限制酶(Ⅱ型)识别及切割位点 特异识别及切割48个bp长度且具有回文序列的 DNA片断,主要产生3种缺口:(5一粘性末端 ”一粘性末端 平端或钝端 回文序列 是指该部位的核苷酸序列呈180旋转对称; 粘性末端 是指经内切酶特异切割后产生的5·一末端突出或 3·一末端突出的威基序列相互具有互补性
限制酶(Ⅱ型)识别及切割位点 特异识别及切割48个bp长度且具有回文序列的 DNA片断,主要产生3种缺口: 5ˊ-粘性末端 3ˊ-粘性末端 平端或钝端 回文序列 是指该部位的核苷酸序列呈180 O旋转对称; 粘性末端 是指经内切酶特异切割后产生的5ˊ-末端突出或 3ˊ-末端突出的碱基序列相互具有互补性
(1) 产生5’-粘性末端 5-GAATTC-3 5-G AATTC-3 3-CTTAAG-5 EoRI 3-CTTAA G-5 产生3’-粘性末端 5-CTGCAG-3 5-CTGCA G-3 3-GAOGTC-5 Rstl 3-G ACGTC-5
⑴ 产生5'-粘性末端 -G -CTTAA 5' 3' AATTC- G- 3' 5' -G -CTTAA 5' 3' AATTC- G- 3' 5' + EcoRI ⑵ 产生3'-粘性末端 -CTGCA -G 5' 3' G- ACGTC- 3' 5' -CTGCA -G 5' 3' G- ACGTC- + Pst I 3' 5
(3) 产生平(头末)端/钝端 5-CCCGGG-3 5-CCC X GGG-3 3-GGGCCC-5 Sma1 3'-GGG CCC-5' 同裂酶(异源同工酶) 其它特殊性质 同尾酶 的Ⅱ型限制酶 可变酶
⑶ 产生平(头末)端/钝端 5'-CCC 3'-GGG GGG-3' CCC-5' + Sma I 5'-CCC 3'-GGG GGG-3' CCC-5' 其它特殊性质 的Ⅱ型限制酶 同裂酶(异源同工酶) 同尾酶 可变酶
同裂酶 又称异源同工酶。指来源不同,但具有相同的 识别序列。 在切割DNA时,其切割点可以是相同的,产生 平头末端,称为同识同切; 切割点也可以是不同的,产生3或5粘性末 端,称为同识异切
同裂酶 又称异源同工酶。指来源不同,但具有相同的 识别序列。 在切割DNA时,其切割点可以是相同的,产生 平头末端,称为同识同切; 切割点也可以是不同的,产生3ˊ或5ˊ粘性末 端,称为同识异切
同裂酶一 同识同切 5'-TTTAAA-3' Aha IlI 5'-TTT AAA-3' 3-AAATTT-5 Dra I 3'-AAA TTT-5
同裂酶——同识同切 5'-TTT 3'-AAA AAA-3' TTT-5' + Aha Ⅲ Dra Ⅰ 5'-TTT 3'-AAA AAA-3' TTT-5