信号检测与分析 当细胞携带荧光素标记物,通过激光照射 时,产生代表细胞内不同物质、不同波长 的荧光信号,这些信号以细胞为中心,向 空间360度立体角发射,产生射光和荧光 信号。 ·以激发光光源波长488nm为例示意图:
信号检测与分析 • 当细胞携带荧光素标记物,通过激光照射 时,产生代表细胞内不同物质、不同波长 的荧光信号,这些信号以细胞为中心,向 空间360度立体角发射,产生散射光和荧光 信号。 • 以激发光光源波长488nm为例示意图:
荧光信号示意图 675nm A 575nm 激光488nm (PerCP PE M 513nm MM FITC
荧光信号示意图
散射光信号 散射光信号不依赖任何样品的制备技术 (如染色),因此称为细胞的物理参数。 - 前向散射角(Forward Scatter,FSC):与细胞 的大小有关,在FCM应用中,常取FSC作阈值, 来排除样品中的各种碎片。 侧向散射角(Side Scatter.,SSC):与激光束正 交0度的散射光信号,与细胞粒度及复杂程度 正相关。 散射光信号波长与激光相同
散射光信号 • 散射光信号不依赖任何样品的制备技术 (如染色),因此称为细胞的物理参数。 – 前向散射角(Forward Scatter,FSC):与细胞 的大小有关,在FCM应用中,常取FSC作阈值, 来排除样品中的各种碎片。 – 侧向散射角(Side Scatter,SSC):与激光束正 交90度的散射光信号,与细胞粒度及复杂程度 正相关。 • 散射光信号波长与激光相同
散射光信号示意图 Right Angle Light Detector a Cell Complexity Incident Light Source Forward Light Detector a Cell Surface Area
散射光信号示意图 Right Angle Light Detector a Cell Complexity Forward Light Detector a Cell Surface Area Incident Light Source
荧光信号 一种是细胞自身在激光照射下发出微弱的 荧光信号,称自发荧光。 一种是经过特异荧光素标记后,受激发光 照射得到的荧光信号,通过对这类荧光信 号的检测和定量就能了解所研究细胞参数 的存在与定量
荧光信号 • 一种是细胞自身在激光照射下发出微弱的 荧光信号,称自发荧光。 • 一种是经过特异荧光素标记后,受激发光 照射得到的荧光信号,通过对这类荧光信 号的检测和定量就能了解所研究细胞参数 的存在与定量