(3)溶胀率:+ BUCT 市售干燥凝胶颗粒使用前要用水溶液进行溶胀处理 溶胀后每克干凝胶所吸收的水分的百分数 溶胀率=100%×溶胀处理平衡后重量王操重量 干燥重量 Sphadex G50的溶胀率为500%士30%。 Sphadex G系列中的凝胶型号与溶胀率有关
BUCT 11 市售干燥凝胶颗粒使用前要用水溶液进行溶胀处理 ,溶胀后每克干凝胶所吸收的水分的百分数 (3)溶胀率: 溶胀率=100% (溶胀处理平衡后重量-干燥重量) 干燥重量 Sphadex G50的溶胀率为500%士30%。 Sphadex G系列中的凝胶型号与溶胀率有关
4)凝胶粒径 BUCT 般为球形,粒径越小,HETP越小,分离效率越 高。 凝胶粒径多用筛目或微米表示。 软凝胶粒径较大,一般为50-150μm(100-200目), 硬凝胶粒径较小,一般为5-50μm。 例如,Sepharose和Sephadex凝胶粒径分布为45-165μm 而Superose和TSK Toyopearl HW系列可小到20-40um 甚至6-10μm
BUCT 12 一般为球形,粒径越小,HETP越小,分离效率越 高。 凝胶粒径多用筛目或微米表示。 软凝胶粒径较大,一般为50-150m(100-200目), 硬凝胶粒径较小,一般为5-50m。 例如,Sepharose和Sephadex凝胶粒径分布为45-165m ,而Superose和TSK Toyopearl HW系列可小到20-40m ,甚至6-10m。 (4)凝胶粒径:
BUCT (⑤)床体积bed volume): 1g干燥凝胶溶胀后所占有的体积。 SephadexG50的床体积为9-11cm3/g干胶。 (6)空隙体积(void volume): 指层析柱中凝胶之间空隙的体积,即Vo值。 空隙体积可用相对分子质量大于排阻极限的溶质测 定。 一般使用平均相对分子质量为2000kD的水溶性蓝色 葡聚糖(blue dextran)。 13
BUCT 13 (6)空隙体积(void volume): 指层析柱中凝胶之间空隙的体积,即Vo值。 空隙体积可用相对分子质量大于排阻极限的溶质测 定。 一般使用平均相对分子质量为2000kD的水溶性蓝色 葡聚糖 (blue dextran)。 (5)床体积(bed volume): 1g干燥凝胶溶胀后所占有的体积。 SephadexG50的床体积为9-11cm3/g干胶
三、 影响分离特性的因素 人BUCT H(m2-m)Ln 分离度 Rs 1/2 4(1+m H)HETP HETP是影响溶质之间分离度的重要因素。 A HETP= +B+Cu u 14
BUCT 14 HETP是影响溶质之间分离度的重要因素。 三、 影响分离特性的因素 ( ) ( ) 2 1/ 2 1/ 2 2 1 4 1 m H HETP H m m L Rs + − 分离度 = B Cu u A HETP = + +
1、流动相线速度 BUCT 0.04 BSA OA ● Mb m>0 0.03 P B12 0.02 0.01 00B--一000<】1 HIW40F、Mb和OA m=0 0 LL 0 0.5 1.0 1.5 /(cm/min) 图7.13中压GF(的HETP与线速度的关系(20℃)[] 层析柱:16X300;HW55F:Toyopearl HW55F,d,=44mi HW40F:Toyopearl HW40F,dp=44gm: BSA一牛血清白蛋白:OA一蛋清白蛋白:Mb一肌红蛋白;B12一维生素12 15
BUCT 15 1、流动相线速度 m=0 m>0