分子产生荧光的必备条件 分子必须具有与所照射的辐射频率相适 应的结构,才能吸收激发光; 吸收了与其本身特征频率相同的能量后, 还必须具有一定的荧光效率(荧光量子产 率)
分子产生荧光的必备条件 ◼ 分子必须具有与所照射的辐射频率相适 应的结构,才能吸收激发光; ◼ 吸收了与其本身特征频率相同的能量后, 还必须具有一定的荧光效率(荧光量子产 率)
4.影响荧光强度的环境因素 a.溶剂的影响 除对光的折射、散射外,溶剂的影响主要表现 在溶剂的极性、氢键及配位键的形成等。 溶剂极性增大,通常使荧光光谱红移 氢键和配位键的形成,改变荧光强度和形状
4. 影响荧光强度的环境因素 a. 溶剂的影响 除对光的折射、散射外,溶剂的影响主要表现 在溶剂的极性、氢键及配位键的形成等。 溶剂极性增大,通常使荧光光谱红移; 氢键和配位键的形成,改变荧光强度和形状
4.影响荧光强度的环境因素 b.温度的影响 温度增加,溶剂分子与荧光分子激发态的 碰撞频率增加,外转换去激发的几率增加,荧 光量子产率下降。低温荧光分析可提高分析的 灵敏度。 C.溶液pH 对含有酸碱基团的荧光分子,荧光发射受 pH影响较大,需严格控制溶液pH
4. 影响荧光强度的环境因素 b. 温度的影响 温度增加,溶剂分子与荧光分子激发态的 碰撞频率增加,外转换去激发的几率增加,荧 光量子产率下降。低温荧光分析可提高分析的 灵敏度。 c. 溶液pH 对含有酸碱基团的荧光分子,荧光发射受 pH影响较大,需严格控制溶液pH
4.影响荧光强度的环境因素 d.内滤效应 是指分子发射的荧光通过溶液时,被未激 发的荧光物质分子所吸收(自吸收)而引起的 荧光强度下降的现象。 被测物浓度越高,则内滤效应越严重
4. 影响荧光强度的环境因素 d. 内滤效应 是指分子发射的荧光通过溶液时,被未激 发的荧光物质分子所吸收(自吸收)而引起的 荧光强度下降的现象。 被测物浓度越高,则内滤效应越严重
4.影响荧光强度的环境因素 e.荧光猝灭 是指荧光分子与溶剂分子或其它分子之 间相互作用,从而使荧光强度减弱的现象 与荧光物质分子相互作用而引起荧光强度 下降的物质称为荧光猝灭剂
4. 影响荧光强度的环境因素 e. 荧光猝灭 是指荧光分子与溶剂分子或其它分子之 间相互作用,从而使荧光强度减弱的现象。 与荧光物质分子相互作用而引起荧光强度 下降的物质称为荧光猝灭剂