霍乱弧菌本词条由“科普中国”百科科学词条编写与应用工作项且审核霍乱弧菌（Vibriocholerae）是革兰氏阴性菌，菌体短小呈逗点状，有单鞭毛菌毛，部分有荚膜。共分为139个血清群，其中01群和0139群可引起霍乱[1]o霍乱弧菌是人类霍乱的病原体，霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚高。属于国际检疫传染病。中文名霍乱弧菌外文名V.cholera病毒人类霍乱的病原体生物型古典生物型和埃尔托生物型形态特征菌体弯曲呈弧状或逗点状抵抗力耐低温，耐碱感染后症状引起烈性肠道传染病霍乱目录1.1简介2.2性状3.·形态与培养特性4.：抗原性5.·抵抗力6.3检测方法1.·生化鉴定2.·血清凝集法3.·聚合酶链反应法4.·基因芯片5.4 症状6.·致病因素1.·所致疾病2.：免疫性3.5诊断
霍乱弧菌 本词条由“科普中国”百科科学词条编写与应用工作项目 审核 。 霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是革兰氏阴性菌，菌体短小呈逗点状，有单鞭毛、 菌毛，部分有荚膜。共分为 139 个血清群，其中 O1 群和 O139 群可引起霍乱 [1] 。 霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。 曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚 高。属于国际检疫传染病。 中文名 霍乱弧菌 外文名 V.cholera 病 毒 人类霍乱的病原体 生物型 古典生物型和埃尔托生物型 形态特征 菌体弯曲呈弧状或逗点状 抵抗力 耐低温，耐碱 感染后症状 引起烈性肠道传染病霍乱 目录 1. 1 简介 2. 2 性状 3. ▪ 形态与培养特性 4. ▪ 抗原性 5. ▪ 抵抗力 6. 3 检测方法 1. ▪ 生化鉴定 2. ▪ 血清凝集法 3. ▪ 聚合酶链反应法 4. ▪ 基因芯片 5. 4 症状 6. ▪ 致病因素 1. ▪ 所致疾病 2. ▪ 免疫性 3. 5 诊断
4.·直接镜检5.·细菌分离培养6.·特异性制动试验1.·免疫荧光试验2.6特征3.7发病机制4.8防治原则简介弧菌属（vibrio)中霍乱弧菌（V.cholerae）、引起一种烈性肠道传染病，发病急、传染性强、病死率高，属于国际检疫传染病。霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（Classicalbiotype）和埃尔托生物型(EL-Tor bio-type?霍乱弧菌）。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来，全球共发生了七次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌，第七次病原是埃尔托型所致[1]1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫。在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。性状形态与培养特性新从病人分离出古典型霍乱弧菌和ELtor弧菌比较典型，为革兰氏阴性菌，菌体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。经人工培养后，易失去弧形而呈杆状。取霍乱病人米油水样粪便作活菌悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。在液体培养基内常呈单个、成对成链状，有的相连呈S形，甚至螺旋状。营养要求不高，在x霍乱弧菌PH8.8～9.0的碱性蛋白陈水或平板中生长良好。因其他细菌在这一PH不易生长，故碱性蛋白陈水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。在碱性平板上菌落直径为2mm，圆形，光滑，透明
