我们把带电颗粒的移动速度用以下公式表示 V=mE=m·J/K (6) 由此可以看出,带电颗粒的移动速度v等于电位梯度E和 迁移率m的乘积,与电流密度J和迁移率m的乘积成正比 ,与溶液的导电性K成反比。也就是说,电场强度越高电 泳速度越快;溶液的导电性越强,电泳速度越慢。因此电 泳速度随着电位梯度或溶液的导电性的变化而改变
我们把带电颗粒的移动速度用以下公式表示 v = m·E= m·J/K (6) 由此可以看出,带电颗粒的移动速度v等于电位梯度E和 迁移率m的乘积,与电流密度J和迁移率m的乘积成正比 ,与溶液的导电性K成反比。也就是说,电场强度越高电 泳速度越快;溶液的导电性越强,电泳速度越慢。因此电 泳速度随着电位梯度或溶液的导电性的变化而改变
3电泳的分类 3.1按分离原理分类 (1)区带电泳( zone electrophoresis,ZEP):是在半固相或 胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液,然后在介质上加 电场,带电颗粒在支持介质上或支持介质内迁移,在电泳 过程中,不同的离子成分在均一的缓冲液系统中分离成独 立的区带(图3-2a),这是当前应用最广泛的电泳技术
3电泳的分类 3.1按分离原理分类 (1)区带电泳(zone electrophoresis,ZEP):是在半固相或 胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液,然后在介质上加 电场,带电颗粒在支持介质上或支持介质内迁移,在电泳 过程中,不同的离子成分在均一的缓冲液系统中分离成独 立的区带(图3-2a),这是当前应用最广泛的电泳技术
(2)移界电泳( moving boundary electrophoresis,MBEP) 是把电场加在生物大分子溶液和缓冲溶液之间的界面上, 带电颗粒的移动速度通过光学方法观察界面的移动来测定 (图3-2b) (3)稳态电泳( steady state electrophoresis):带电颗粒在 电场作用下电迁移一定时间后达到一个稳定状态,此后, 电泳条带的宽度不随时间的变化而变化,如等速电泳 ( isotachophoresis,IP)、等电聚焦电泳( isoelectric focusing IEF)(图2c、2d)
(2)移界电泳(moving boundary electrophoresis,MBEP): 是把电场加在生物大分子溶液和缓冲溶液之间的界面上, 带电颗粒的移动速度通过光学方法观察界面的移动来测定 (图3-2b)。 (3)稳态电泳(steady state electrophoresis):带电颗粒在 电场作用下电迁移一定时间后达到一个稳定状态,此后, 电泳条带的宽度不随时间的变化而变化,如等速电泳 (isotachophoresis,ITP)、等电聚焦电泳(isoelectric focusing ,IEF)(图2c、2d)
pH 随后离子 SB Ck8B7 A B A 前导离子 图3-2各种电泳分离原理示意图 a区带电泳b移界电泳c等速电泳d等电聚焦
a b c d 图3-2 各种电泳分离原理示意图 a 区带电泳 b 移界电泳 c 等速电泳 d 等电聚焦
4电泳系统 41电泳仪及附属设备 从第一台商品自由移界电泳系统的问世以后,近50年来 电泳仪器的发展迅猛,尤其是随着凝胶电泳技术的成熟及 广泛应用,各种类型的凝胶电泳装置层出不穷,使电泳技 术得以迅速发展。凝胶电泳仪作为实验室的常规小型仪器 种类很多。随着科学技术的不断发展,电泳仪器的分析 对象也越来越专门化,分辨率越来越高,操作越来越简单 性能越来越稳定。凝胶电泳系统主要包括电泳仪、电泳 槽及附属设备三大类
4电泳系统 4.1电泳仪及附属设备 从第一台商品自由移界电泳系统的问世以后,近50年来 电泳仪器的发展迅猛,尤其是随着凝胶电泳技术的成熟及 广泛应用,各种类型的凝胶电泳装置层出不穷,使电泳技 术得以迅速发展。凝胶电泳仪作为实验室的常规小型仪器 ,种类很多。随着科学技术的不断发展,电泳仪器的分析 对象也越来越专门化,分辨率越来越高,操作越来越简单 ,性能越来越稳定。凝胶电泳系统主要包括电泳仪、电泳 槽及附属设备三大类