第四节 酶活性浓度的测定技术 16
16 第 四 节 酶活性浓度的测定技术
酶活性浓度的概念 1.酶的特性：微量性、高效性等。 2.酶促反应 直接测量非常困难 VL或mg/dl) 通过测定被加速化学反 应的反应速率，来间接 二此酶的浓度 E+S ES E+P dt 17
17 一、酶活性浓度的概念 1. 酶的特性：微量性、高效性等。 直接测量非常困难 （mmol/L或mg/dl） 通过测定被加速化学反 应的反应速率，来间接 反映酶的浓度 2. 酶促反应 S S E E + ES E P E + P V＝ ds dt 或 V＝ dp dt E S
3.酶活性浓度 即酶所催化的化学反应的反应速率，用 酶促反应中单位时间内底物的减少量或产物 的生成量来计算。 注意：只有当酶所催化的反应速度仅与E] 成正比，而不受其它因素影响时，即在酶促 反应的零级期，才能根据酶所催化的化学反 应速率来确切表示酶活性浓度的大小。 18
18 3. 酶活性浓度 即酶所催化的化学反应的反应速率，用 酶促反应中单位时间内底物的减少量或产物 的生成量来计算。 注意：只有当酶所催化的反应速度仅与 [E] 成正比，而不受其它因素影响时，即在酶促 反应的零级期，才能根据酶所催化的化学反 应速率来确切表示酶活性浓度的大小
实际上是通过检测酶活性浓度间接反映酶的 量，因为直接检测酶的质量浓度要求的实验条件 及技术条件非常高，价格昂贵，不适用于临床检 测，因此测定酶活性浓度是临床酶学分析最为常 见的方法，具有迅速、灵敏、成本低等特点。 但仅在上述前提下，只能在反应的零级期， 即只有在酶促反应的最适条件下，才能真实地代 表酶含量。因此可根据酶促反应进程曲线，采用 合理的方法进行酶活性浓度的检测。 19
19 实际上是通过检测酶活性浓度间接反映酶的 量，因为直接检测酶的质量浓度要求的实验条件 及技术条件非常高，价格昂贵，不适用于临床检 测，因此测定酶活性浓度是临床酶学分析最为常 见的方法，具有迅速、灵敏、成本低等特点。 但仅在上述前提下，只能在反应的零级期， 即只有在酶促反应的最适条件下，才能真实地代 表酶含量。因此可根据酶促反应进程曲线，采用 合理的方法进行酶活性浓度的检测
二、酶活性浓度测定方法 (一)按检测方法分类 根据底物或产物有特征性的物理化学特性（如颜 色、浊度、吸光度、pH、气体、放射性等)，设 计检测装置用于临床酶活性浓度测定。 检测装置：比色计，浊度仪，分光光度计，荧光 分光光度计，电位滴定仪，量积仪 20
20 二、酶活性浓度测定方法 （一）按检测方法分类 根据底物或产物有特征性的物理化学特性（如颜 色、浊度、吸光度、pH、气体、放射性等），设 计检测装置用于临床酶活性浓度测定。 检测装置：比色计，浊度仪，分光光度计，荧光 分光光度计，电位滴定仪，量积仪