4. ▪ 直接镜检 5. ▪ 细菌分离培养 6. ▪ 特异性制动试验 1. ▪ 免疫荧光试验 2. 6 特征 3. 7 发病机制 4. 8 防治原则 简介 弧菌属(Vibrio)中霍乱弧菌(V．cholerae)、引起一种烈性肠道传染病，发病 急、传染性强、病死率高，属于国际检疫传染病。 霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（Classical biotype）和埃尔托生物型 （EL-Tor bio-type 霍乱弧菌 ）。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在 临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自 1817 年以来，全球共发生了七 次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌，第七次病原是埃尔托型所致 [1] 。 1992 年 10 月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株 （0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但 不能被 01 群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗 01 群的抗血清对 0139 菌株无保护性 免疫。在水中的存活时间较 01 群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱 流行的新菌株。 性状 形态与培养特性 新从病人分离出古典型霍乱弧菌和 ELtor 弧菌比较典型，为革兰氏阴性菌，菌 体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。经人工 培养后，易失去弧形而呈杆状。取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察，可 见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。在液体培养基内常呈单个、成对成链 状，有的相连呈 S 形，甚至螺旋状[1] 。 营养要求不高，在 霍乱弧菌 PH8.8～9.0 的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一 PH 不易生 长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。在碱性平板上菌落 直径为 2mm,圆形，光滑，透明
霍乱弧菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐，靛基质反应阳性，当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为霍乱红反应，但其他非致病性弧菌亦有此反应，故不能凭此鉴定霍乱弧菌。ELTor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同。前者Vp阳性而后者为阴性。前者能产生强烈的溶血素，溶解羊红细胞，在血平板上生长的菌落周围出现明显的透明溶血环，古典型霍乱弧菌则不溶解羊红细胞。个别ELTor型霍乱弧菌株亦不溶血。抗原性根据弧菌0抗原不同，分成VI个血清群，第I群包括霍乱弧菌的两个生物型。第I群A、B、C三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含AC者为原型（又称稻叶型），含AB者为异型（又称小川型），A、B、C均有者称中间型（彦岛型）。抵抗力霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，EL-Tor生物型抵抗力较强，在河水、井水、海水中可存活1～3周，在鲜鱼，贝壳类食物上存活1～2周。霍乱弧菌对热，干燥，日光，化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温，耐碱。湿热55℃，15分钟，100℃，1~2分钟，水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存4分钟。检测方法生化鉴定能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、半乳糖等产酸产气，迟缓发酵乳糖。不分解阿拉伯糖、水杨素、卫矛醇、鼠李糖、木糖、侧金盏花醇和肌醇。氧化酶、明胶液化试验阳性。V-P试验大多数EL-Tor生物型阳性，而古典生物型大多为阴性。霍乱弧菌能分解色氨酸产生吲哚，同时能还原硝酸盐为亚硝酸盐。因此当霍乱弧菌培养在含硝酸盐的蛋白陈水中，所产生的亚硝酸盐与吲哚结合成亚硝基吲哚，滴加浓硫酸即出现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性"0血清凝集法根据弧菌0抗原不同，分成VI个血清群，第I群包括霍乱弧菌的两个生物型。第I群A、B、C三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含AC者为原型（又称稻叶型），含AB者为异型（文称小川型），A、B、C均有者称中间型（彦岛型）
