三、血清电泳组分分析 (P11) ◆血清蛋白电泳的正常组分分析 ◆异常电泳图谱的临床意义 11
11 三、血清电泳组分分析(P11) 血清蛋白电泳的正常组分分析 异常电泳图谱的临床意义
(一) 血清蛋白电泳的正常组分 分析 1、电泳定义: 在电场中,带电粒子向所带电荷相反的电极 移动的现象称之为电泳。 2、蛋白电泳原理: 蛋白质是两性电解质,当pH>pI,其带负电 荷,当pH<pL,其带正电荷,pH=pI,不带 电荷。由于其等电点大多接近于5.0且不 同,分子量也不同,因此在电场迁移率也 不同。 12
12 (一)血清蛋白电泳的正常组分 分析 1、 电泳定义: 在电场中,带电粒子向所带电荷相反的电极 移动的现象称之为电泳。 2、 蛋白电泳原理: 蛋白质是两性电解质,当pH>pI,其带负电 荷,当pH<pI,其带正电荷, pH=pI,不带 电荷。由于其等电点大多 接近于5.0且不 同,分子量也不同,因 此在电场迁移率也 不同
血清蛋白电泳的正常组分 以%表示: O.D Alb:57%~68% a1:1.0%w5.7% Alb 02 02:4.9%w11.2% 0.1 :7%w13% 10 20 30 40 50 60 70 0 90 100 Y:9.8%w18.2% m 以gL表示: Alb:35~52 g/L a1:1.04.0g/L 正常人血清蛋白质醋酸纤维蒲膜电泳图谱和扫描曲线示意图 2:4.0-8.0g/L *图中“一·一·一·”各组分蛋白带的分界线。 f:5.0-10.0g/L Y6.0-13.0g/L 13
13 以%表示: Alb: 57%~68% α1: 1.0%~5.7% α2: 4.9%~11.2% β: 7%~13% γ: 9.8%~18.2% 以g/L表示: Alb: 35~52 g/L α1: 1.0~4.0 g/L α2: 4.0~8.0 g/L β: 5.0~10.0 g/L γ: 6.0~13.0 g/L 血清蛋白电泳的正常组分
3、图形分析 直接法:电泳染色后,直接观察图形的变 化,大概判断各区带的增减。如需定量, 可进一步脱色、比色。 光密度扫描法:可直接观察各区带的扫描图 形,且可以以数值表示各组分的含量。 14
14 3、图形分析 直接法:电泳染色后,直接观察图形的变 化,大概判断各区带的增减。如需定量, 可进一步脱色、比色。 光密度扫描法:可直接观察各区带的扫描图 形,且可以以数值表示各组分的含量
怎样判断蛋自电泳图谱 区带的外观:(估算) ◆ 区带的浓度:测定区带P含量(相对 值),洗脱法或直接光密度。 ◆ 波峰(光密度扫描):同一浓度下,波 峰的高度和宽度与P的纯度密切相关。 均一P:形成一个窄、顶尖和峰高的波 峰 数种P:形成一个宽、顶平和峰低的波 峰 15
15 怎样判断蛋白电泳图谱 区带的外观:(估算) 区带的浓度:测定区带Pr含量(相对 值),洗脱法或直接光密度。 波峰(光密度扫描):同一浓度下,波 峰的高度和宽度与Pr的纯度密切相关。 均一Pr:形成一个窄、顶尖和峰高的波 峰 数种Pr:形成一个宽、顶平和峰低的波 峰