分子细胞遗传学 1.原位杂交( In situ hybridisation) 标记的核酸探针变性后与已变性的靶桉 酸在退火温度下复性。在不改变被分析 对象。即维持其原位的前提下对靶核酸 选行分析。 2.荧光原位杂交 Fluorescent in situ hybridisation(FISH) 校酸探针用荧光染料标记。荧光傖号通 过显微镜观察
三、分子细胞遗传学 1. 原位杂交(In situ hybridisation) 标记的核酸探针变性后与已变性的靶核 酸在退火温度下复性,在不改变被分析 对象,即维持其原位的前提下对靶核酸 进行分析。 2. 荧光原位杂交 Fluorescent in situ hybridisation (FISH) 核酸探针用荧光染料标记,荧光信号通 过显微镜观察
3.染色体涂染( Chromosome painting) 又称为多重荧光原位杂交( multiplex fluorescence in situ hybridisation, M-FISH) 可同时检测多个染色体,一次杂交即可检 测人的24条染色体 可检测筒单及复杂的染色体量排
3. 染色体涂染(Chromosome painting) 又称为多重荧光原位杂交(multiplexfluorescence in situ hybridisation, M-FISH) • 可同时检测多个染色体,一次杂交即可检 测人的24条染色体 • 可检测简单及复杂的染色体重排
荧光原条交。据标记物不同可分为 °间接法:用生物素或地高辛标记探针, 通过与荧光染料结合的抗生物素或抗 地高辛抗体将信号放大而进行检测。 ·直接法:直接用荧光素标记,如 Vysis 公司的FSH探钋
荧光原位杂交,据标记物不同可分为: • 间接法:用生物素或地高辛标记探针, 通过与荧光染料结合的抗生物素或抗 地高辛抗体将信号放大而进行检测。 • 直接法:直接用荧光素标记,如Vysis 公司的FISH探针
探针DNA 加入荧光标记 解螺旋杂交 荧光原杂交原理示意
荧光原位杂交原理示意
DNAin chromsome squash on slide Hybridize with tagged dna Add dye conjugated binding g antibody 荧光原杂交过程
荧光原位杂交过程