4、转化因子离体的DNA片断 (1)转化因子的本质与类型 ●离体的DNA片段(15kb左右) ●类型: dSDNA、sDNA和质粒DNA(通常不与核染色体 发生重组) (2)转化的频率:0.1%~1.0%,最高20% (3)转化的DNA的浓度:1×105ug/mL(即1×10ug/mL)
4、转化因子—离体的DNA片断 (1)转化因子的本质与类型 ⚫ 离体的DNA片段(15kb左右) ⚫ 类型:dsDNA、ssDNA和质粒DNA(通常不与核染色体 发生重组) (2)转化的频率:0.1%~1.0%,最高20% (3)转化的DNA的浓度:1×10-5ug/mL(即1×10-11ug/mL)
5、以革兰氏阳性菌(肺炎链球菌)说明转化的具体过程 1)供体菌 dsDNA与感受 态受体菌的膜连DNA结合 蛋白相接合,一条链被水 dSDNA 解,另一条链进入细跑供体(m 感受态受体(s〃 2) SSDNA片断与特异的蛋 酶解与吸收单链 白RecA接合,与核染色 体上的同源区段配对、重 组,形成杂合的DNA区段 同源区段配对 (3)步复制 (4)细胞分裂,形成个转 单链整合 化子和一个仍为原基因型 的子代。 复制与分离 转化子(str) 非转化子(sr)
5、以革兰氏阳性菌(肺炎链球菌)说明转化的具体过程 (1)供体菌dsDNA与感受 态受体菌的膜连DNA结合 蛋白相接合,一条链被水 解,另一条链进入细胞。 (2)ssDNA片断与特异的蛋 白RecA接合,与核染色 体上的同源区段配对、重 组,形成杂合的DNA区段。 (3)同步复制 (4)细胞分裂,形成一个转 化子和一个仍为原基因型 的子代
6、革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌在转化过程中 的差别 (1)只能吸收其同源的DNA,如肺炎链球菌还可以吸 收小牛腺DNA (2)外来DNA片断仍以双链形式进入受体菌,其单链 化与整合过程同时发生
6、革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌在转化过程中 的差别: (1)只能吸收其同源的DNA,如肺炎链球菌还可以吸 收小牛腺DNA。 (2)外来DNA片断仍以双链形式进入受体菌,其单链 化与整合过程同时发生
7、转染与转化的比较 转染( transfection):用提纯的病毒核酸去感染其 宿主细胞或原生质体,可增值出一群正常病毒后 代的现象。 与转化的区别:作为转染的病毒核酸并非是供体基 因,中间不发生遗传因子的交换和整合,不产生 具有杂种性质的转化子
7、转染与转化的比较 转染(transfection):用提纯的病毒核酸去感染其 宿主细胞或原生质体,可增值出一群正常病毒后 代的现象。 与转化的区别:作为转染的病毒核酸并非是供体基 因,中间不发生遗传因子的交换和整合,不产生 具有杂种性质的转化子
二)转导( transduction) 1、转导:通过缺陷噬菌体的媒介作用,把供体细胞的DNA 小片段携带到受体细胞中,通过交换和整合,从而使后者 获得前者部分遗传性状的现象。 获得新遗传性状的受体细胞称为转导子( transductant)。 2、转导的类型 ●普遍转导:完全普遍转导、流产普遍转导 局限转导:低频、高频转导 ●溶原转变
(二)转导(transduction) 1、转导:通过缺陷噬菌体的媒介作用,把供体细胞的DNA 小片段携带到受体细胞中,通过交换和整合,从而使后者 获得前者部分遗传性状的现象。 ⚫ 获得新遗传性状的受体细胞称为转导子(transducant)。 2、转导的类型 ⚫ 普遍转导:完全普遍转导、流产普遍转导 ⚫ 局限转导:低频、高频转导 ⚫ 溶原转变