGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAGTT 2881bp 2261bp 设计引物扩增具体位置 第3-5外显子部分区域 gene 1.3454 CDS join(945.1067,1202.1441,1883.2321,2417.2598, 2711.2854)
小鼠β-actin基因扩增引物621bp基于Beta-actin基因序列设计，扩增长度：F-CCACTGCCCGCATCCTCTTCCTCR-TCCTGCTTGCTGATCCACATCTUCSCIn-Silico PCRhttp://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr>Chr5:143665523-143666143621bPCCACTGCCCGCATCCTCTTCCTCTCCTGCTTGCTGATCCACATCTgCcactgCCGCATCCTcTTccTCcctggagaagagctatgagctgcctgacggccaggtcatcactattggcaacgagcggttccgatgccctgaggctcttttccagccttccttcttgggtaagttgtagcctagtcctttctccatctaaaggtgacaaaactcctgaggccatagtacaagttaagtctgatttctgtcactcttctcttaggtatggaatcctgtggcatccatgaaactacattcaattccatcatgaagtgtgacgttgacatccgtaaagacctctatgccaacacagtgctgtctggtggtaccaccatgtacccaggcattgctgacaggatgcagaaggaoattactgctctggctcctagcaccatgaagatcaaggtaagctaagcatccttagcttggtgagggtgggccctgtggttgtcagagcaaccttctaggtttaaggggaatcccagcacccagagagctcaccattcaccatcttgtcttgctttcttcagatcattgctcctcctgagcgcaagtactctgtgtggatcggtggctccatcctggcctcactgtccaccttccagcaGATGTGGATCAGCAAGCAGGAPrimer Melting TemperaturesForward: 72.2 C ccactgcccgcatcctcttcctcReverse: 64.4 c tcctgcttgctgatccacatct
基于Beta-actin基因序列设计，扩增长度：621bp F-CCACTGCCCGCATCCTCTTCCTC R- TCCTGCTTGCTGATCCACATCT 小鼠β -actin基因扩增引物 http://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr
1、小鼠基因组DNA提取实验目的：材料：小白鼠肝·试剂：DNA提取试剂盒器材：托盘（1个）、手术剪（3把，1大2小）、镊子(2个）EP管（12个）、研磨棒（12支）、生理盐水、加样器、吸头（500m4盒；100ul1盒）、废液瓶（4个）量筒（100ml1个）、PE手套（1包）仪器：往微量高速离心机（1台）、65℃水浴箱（1台）微量紫外分光光度计（1支）●分组：2人一组
1、小鼠基因组DNA提取 ⚫实验目的： ⚫材料：小白鼠肝 ⚫试剂：DNA提取试剂盒 ⚫器材：托盘（1个）、手术剪（3把，1大2小）、镊子（2个）、 EP管（12个）、研磨棒（12支）、生理盐水、 加样器、吸头（500ul 4盒；100ul 1盒）、废液瓶（4个） 量筒（100ml 1个）、PE手套（1包） ⚫仪器：微量高速离心机（1台）、65℃水浴箱（1台）、 微量紫外分光光度计（1支） ⚫分组：2人一组
实验准备1）小白鼠准备：取肝脏组织（若是血液，需加抗凝剂）DNA提取试剂盒准备（用前离心至底部）：22BufferGL处理：BufferGB处理：ElutionBuffer处理3）水浴箱：设56℃和65℃说明：BufferGL、GB和WA含变性剂，注意防护
实验准备 1）小白鼠准备；取肝脏组织（若是血液，需加抗凝剂） 2）DNA提取试剂盒准备（用前离心至底部）； ⚫ Buffer GL处理：若有沉淀，65℃复温溶解，室温温度下使用； ⚫ Buffer GB处理：加无水乙醇56ml混匀； ⚫ Elution Buffer处理： 65 ℃水浴； 3）水浴箱：设56℃和65 ℃ 说明：Buffer GL、GB和WA含变性剂，注意防护