霍乱弧菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐，靛基质反应阳性，当培养在含硝酸盐及色 氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为 霍乱红反应，但其他非致病性弧菌亦有此反应，故不能凭此鉴定霍乱弧菌。EL Tor 型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同。前者 Vp 阳性而后者为阴 性。前者能产生强烈的溶血素，溶解羊红细胞，在血平板上生长的菌落周围出 现明显的透明溶血环，古典型霍乱弧菌则不溶解羊红细胞。个别 EL Tor 型霍乱 弧菌株亦不溶血。 抗原性 根据弧菌 O 抗原不同，分成Ⅵ个血清群，第Ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。 第Ⅰ群 A、B、C 三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含 AC 者为原型 （又称稻叶型），含 AB 者为异型（又称小川型），A、B、C 均有者称中间型 （彦岛型）。 抵抗力 霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，EL-Tor 生物型抵抗力较强，在河 水、井水、海水中可存活 1～3 周，在鲜鱼，贝壳类食物上存活 1～2 周。 霍乱弧菌对热，干燥，日光，化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温，耐碱。湿热 55℃，15 分钟，100℃，1～2 分钟，水中加 0.5ppm 氯 15 分钟可被杀死。0.1% 高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存 4 分钟。 检测方法 生化鉴定 能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、半乳糖等产酸产气，迟缓发酵乳糖。 不分解阿拉伯糖、水杨素、卫矛醇、鼠李糖、木糖、侧金盏花醇和肌醇。氧化 酶、明胶液化试验阳性。V-P 试验大多数 EL-Tor 生物型阳性，而古典生物型大 多为阴性。霍乱弧菌能分解色氨酸产生吲哚，同时能还原硝酸盐为亚硝酸盐。 因此当霍乱弧菌培养在含硝酸盐的蛋白胨水中，所产生的亚硝酸盐与吲哚结合 成亚硝基吲哚，滴加浓硫酸即出现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性[1] 。 血清凝集法 根据弧菌 O 抗原不同，分成Ⅵ个血清群，第Ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。 第Ⅰ群 A、B、C 三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含 AC 者为原型 （又称稻叶型），含 AB 者为异型（又称小川型），A、B、C 均有者称中间型 （彦岛型）
1992年10月在印度东南部又发现了二个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群崔乱弧菌诊断血清所凝集，抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫。在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株，推荐使用天津生物芯片生产的霍乱弧菌诊断血清。聚合酶链反应法1，普通聚合酶链反应法核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerasechainreaction，PCR），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。一般选择霍乱肠毒素（choleraenterotoxin，CT）基因ctx的保守序列作为靶基因。一些非产毒株（如环境来源的菌株)有可能通过基因水平转移获得毒力基因成为产毒株，若仅检测ctx基因容易造成漏检。因此，霍乱弧菌的其他重要基因，如毒力协同调节菌毛A基因(tcpA)、o抗原基因(rfb）、外膜蛋白基因(omp)以及毒力表达调控基因（toxR)等也被选用为PcR的靶基因，这大大提高了检测的特异度2，多重PCR法与常规PCR相比，多重PCR一次反应可检测多个基因，节省了时间和成本。国内、外许多学者选用霍乱弧菌的毒素基因ctx、tcp与其他基因如ompW、rfb、hly进行组合，作为共同的靶基因，克服了由于毒力基因特异度不够高而造成的假阳性。