W40疑胶的排邦阻极限小,蛋白质的分配系数=0 (D,ccudp) HETP=2D/u 约为常数 W55F凝胶的排阻极限较大,该凝胶柱中>0 HETP随u线性增大 在u=0处直线交于一点即HETP=2D,/u) 当u<0.2cm/min时,NaC的HETP随流速降低急剧 增大,主要是由于分子扩散的影响
BUCT 16 HW40F凝胶的排阻极限小,蛋白质的分配系数m=0 在u=0处直线交于一点(即HETP=2Dz /u) HW55F凝胶的排阻极限较大,该凝胶柱中m>0 HETP=2Dz /u (Dzudp ) 约为常数 HETP随u线性增大 当u<0.2cm/min时,NaCl的HETP随流速降低急剧 增大,主要是由于分子扩散的影响
设无因次参数: BUCT h=HETP/d (无因次理论板当量高度) v =ud,I D 无因次线速度)】 Pe=udp/Dz (peclet;准数 Ys= D./Dm 表征颗粒内部的不规则 特性(曲折) 固相扩散系数 流动相的扩散系数
BUCT 17 设无因次参数: h HETP d p = / (无因次理论板当量高度) v = ud p / Dm (无因次线速度) (peclet准数) s De Dm = / Pe=udp /Dz 表征颗粒内部的不规则 特性(曲折) 固相扩散系数 流动相的扩散系数
理论板当量高度的无因次表达式 BUCT 2 mH D h= =4+By P。 (1+m)230y. 10.0 v=0时,h=2-3, NaCl 即HETP为凝胶粒 5.0 径的2-3倍。 凝胶粒径不同 操作温度不 50 同,流速不同 v=ud 图7.14中压GFC的无因次理论板当量高度与无因次线速度的关系[幻 层析柱及料液同图7.13温度:10~40℃,凝胶粒径:35~754m
BUCT 18 理论板当量高度的无因次表达式 A Bv v m mH P h e s = + + = + (1 ) 30 2 2 =0时,h=2-3, 即HETP为凝胶粒 径的2-3倍。 凝胶粒径不同 ,操作温度不 同,流速不同
2、料液体积 0.04 HETP为常数 式(742) 月 0.025 HETP个 料液体积在不影响分离 0.01 度的前提下取最大值。 0 0.01 0.1 to/t 图7.15料液体积对HETP的影响3] 层析柱:22×300,Toyopearl HW55F, d。=44m;料液:0.1%肌红蛋白 u=0.87cm/min 用无因次进料时间(t/:)表示料液体积
BUCT 19 2、料液体积 用无因次进料时间(t0 /)表示料液体积 料液体积在不影响分离 度的前提下取最大值。 HETP为常数 HETP
3、料液浓度 BUCT 理论上,洗脱时间和HETP与料液浓度无关。 实际上,料液浓度较高时,洗脱曲线常呈现不 对称形状,如出现吐舌或拖尾,甚至出现分裂 的两个峰,使HETP急剧增大。 主要原因是料液区和流动相的粘度差引起的。 经验表明,料液与流动相的粘度比需小于2 20
BUCT 20 实际上,料液浓度较高时,洗脱曲线常呈现不 对称形状,如出现吐舌或拖尾,甚至出现分裂 的两个峰,使HETP急剧增大。 主要原因是料液区和流动相的粘度差引起的。 经验表明,料液与流动相的粘度比需小于2 3、料液浓度 理论上,洗脱时间和HETP与料液浓度无关