第十三章细胞凋亡检测
第十三章 细 胞 凋 亡 检 测
细胞凋亡的几种检测方法形态学观察：普通光镜、荧光显微镜、透射电子显微镜磷脂酰丝氨酸外翻分析（AnnexinV法）线粒体膜势能的检测DNA片断化检测：大分子染色体DNA片段、DNA Ladder脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling,TUNEL)半胱氨酸蛋白酶Caspase家族活性的检测
细胞凋亡的几种检测方法 ➢ 形态学观察：普通光镜、荧光显微镜、透射电子显微镜 ➢ 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） ➢ 线粒体膜势能的检测 ➢ DNA片断化检测：大分子染色体DNA片段、 DNA Ladder ➢ 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 （terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL） ➢ 半胱氨酸蛋白酶Caspase家族活性的检测
"形态学特征：凹缩空泡化山芽边集调亡小体细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，然后是细胞质密度增加，核质浓缩，核膜核仁破碎，胞膜有小泡状形成，膜内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面，胞膜结构仍然完整，最终可将调广细胞遗骸分割包裹为几个调广小体
细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，然后是细胞质 密度增加，核质浓缩，核膜核仁破碎，胞膜有小泡状形成，膜 内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面，胞膜结构仍然完整，最终可 将凋亡细胞遗骸分割包裹为几个凋亡小体
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形态学观察光学显微镜和倒置显微镜核碎裂体积缩小、核深染、凋亡小体形成、无炎症反应荧光显微镜和激光共聚焦显微镜：DNA特异性染料Hoechest33342/33258,DAPI)透射电子显微镜：超微结构是诊断凋亡的最可靠指标
形态学观察 ✓ 光学显微镜和倒置显微镜：体积缩小、核深染、核碎裂、 凋亡小体形成、无炎症反应 ✓荧光显微镜和激光共聚焦显微镜： DNA特异性染料 （ Hoechest 33342/33258, DAPI） ✓ 透射电子显微镜：超微结构是诊断凋亡的最可靠指标