ROCH2 8 ROCH2 ⊙ ROCH2 B H20 -H20 +HOR' -OH O-H 0=P-0 0=P-0 OR' OH 0 OR' H20 2’0H有亲核攻击性 ROCH2 2'-isomer O OH 0:P-0 碱性条件下,RNA很容易降解
碱性条件下,RNA很容易降解 2’-OH 有亲核攻击性
重要应用 Alkali digestion② oligo(T)primer Reverse of mRNA template CDNA 3H0-TTTT'5 transcriptase dNTPs 3/H0 TTTnT 5' Attach oligo(dG) ③ to 3'end of cDNA 5 AAAA-OH 3 ① AAAnA-OH 3 mRNA Poly(A)tail mRNA Oligo(dc)primer 3'HO-GGpGG- Reverse transcriptase dNTPs 3'HO-GGnGG TTTnT 5' 5'CCpCC AAA A-OH 3' ④ Double-stranded CDNA 利用mRNA经逆转录生成cDNA时,在逆转录生成cDNA第一 链后,提高pH,RNA-DNA杂交双链中的RNA将被降解,而 cDNA第一链不被降解,可继续做模板合成其互补链,得到双 链CDNA
利用mRNA经逆转录生成cDNA时,在逆转录生成cDNA第一 链后,提高pH, RNA-DNA杂交双链中的RNA将被降解,而 cDNA第一链不被降解,可继续做模板合成其互补链,得到双 链cDNA。 重要应用
DNA与RNA的分子组成差异 碱基 戊糖 磷酸 DNA ATCG 脱氧核糖 磷酸 RNA AUCG 核糖 磷酸
DNA与RNA的分子组成差异 磷酸 磷酸 DNA RNA A T CG A U CG 脱氧核糖 核糖 碱 基 戊 糖 磷酸
二、核苷酸的结构 1.核苷(ribonucleoside)的形成 碱基和戊糖通过N-糖苷键连 接形成核苷(脱氧核苷)。 HO-CH2 核苷:AR,GR,UR,CR 脱氧核苷:dAR,dGR,dTR,dCR OHOH 25
二、核苷酸的结构 碱基和戊糖通过N-糖苷键连 接形成核苷(脱氧核苷)。 HO O C H2 OH OH N N NH2 O 1´ 1 1. 核苷(ribonucleoside)的形成 核苷:AR, GR, UR, CR 脱氧核苷:dAR, dGR, dTR, dCR 25
通常是戊糖的C1'与嘧啶碱的N1或嘌呤碱的N9相连接 Memory tips:"911" NH. NH HOCH2 HOCH H H H H OHOH OH OH OH OH Cytidine Uridine Adenosine Hypoxanthine HOCHa H()(H OH OH OH OH Guanosine Inosine,a less common nucleoside DNA和RNA中碱基均为反式构象
DNA和RNA中碱基均为反式构象 通常是戊糖的C1′与嘧啶碱的N1或嘌呤碱的N9相连接 Memory tips: “911