二、线粒体的超微结构 Porins(a type of stalkless particle) -Outer membrane(OM) 外膜 Inner membrane (IM) 内膜 -Inter-membrane space膜间隙 -Matrix 线粒体基质 Ribosome -mRNA+polysome .9 Granule(calcium phosphate) Circular DNA molecule -ATP synthase(stalked particle) ETC http://cronodon.com/BioTech/Respiration.html
二、线粒体的超微结构 http://cronodon.com/BioTech/Respiration.html 外膜 内膜 膜间隙 线粒体基质
二入 线粒体的超微结构 ·外膜 一通透性很高；孔蛋白；标志酶是单胺氧化酶 ·内膜 -不透性；嵴；ATP合酶；标志酶是细胞色素氧化酶； 氧化磷酸化的关键场所 ·膜间隙 标志酶是腺苷酸激酶 线粒体基质 一催化线粒体重要生化反应；标志酶是苹果酸脱氢酶； 含DNA、RNA、核糖体及转录、翻译必需重要分子
二、线粒体的超微结构 • 外膜 – 通透性很高；孔蛋白；标志酶是单胺氧化酶 • 内膜 – 不透性；嵴；ATP 合酶；标志酶是细胞色素氧化酶； 氧化磷酸化的关键场所 • 膜间隙 – 标志酶是腺苷酸激酶 • 线粒体基质 – 催化线粒体重要生化反应；标志酶是苹果酸脱氢酶； 含DNA、RNA、核糖体及转录、翻译必需重要分子
线粒体组分分离的方法 matrix outer membrane INTACT inner membrane MITOCHONDRION -intermembrane space in medium of low osmolarity the influx of water causes the mitochondrion to swell and the outer membrane to rupture,releasing density-gradient centrifugation the contents of the intermembrane space;the separates the outer membrane inner membrane remains intact from the dense matrix and its surrounding inner membrane centrifugation leaves the contents disruption and centrifugation of the intermembrane space in the separate inner membrane from nonsedimenting fraction matrix components INTERMEMBRANE SPACE transfer to a medium of high osmolarity causes shrinkage INNER MATRIX OUTER MEMBRANE MEMBRANE
线粒体组分分离的方法
1、亚线粒体小泡 inner Outer ·用超声波破碎线粒体， mitochondrial mitochondrial F,spheres membrane membrane Inside-out 形成颗粒朝外的小膜泡 vesicles ,称亚线粒体小泡，具 b)Submitochondrial partices 日ectron transport2Yes a)Intact mitochondrion ATP synthesis?Yes 有正常的电子传递和磷 Electron transport?Yes ATPase activity?No ATP synthesis?Yes c)Dissoclated partice 酸化功能 Electron transport?Yes ATP synthesis?No ATPase activity?Yes ·用细胞色素c的抗体能够 抑制完整线粒体的氧化 (d)Membranous fraction (e)Soluble fraction withFspheres Electron transport?Yes Electron transport?No ATP synthesis?No ATP synthesis?No 磷酸化，但不能抑制亚 ATPase activity?No ATPase activity?Yes 线粒体颗粒的氧化磷酸 Reconstituted particle Electron transport?Yes ATP synthesis?Yes ATPase activlty?No 化，为什么？
1、亚线粒体小泡 • 用超声波破碎线粒体， 形成颗粒朝外的小膜泡 ，称亚线粒体小泡，具 有正常的电子传递和磷 酸化功能 • 用细胞色素c的抗体能够 抑制完整线粒体的氧化 磷酸化，但不能抑制亚 线粒体颗粒的氧化磷酸 化，为什么？ Inside-out vesicles
2、线粒体的化学组成 ·蛋白质（线粒体干重的6570%） ·脂类（线粒体干重的25~30%）： ·磷脂占3/4以上，外膜主要是卵磷脂 内膜和嵴主要含心磷脂（与膜的通透性低有关） ● 线粒体脂类和蛋白质的比值： ● 0.3:1（内膜)；1：1（外膜) 线粒体约有140余种酶，其中37%是氧化还原酶 ;10%为合成酶；9%为水解酶
2、线粒体的化学组成 • 蛋白质(线粒体干重的65～70％) • 脂类(线粒体干重的25～30％)： • 磷脂占3/4以上，外膜主要是卵磷脂 • 内膜和嵴主要含心磷脂（与膜的通透性低有关） 。 • ·线粒体脂类和蛋白质的比值: • 0.3:1（内膜）；1:1（外膜） • 线粒体约有140余种酶，其中37%是氧化还原酶 ；10%为合成酶； 9%为水解酶