多重PcR同时可准确区分不同血清型的霍乱弧菌和快速鉴定其是否为产毒株，可谓一举多得，大大提高了检测效率。3.荧光定量PCR法荧光定量PCR自动化程度高、特异性强、无交叉污染，在霍乱弧菌的快速诊断中得到广泛应用。尤其是近年来，随着引物与探针的设计更精确、多通道荧光PCR仪的开发与广泛使用，多重荧光定量PCR技术日臻成熟，并以其高通量、低成本、高效率等优点而广泛应用于病毒、细菌、真菌等多种病原体的快速检测，成为应用的热点基因芯片与PCR方法相比，基因芯片技术能同时获得更多病原学、生物学方面的信息，从而更为全面地分析、掌握病原微生物的特征。Vora等[12]运用基因芯片技术对多种致病性弧菌的毒力、毒素、耐药基因及潜在的毒力基因进行全面分析，对掌握这些细菌的致病性及进行有效预防、控制等具有重要意义。但基因芯片成本较高，距离推广应用尚需时间等待②。症状
1992 年 10 月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株 （0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但 不能被 01 群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗 01 群的抗血清对 0139 菌株无保护性 免疫。在水中的存活时间较 01 群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱 流行的新菌株，推荐使用天津生物芯片生产的霍乱弧菌诊断血清。 聚合酶链反应法 1,普通聚合酶链反应法 核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，PCR），其基 本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段 特异性序列的两端，然后在体外模拟 DNA 体内复制的过程反复扩增，使靶序列 放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。一般选择霍乱肠毒素(cholera enterotoxin，CT)基因 ctx 的保守序列作为靶基因。一些非产毒株(如环境来源 的菌株)有可能通过基因水平转移获得毒力基因成为产毒株，若仅检测 ctx 基因 容易造成漏检。因此，霍乱弧菌的其他重要基因，如毒力协同调节菌毛 A 基因 (tcp A)、o 抗原基因(rfb)、外膜蛋白基因(omp)以及毒力表达调控基因(toxR) 等也被选用为 PcR 的靶基因，这大大提高了检测的特异度. 2 ,多重 PCR 法 与常规 PCR 相比，多重 PCR 一次反应可检测多个基因，节省了时间和成本。国 内、外许多学者选用霍乱弧菌的毒素基因 ctx、tcp 与其他基因如 ompW、rfb、 hly 进行组合，作为共同的靶基因，克服了由于毒力基因特异度不够高而造成 的假阳性。多重 PcR 同时可准确区分不同血清型的霍乱弧菌和快速鉴定其是否 为产毒株，可谓一举多得，大大提高了检测效率。 3.荧光定量 PCR 法 荧光定量 PCR 自动化程度高、特异性强、无交叉污染，在霍乱弧菌的快速诊断 中得到广泛应用。尤其是近年来，随着引物与探针的设计更精确、多通道荧光 PCR 仪的开发与广泛使用，多重荧光定量 PCR 技术日臻成熟，并以其高通量、 低成本、高效率等优点而广泛应用于病毒、细菌、真菌等多种病原体的快速检 测，成为应用的热点. 基因芯片 与 PCR 方法相比，基因芯片技术能同时获得更多病原学、生物学方面的信息， 从而更为全面地分析、掌握病原微生物的特征。Vora 等[12]运用基因芯片技术 对多种致病性弧菌的毒力、毒素、耐药基因及潜在的毒力基因进行全面分析， 对掌握这些细菌的致病性及进行有效预防、控制等具有重要意义。但基因芯片 成本较高，距离推广应用尚需时间等待[2] 。 症状
人类在自然情况下是霍乱弧菌的唯一易感者，主要通过污染的水源或饮食物经口传染。在一定条件下，霍乱弧菌进入小肠后，依靠鞭毛的运动，穿过粘膜表面的粘液层，可能籍菌毛作用粘附于肠壁上皮细胞上，在肠粘膜表面迅速素殖，经过短暂的潜伏期后便急骤发病。该菌不侵入肠上皮细胞和肠腺，也不侵入血流，仅在局部繁殖和产生霍乱肠毒素，此毒素作用于粘膜上皮细胞与肠腺使肠液过度分泌，从而患者出现上吐下泻，泻出物呈“米油水样”并含大量弧菌，此为本病典型的特征。霍乱肠毒素本质是蛋白质，不耐热，56℃经30分钟，即可破坏其活性。对蛋白酶敏感而对胰蛋白酶抵抗。该毒素属外毒素，具有很强的抗原性。现已能将该毒素高度精制成晶状，仍保持极强的生物学活性。?霍乱肠毒素的作用机制霍乱肠毒素致病机理如下：毒素由A和B两个亚单位组成，A亚单位又分为AI和A2两个肽链，两者依靠二硫链连接。