心固定不足仍柔软,只宜固定薄片组织。由于此缺点加之使组织收缩剧烈,很少单独 使用;当与拮抗此缺点的试剂如醋酸,福尔马林,重铬酸钾等结合使用时,氯化汞仍 是很多优良常规固定剂的一种成分。用氯化汞固定的组织使染色特别对胞浆着色比较 鲜丽 凡用含氯化汞的固定剂固定的组织如超过规定时间会使组织过度硬化,而难切薄 片。组织内常存有汞盐,切片时能损伤切片刀,所以在脱水前应予以洗去。常用方法 是用70%酒精加入少量碘(0.5%)浸洗,再进行充分的冲洗或以π0%酒精洗后进行脱 水。也可在切片染色前用含碘的0%酒精漂洗数分钟,再以5%硫代硫酸钠漂洗,水洗 后进行染色 氯化汞常备溶液为饱和(约7%)水溶液,固定用浓度常为5%水溶液。用升汞饱 和液固定组织时,临时须加5%冰醋酸。固定2一3mm厚的组织块须经6-18小时,然后 用水洗24小时,再保存于80%酒精中 氯化汞腐蚀金属,混有此试剂的固定液不能使用金属容器盛装或用金属镊子夹 持。氯化汞有剧毒,应妥善保管 固定剂的选择取决于研究工作当时和下一步的需要,在选择混合固定剂时,应注 意各种试剂的平衡,如使组织收缩的试剂可配以使组织膨胀的试剂,渗透力弱的可与 渗透力强的混合使用。但是,氧化剂原则上不与还原剂混用,如需要时,只能在使用 前临时混合。一种混合固定剂内不宜有两种以上的盐类,以免产生复盐影响对组织的 固定,如氧化纳和氯化钠同时应用时,常将氯化钠改用硫酸钠。技术工作者和病理工 作者都应了解各种固定剂的性能。固定液的选择恰当,才能获得满意的制片结果。 混合固定液的种类很多,本章内所述的固定剂皆是较常用的,特殊染色所需的固 定剂皆列在相应的标题下 Miiller氏液 配方:重铬酸钾 硫酸钠 1.0g 蒸馏水加至 100ml 此液固定作用缓慢,但颇均匀,收缩亦小。多用于媒染和硬化神经组织,在这种 固定溶液中,重铬酸钾未经酸化,所以对染色质无固定作用。不适用于一般细胞学染 色。除用于骨骼标本外,此液是一种不常用的固定剂。固定时间数天至数周,在固定 过程中,需要每日更换新液并置暗处,固定后的组织用流水冲洗,再放入酒精中脱水。 Orth氏液(Mulr氏液+福尔马林) 配方:重铬酸钾 硫酸钠 1.0g 福尔马林 蒸馏水加至100ml 般以Mu氏液为备用液,用前以9份Mull氏液加1份福尔马林混合而成,因为 重铬酸钾是氧化剂,福尔马林为还原剂,混合后久放即失去固定作用。 固定0.5厘米的标本块约需3-4日,每日需更换新液,标本固定后要充分水洗,然 后进行脱水包埋。如固定过久,标本变脆,颜色由棕黄转变为黑色,则不能制作切片 标本经固定后如不能及时制片时,应将标本保存于福尔马林内或70%酒精中 Orth氏液对染色质,线粒体有较好的固定效果。硫酸钠在固定液中有助于渗透作 用,在一般情况下,可省去不用 11
11 心固定不足仍柔软,只宜固定薄片组织。由于此缺点加之使组织收缩剧烈,很少单独 使用;当与拮抗此缺点的试剂如醋酸,福尔马林,重铬酸钾等结合使用时,氯化汞仍 是很多优良常规固定剂的一种成分。用氯化汞固定的组织使染色特别对胞浆着色比较 鲜丽。 凡用含氯化汞的固定剂固定的组织如超过规定时间会使组织过度硬化,而难切薄 片。组织内常存有汞盐,切片时能损伤切片刀,所以在脱水前应予以洗去。常用方法 是用70%酒精加入少量碘(0.5%)浸洗,再进行充分的冲洗或以70%酒精洗后进行脱 水。也可在切片染色前用含碘的70%酒精漂洗数分钟,再以5%硫代硫酸钠漂洗,水洗 后进行染色。 氯化汞常备溶液为饱和(约7%)水溶液,固定用浓度常为5%水溶液。用升汞饱 和液固定组织时,临时须加5%冰醋酸。固定2-3mm厚的组织块须经6-18小时,然后 用水洗24小时,再保存于80%酒精中。 氯化汞腐蚀金属,混有此试剂的固定液不能使用金属容器盛装或用金属镊子夹 持。氯化汞有剧毒,应妥善保管。 固定剂的选择取决于研究工作当时和下一步的需要,在选择混合固定剂时,应注 意各种试剂的平衡,如使组织收缩的试剂可配以使组织膨胀的试剂,渗透力弱的可与 渗透力强的混合使用。但是,氧化剂原则上不与还原剂混用,如需要时,只能在使用 前临时混合。一种混合固定剂内不宜有两种以上的盐类,以免产生复盐影响对组织的 固定,如氧化纳和氯化钠同时应用时,常将氯化钠改用硫酸钠。技术工作者和病理工 作者都应了解各种固定剂的性能。固定液的选择恰当,才能获得满意的制片结果。 混合固定液的种类很多,本章内所述的固定剂皆是较常用的,特殊染色所需的固 定剂皆列在相应的标题下。 Miiller氏液 配方:重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 蒸馏水加至 100ml 此液固定作用缓慢,但颇均匀,收缩亦小。多用于媒染和硬化神经组织,在这种 固定溶液中,重铬酸钾未经酸化,所以对染色质无固定作用。不适用于一般细胞学染 色。除用于骨骼标本外,此液是一种不常用的固定剂。固定时间数天至数周,在固定 过程中,需要每日更换新液并置暗处,固定后的组织用流水冲洗,再放入酒精中脱水。 Orth氏液(Mullr氏液+福尔马林) 配方:重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 福尔马林 10ml 蒸馏水 加至 100ml 一般以Mullr氏液为备用液,用前以9份Mullr氏液加1份福尔马林混合而成,因为 重铬酸钾是氧化剂,福尔马林为还原剂,混合后久放即失去固定作用。 固定0.5厘米的标本块约需3-4日,每日需更换新液,标本固定后要充分水洗,然 后进行脱水包埋。如固定过久,标本变脆,颜色由棕黄转变为黑色,则不能制作切片, 标本经固定后如不能及时制片时,应将标本保存于福尔马林内或70%酒精中。 Orth氏液对染色质,线粒体有较好的固定效果。硫酸钠在固定液中有助于渗透作 用,在一般情况下,可省去不用
