TATA BOXβ-半乳糖苷酶基因透性酶基因乙酰基转移酶基因RA0RNApol调节基因操纵基因后劲垂因9>5mRNA调节蛋白IPTGIPTG:异丙基硫代β一半乳糖苷
调节基因 启动基因 操纵基因 β-半乳糖苷酶基因 透性酶基因 乙酰基转移酶基因 R P O Z Y A TATA BOX mRNA 调节蛋白 RNA RNA pol -pol IPTG ⚫IPTG:异丙基硫代β-半乳糖苷
操纵子调节基因PlacDNA-PiNICMCSLacz(N):lacztPlacLacz基因列N端部分,编码β-半端的46个AA(α-多肽)糖苷酸Plac通活性醇蛋白常受到外源DNA-ori抑制,pMD 19-T分解-9分解为蓝色但可被VectorIPTGα-互补解除ampRLacz(c] :LacZ基因序列C端部分,编码B-半糖苷酶C端部分EcoliXgal:5溴4氯3吲哚β一半乳糖苷·IPTG:异丙基硫代β一半乳糖苷
⚫Xgal:5溴4氯3吲哚β-半乳糖苷 ⚫IPTG:异丙基硫代β-半乳糖苷 Ecoli pMD 19-T Vector Plac Plac通 常受到 抑制, 但可被 IPTG 解除 活性酶蛋白 分解X-gal分解为蓝色 α-互补 LacZ(N): LacZ基因序列N端部分,编码β-半 糖苷酶N端的146个AA(α-多肽) LacZ(C): LacZ基因序列C端部分,编码β-半糖 苷酶C端部分 外源DNA 操纵子 调节基因 N C
实验安排1、小鼠基因组DNA提取2、PCR扩增、纯化与鉴定目的基因3、PCR扩增片段的重组、转化小鼠重组DNA菌株筛选及培养(挑菌、增菌)45、小鼠重组质粒的提取、酶切及鉴定
实验安排 1、小鼠基因组DNA提取 2、PCR扩增、纯化与鉴定目的基因 3、PCR扩增片段的重组、转化 4、 小鼠重组DNA菌株筛选及培养(挑菌、增菌) 5、 小鼠重组质粒的提取、酶切及鉴定
1、小鼠基因组DNA提取作为PCR扩增目的基因的模版目的基因:β-actin基因
1、小鼠基因组DNA提取 作为PCR扩增目的基因的模版 目的基因:β-actin基因