A亚单位为毒性单位，其中A1肽链具有酶活性，A2肽链与B亚单位结合参与受体介导的内吞作用中的转位作用。B亚单位为结合单位，能特异地识别肠上皮细胞上的受体。1个毒素分子由一个A亚单位和4℃6个B亚单位组成多聚体。霍乱肠毒素作用于肠细胞膜表面上的受体（由神经节苷脂GM1组成），其B亚单位与受体结合，使毒素分子变构，A精致单位进入细胞，A1肽链活化，进而激活腺苷环化酶（AC），使三磷酸腺苷（ATP）转化为环磷酸腺苷（cAMP），细胞内cAMP浓度增高，导致肠粘膜细胞分泌功能大为亢进，使大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻，由于大量脱水和失盐，可发生代谢性酸中毒，血循环衰竭，甚至休克或死亡。致病因素霍乱弧菌产生肠毒素，是一种剧烈的致泄毒素。该毒素作用于肠壁促使肠黏膜细胞极度分泌从而使水和盐过量排出，导致严重脱水虚脱；进而引起代谢性酸中毒和急性肾功能衰竭"。所致疾病引起烈性肠道传染病霍乱，为我国的甲类法定传染病。在自然情况下，人类是霍乱弧菌的唯一易感者。在地方性流行区，除病人外，无症状感染者也是重要传染源。高比例的无症状携带者有利于疾病的扩散，根据卫生状况，无症状携带者和病人的比率波动在10:1～100:1之间。传播途径主要是通过污染的水源或未煮熟的食物如海产品、蔬菜经口摄入。居住拥挤，卫生状况差，特别是公用水源是造成暴发流行的重要因素。人与人之间的直接传播不常见。在正常胃酸条件下，如以水为载体，需饮入大于1010个细菌方能引起感染；如以食物作为载体，由于食物高强度的缓冲能力，感染剂量可减少到102104个细菌。任何能降低胃中酸度的药物或其他原因，都可使人对霍乱弧菌感染的敏感性增加。病菌到达小肠后，粘附于肠粘膜表面并迅速繁殖，不侵入肠上皮细胞和肠腺，细菌在繁殖过程中产生肠毒素而致病。01群霍乱弧菌感染可从无症状或轻型腹
人类在自然情况下是霍乱弧菌的唯一易感者，主要通过污染的水源或饮食物经 口传染。在一定条件下，霍乱弧菌进入小肠后，依靠鞭毛的运动，穿过粘膜表 面的粘液层，可能藉菌毛作用粘附于肠壁上皮细胞上，在肠粘膜表面迅速繁 殖，经过短暂的潜伏期后便急骤发病。该菌不侵入肠上皮细胞和肠腺，也不侵 入血流，仅在局部繁殖和产生霍乱肠毒素，此毒素作用于粘膜上皮细胞与肠腺 使肠液过度分泌，从而患者出现上吐下泻，泻出物呈“米泔水样”并含大量弧 菌，此为本病典型的特征。 霍乱肠毒素本质是蛋白质，不耐热，56℃经 30 分钟，即可破坏其活性。对蛋白 酶敏感而对胰蛋白酶抵抗。该毒素属外毒素，具有很强的抗原性。现已能将该 毒素高度精制成晶状，仍保持极强的生物学活性。 霍乱肠毒素的作用机制 霍乱肠毒素致病机理如下：毒素由 A 和 B 两个亚单位组成，A 亚单位又分为 A1 和 A2 两个肽链，两者依靠二硫链连接。A 亚单位为毒性单位，其中 A1 肽链具 有酶活性，A2 肽链与 B 亚单位结合参与受体介导的内吞作用中的转位作用。B 亚单位为结合单位，能特异地识别肠上皮细胞上的受体。1 个毒素分子由一个 A 亚单位和 4℃6 个 B 亚单位组成多聚体。霍乱肠毒素作用于肠细胞膜表面上的受 体（由神经节苷脂 GM1 组成），其 B 亚单位与受体结合，使毒素分子变构，A 精致单位进入细胞，A1 肽链活化，进而激活腺苷环化酶（AC），使三磷酸腺苷 （ATP）转化为环磷酸腺苷（cAMP），细胞内 cAMP 浓度增高，导致肠粘膜细胞 分泌功能大为亢进，使大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻，由于大量 脱水和失盐，可发生代谢性酸中毒，血循环衰竭，甚至休克或死亡。 致病因素 霍乱弧菌产生肠毒素，是一种剧烈的致泄毒素。该毒素作用于肠壁促使肠黏膜 细胞极度分泌从而使水和盐过量排出，导致严重脱水虚脱；进而引起代谢性酸 中毒和急性肾功能衰竭[1] 。 所致疾病 引起烈性肠道传染病霍乱，为我国的甲类法定传染病。在自然情况下，人类是 霍乱弧菌的唯一易感者。在地方性流行区，除病人外，无症状感染者也是重要 传染源。高比例的无症状携带者有利于疾病的扩散，根据卫生状况，无症状携 带者和病人的比率波动在 10:1～100:1 之间。 传播途径主要是通过污染的水源或未煮熟的食物如海产品、蔬菜经口摄入。居 住拥挤，卫生状况差，特别是公用水源是造成暴发流行的重要因素。人与人之 间的直接传播不常见。在正常胃酸条件下，如以水为载体，需饮入大于 1010 个 细菌方能引起感染；如以食物作为载体，由于食物高强度的缓冲能力，感染剂 量可减少到 102～104 个细菌。任何能降低胃中酸度的药物或其他原因，都可使 人对霍乱弧菌感染的敏感性增加。 病菌到达小肠后，粘附于肠粘膜表面并迅速繁殖，不侵入肠上皮细胞和肠腺， 细菌在繁殖过程中产生肠毒素而致病。O1 群霍乱弧菌感染可从无症状或轻型腹