O以质粒为载体的载体外源重组DNA分子DNA转化或转染细菌重组DNA增殖888细菌在培养液DNA中素殖后,在固克隆过程体培养基生长筛选含重组质粒的细菌
以 质 粒 为 载 体 的 DNA 克 隆 过 程
目的基因的来源■天然DNA(染色体DNA、病毒DNA、噬菌体DNA、原核细胞质粒DNA、线粒体真核细胞:cDNA或gDNA文库DNA和叶绿体DNA)丨人工合成DNAPCR扩增目的基因
目的基因的来源 n 天然DNA 原核细胞 真核细胞:cDNA或gDNA文库 n 人工合成DNA PCR扩增目的基因 (染色体DNA、病毒 DNA、噬菌体DNA、 质粒DNA、线粒体 DNA和叶绿体DNA)
基因工程为什么需要载体?载体的基本条件1. 能自主复制;2.具有两个以上的遗传标记物,便于重组体的筛选和鉴定;3.有克隆位点((外源DNA插入点),常具有多个单一酶切位点,称为多克隆位点(MCS);4.分子量小,以容纳较大的外源DNA
载体的基本条件 1.能自主复制; 2.具有两个以上的遗传标记物,便于重组体的筛选 和鉴定; 3.有克隆位点(外源DNA插入点),常具有多个单一 酶切位点,称为多克隆位点(MCS); 4.分子量小,以容纳较大的外源DNA。 基因工程为什么需要载体?
多克隆位点MCSAmp复制起始点遗传标记ori基因载体
MCS
克隆载体(cloningvector)可携带插入的月的DNA进入宿主细胞内并能自我复制的DNA分子。表达载体(expressionvector)在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等):使自的基因能够表达的载体
克隆载体(cloning vector) 可携带插入的目的DNA进入宿主细胞内并能自 我复制的DNA分子。 表达载体(expression vector) 在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件 (如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够 表达的载体