概述 S? 1振动弛豫 2.内转换 片套 3猝灭 4.系间跨越 s单重态 T多重态 入 λ12激发波长;x荧光3磷光 分子去活化过程及荧光产生示意图
一、概 述 1.振动弛豫 2.内转换 3.猝灭 4.系间跨越 s单重态 T多重态 1 ,2激发波长; 荧光 3磷光 分子去活化过程及荧光产生示意图
概述 >荧光分析的特点 优点:灵敏度高(可达10~129数量级); 选择性强,有利于分析复杂的多组分混合物 用样量少、特异性好、操作简便。 ⑧缺点:对温度、pH值等因素变化比较敏感; 应用范围较窄,只能用来测量发荧光的物质, 或与某些试剂作用后发荧光的物质
一、概 述 ➢荧光分析的特点 ☺优点:灵敏度高(可达10~12g数量级); 选择性强,有利于分析复杂的多组分混合物; 用样量少、特异性好、操作简便。 缺点:对温度、pH值等因素变化比较敏感; 应用范围较窄,只能用来测量发荧光的物质, 或与某些试剂作用后发荧光的物质
二、荧光分析的基本原理 (一)激发光谱和荧光光谱 任何发射荧光的物质都具有两个特征光谱, 即激发光谱( excitation spectrum)和荧光光 iE(fluorescence spectrum) 激发光谱和荧光光谱是荧光分析中定性和定量 的基础
二、荧光分析的基本原理 (一)激发光谱和荧光光谱 • 任何发射荧光的物质都具有两个特征光谱, 即激发光谱(excitation spectrum)和荧光光 谱(fluorescence spectrum)。 • 激发光谱和荧光光谱是荧光分析中定性和定量 的基础
二、荧光分析的基本原理 激发光谱:连续改变激发光波长,固定荧光发 射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质 溶液发射的芠光强度的变化。 以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作 图,即可得到荧光物质 的激发光谱。 从激发光谱图上可找到 发生荧光强度最强的 激发波长λeX
➢ 激发光谱:连续改变激发光波长,固定荧光发 射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质 溶液发射的荧光强度的变化。 ➢ 以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作 图,即可得到荧光物质 的激发光谱。 从激发光谱图上可找到 发生荧光强度最强的 激发波长λex
二、荧光分析的基本原理 >荧光光谱:用λex作激发光源,并固定强度,测 定不同浪长的荧光强度。 >以荧光浪长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图, 便得荧光光谱。荧光强度最强的浪长为λem。 荧光物质的入ex和入em 是鉴定物质的依据,也 是定量测定中所选用的 最灵敏的波长
➢ 荧光光谱:用λex作激发光源,并固定强度,测 定不同波长的荧光强度。 ➢ 以荧光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图, 便得荧光光谱。荧光强度最强的波长为λem 。 • 荧光物质的λex和λem 是鉴定物质的依据,也 是定量测定中所选用的 最灵敏的波长