二、PCR扩增理论模式（了解） PCR扩增一定的周期后，扩增产物的总数量可以用 以下公式来表示： Yn=X(1+E)" 扩增产物达到阈值线 Ycr=X(1+E)Ct Y:PCR产物的量X:原始模板的数量E:扩增效率 :扩增反应的循环次数Yc:荧光信号达到阈值线时扩增产物的量
二、PCR扩增理论模式（了解） PCR扩增一定的周期后，扩增产物的总数量可以用 以下公式来表示： Yn=X·(1+E) n YCt=X·(1+E) Ct 扩增产物达到阈值线 Yn：PCR产物的量 X：原始模板的数量 E：扩增效率 n：扩增反应的循环次数 YCt：荧光信号达到阈值线时扩增产物的量
Yc=X.(1+E)Ct 取对数 lgYc=-lglX·(1+E)ct] 整理得 Ct=-IgX/Ig (1+E)+Ig Yc/Ig (1+E) E和Yct初为常数，Ct值与1gX呈负相关，初始模 板的对数值与PCR的循环数呈线性关系，即初始模板 的量越多，扩增产物达到阈值所需要的循环数越少
YCt=X·(1+E) Ct 取对数 lg YCt= -lg[X·(1+E) Ct] E和 YCt初为常数，Ct值与lgX呈负相关，初始模 板的对数值与PCR的循环数呈线性关系，即初始模板 的量越多，扩增产物达到阈值所需要的循环数越少。 整理得 Ct= -lgX/ lg (1+E)+ lg YCt/ lg (1+E)
Delta Rn vs Cycle 104 103 109 18"622.26 ”种种””月”””#
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三、实时荧光定量PCR中的荧光化学物质（掌握） 荧光染料技术 O 水解探针技术 荧光探针技术 双杂交探针技术 O 分子信标技术
三、实时荧光定量PCR中的荧光化学物质（掌握） 荧光染料技术 荧光探针技术 双杂交探针技术 分子信标技术 水解探针技术
荧光染料技术（掌握） 荧光染料技术是一种非特异性的检测方法，目前常用的 荧光染料为SYBR Green I ①非特异地结合双链DNA小沟 ②与双链DNA结合后受激产生荧光 ③在变性条件下双链分开，荧光消失 SYBR Green I
荧光染料技术（掌握） 荧光染料技术是一种非特异性的检测方法，目前常用的 荧光染料为SYBR GreenⅠ ① 非特异地结合双链DNA小沟 ② 与双链DNA结合后受激产生荧光 ③ 在变性条件下双链分开，荧光消失 SYBR Green I