• 凝胶电泳的分辨力: 与凝胶的类型和密度相关 琼脂糖凝胶的分辨力在0.2~50Kb之间; 聚丙烯酰胺的分辨力在1~1000bp之间
• 凝胶电泳的分辨力: 与凝胶的类型和密度相关 琼脂糖凝胶的分辨力在0.2~50Kb之间; 聚丙烯酰胺的分辨力在1~1000bp之间
•琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖是一种从红色海藻中提取出的 线性多糖聚合物。 分为常熔点的琼脂糖和低熔点(LMP) 琼脂糖
•琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖是一种从红色海藻中提取出的 线性多糖聚合物。 分为常熔点的琼脂糖和低熔点(LMP) 琼脂糖
• LMP琼脂糖 熔点:62~65℃ 熔解后,在37℃可保持液态数小时; 在25℃ 可保持液态约10min
• LMP琼脂糖 熔点:62~65℃ 熔解后,在37℃可保持液态数小时; 在25℃ 可保持液态约10min
• 回收DNA分子 在65℃ 下将LMP琼脂糖凝胶熔化; 加入过量的酚抽提DNA; 离心获得含DNA分子的上清液; • 直接酶切
• 回收DNA分子 在65℃ 下将LMP琼脂糖凝胶熔化; 加入过量的酚抽提DNA; 离心获得含DNA分子的上清液; • 直接酶切
• 琼脂糖凝胶电泳的参数: 缓冲液:1× TAE(TBE TPE) 凝胶的含量:根据检测的DNA大小 加DNA样品:<1μg,指示剂 电泳条件:大片断低电压长时间,小片段高电压短 时间 染色和观察:溴化乙锭(ethidium bromide,EB) 染色,在300nm波长的紫外下观察(凝胶成像仪)。 能看到0.05 μg的微量DNA DNA的片断大小与荧光强度成正比
• 琼脂糖凝胶电泳的参数: 缓冲液:1× TAE(TBE TPE) 凝胶的含量:根据检测的DNA大小 加DNA样品:<1μg,指示剂 电泳条件:大片断低电压长时间,小片段高电压短 时间 染色和观察:溴化乙锭(ethidium bromide,EB) 染色,在300nm波长的紫外下观察(凝胶成像仪)。 能看到0.05 μg的微量DNA DNA的片断大小与荧光强度成正比