第二节培养细胞的类型、特点及增殖过程 原代细胞培养 从供体取得组织，分离得到所需细胞后接 种于培养瓶，进行首次培养。 次代细胞培养 将原代细胞培养物用胰酶和EDTA消化处理 后，收集洗涤，再分装至含有新鲜营养液的 培养瓶中继续培养，形成的单层细胞
◈ ⊃ ► ◄ ■ 第二节 培养细胞的类型、特点及增殖过程 原代细胞培养 从供体取得组织，分离得到所需细胞后接 种于培养瓶，进行首次培养。 次代细胞培养 将原代细胞培养物用胰酶和EDTA消化处理 后，收集洗涤，再分装至含有新鲜营养液的 培养瓶中继续培养，形成的单层细胞
第二节培养细胞的类型、特点及增殖过程 细胞系(cell line) 原代细胞一经传代后细胞。 无限细胞系可或连续细胞系 细胞获得永生性即永久增殖的能力
◈ ⊃ ► ◄ ■ 第二节 培养细胞的类型、特点及增殖过程 细胞系（cell line） 原代细胞一经传代后细胞。 无限细胞系或连续细胞系 细胞获得永生性即永久增殖的能力
第三节培养细胞的生存条件及技术方法 培养细胞的生存条件 营养物质糖、 培养皿 氨基酸、维生 温度、湿 或培养瓶 素、无机离子、 度和气体 微量元素等 由C02恒温孵 育箱提供 生长 维持 培养液 培养液 10%~20% 2%~5% 的血清 的血清 ◇5
◈ ⊃ ► ◄ ■ 培养细胞的生存条件 培养皿 或培养瓶 温度、湿 度和气体 由CO2恒温孵 育箱提供 生长 培养液 10％～20％ 的血清 维持 培养液 2％～5％ 的血清 营养物质糖、 氨基酸、维生 素、无机离子、 微量元素等 第三节 培养细胞的生存条件及技术方法
第三节培养细胞的生存条件及技术方法 培养设备
◈ ⊃ ► ◄ ■ 培养设备 第三节 培养细胞的生存条件及技术方法
第三节培养细胞的生存条件及技术方法 术方法 细胞分离 原代（初代）培养 消化法传代 组织块剪切，消化 细胞悬液计 将原代细胞培 法使组织进一步 分散 数后，加入 养物用胰酶和 营养液稀释 EDTA消化处理 制备获得细胞悬 成一定浓度 后，收集洗涤， 液计数后，加入 再分装至含有 营养液稀释成一 细胞悬液孵 新鲜营养液的 定浓度细胞悬液 箱中进行培 培养瓶中继续 孵箱中进行培养 养 培养
◈ ⊃ ► ◄ ■ 技术方法 细胞分离 原代（初代）培养 消化法传代 组织块剪切,消化 法使组织进一步 分散 制备获得细胞悬 液计数后，加入 营养液稀释成一 定浓度细胞悬液 孵箱中进行培养 细胞悬液计 数后，加入 营养液稀释 成一定浓度 细胞悬液孵 箱中进行培 养 将原代细胞培 养物用胰酶和 EDTA消化处理 后，收集洗涤， 再分装至 含有 新鲜营养液的 培养瓶中继续 培养 第三节 培养细胞的生存条件及技术方法