1.来源 主要是从原核生物中分离纯化出来。 2.性质 内切酶。 即在核酸分子链的内部制造切口的酶。 3.功能 帮助细菌限制外来DNA的入侵 细菌的限制和修饰系统(RM体系)
2. 性质 内切酶。 主要是从原核生物中分离纯化出来。 即在核酸分子链的内部制造切口的酶。 帮助细菌限制外来DNA的入侵 3. 功能 细菌的限制和修饰系统（R/M体系） 1. 来源
(1)限制( Restriction) 限制性内切酶将侵入细菌体内的外源DNA切 成小片断 Restriction anzyme \ ECORI Unmethylated 5 3 NA 3 浮匚 5 Cleavage Sticky end AATT CD 3 CT TAA 5
限制性内切酶将侵入细菌体内的外源DNA切 成小片断。 （1）限制（Restriction）
(2)修饰( Modification) 细菌自身的DNA碱基被甲基化酶甲基化修饰所保 护,不能被自身的限制性内切酶识别切割。 ①Dam甲基化酶 GATC腺嘌呤N6位置引入甲基 ②Dcm甲基化酶 CCAGG或 CCTGG序列在第二个C上C5 位置上引入甲基
细菌自身的DNA碱基被甲基化酶甲基化修饰所保 护，不能被自身的限制性内切酶识别切割。 （2）修饰（Modification） ① Dam甲基化酶 GATC 腺嘌呤N6位置引入甲基 ② Dcm甲基化酶 CCAGG或CCTGG序列在第二个C上C5 位置上引入甲基
b ECORI methylase Unmethylated 5 GAAT T CE 3 DNA 3 C T TAAG 5 Restriction\ enzye ECORI EcoRI will not cleave methylated DNA Methylated 5 GA ATTC 3 DNA CTTAA G CH
Enzyme Sequence Dam Dcm CpG Aat GACGTc Acc I GTMKAC □ol ACC65 GGTACC □scol□scol Aci l CCGC Acl I AACGTT Acu I CTGAAG(16/14) Afe AGCGCT Afl ll CTTAAG ●●●● Afl ll ACRYGT Age I ACCGGT Ahd GACNNNNNGTc □scol 图标说明: 不敏感完全阻断□sool某些重叠组合后被阻 断o重叠性阻断◆阻碍◇重叠性阻碍 ◇sool某些重叠组合后被阻碍 Referhttp://rebase.neb.com/rebase/
Enzyme Sequence Dam Dcm CpG Aat II GACGTC ● ● ■ Acc I GTMKAC ● ● □ol Acc65 I GGTACC ● □scol □scol Aci I CCGC ● ● ■ Acl I AACGTT ● ● ■ Acu I CTGAAG(16/14) ● ● ● Afe I AGCGCT ● ● ■ Afl II CTTAAG ● ● ● Afl III ACRYGT ● ● ● Age I ACCGGT ● ● ■ Ahd I GACNNNNNGTC ● ● □scol 图标说明： ● 不敏感 ■完全阻断 □scol某些重叠组合后被阻 断 □ol重叠性阻断 ◆阻碍 ◇ol重叠性阻碍 ◇scol某些重叠组合后被阻碍 Refer: http://rebase.neb.com/rebase/