Zenker氏液(以Mulr液为基液加入氯化汞在临用前再加醋酸混合而成) 配方:重铬酸钾 硫酸钠 氯化汞 蒸馏水 加至 100ml 冰醋酸(临用时加入)5m Muller液加入醋酸后则不能贮存,未加醋酸的溶液( ZenEr氏原液)可保存较久 此液加入冰醋酸后,与重铬酸钾作用生成铬酸,是蛋白质的良好固定剂,其穿透力迅 速而均匀硬化组织能力强,经它固定后的标本利于盐基性染色剂着色,胞核和胞浆染 色颇为清晰,是一种优良的常规固定剂。 Zenker氏固定液中含有两种蛋白质和三种染色质的固定剂: 铬酸 沉淀蛋白质 氯化汞 醋酸 沉淀染色质 所以 Zenker氏液在组织学和病理学方面均较广泛使用,固定作用通常于12小时内 完成。固定薄组织块2-4毫米时,固定12-14小时,然后用流水冲洗过夜(以除去多 余的铬化物,汞色素须用碘来脱除)后进行脱水,或保存于80%酒精中。 Healy氏液 Hel氏液将 Zenker氏液中的醋酸以福尔马林替代,并名之为Hely氏液。液中重铬 酸钾未经酸化,对细胞质固定较好,对造血系统(骨、髓、脾、肝)等为一良好固定 液。用于结缔组织染色效果也好 配方:重铬酸钾 5g 硫酸钠 氯化汞 58g 蒸馏水加至100ml 临用前加福尔马林5m1 此液配好后24小时内有效,组织固定12-24小时后,流水冲洗,脱水 Bouin氏固定液 配方:苦味酸饱和水溶液 福尔马林(40%甲醛液)25ml 冰醋酸 5ml 此固定液保存性良好,渗透速度快,穿透力迅速而均匀,且很少引起收缩,不使 组织变硬和变脆,固定后的组织用三色染色法着色鲜艳绚丽,过量苦味酸使组织呈黄 色,但并不妨碍染色,毋须洗净除去。 此液也是皮肤组织较好的固定液,它可以软化表皮不使其变硬变脆。利于切片, 对蛋白质核酸有较好的固定作用,一般固定时间为数小时至一日 Carrnoy氏固定液 配方:无水酒精 氯仿 30ml
12 Zenker氏液(以Muller液为基液加入氯化汞在临用前再加醋酸混合而成) 配方:重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 氯化汞 5.0g 蒸馏水 加至 100ml 冰醋酸(临用时加入) 5ml Muller液加入醋酸后则不能贮存,未加醋酸的溶液(ZenRer氏原液)可保存较久。 此液加入冰醋酸后,与重铬酸钾作用生成铬酸,是蛋白质的良好固定剂,其穿透力迅 速而均匀硬化组织能力强,经它固定后的标本利于盐基性染色剂着色,胞核和胞浆染 色颇为清晰,是一种优良的常规固定剂。 Zenker氏固定液中含有两种蛋白质和三种染色质的固定剂: 铬酸 沉淀蛋白质 氯化汞 醋酸 沉淀染色质 所以Zenker氏液在组织学和病理学方面均较广泛使用,固定作用通常于12小时内 完成。固定薄组织块2-4毫米时,固定12-14小时,然后用流水冲洗过夜(以除去多 余的铬化物,汞色素须用碘来脱除)后进行脱水,或保存于80%酒精中。 Heely氏液 Heely氏液将Zenker氏液中的醋酸以福尔马林替代,并名之为Helly氏液。液中重铬 酸钾未经酸化,对细胞质固定较好,对造血系统(骨、髓、脾、肝)等为一良好固定 液。用于结缔组织染色效果也好。 配方:重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 氯化汞 5.8g 蒸馏水 加至 100ml 临用前加福尔马林 5ml 此液配好后24小时内有效,组织固定12-24小时后,流水冲洗,脱水。 Bouin氏固定液 配方:苦味酸饱和水溶液 75ml 福尔马林(40%甲醛液) 25ml 冰醋酸 5ml 此固定液保存性良好,渗透速度快,穿透力迅速而均匀,且很少引起收缩,不使 组织变硬和变脆,固定后的组织用三色染色法着色鲜艳绚丽,过量苦味酸使组织呈黄 色,但并不妨碍染色,毋须洗净除去。 此液也是皮肤组织较好的固定液,它可以软化表皮不使其变硬变脆。利于切片, 对蛋白质核酸有较好的固定作用,一般固定时间为数小时至一日。 Carrnoy氏固定液 配方:无水酒精 60ml 氯仿 30ml
冰醋酸 此液穿透力非常块、固定力强,对核固定良好,并可保存糖原也用于糖类的固定。 于脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的固定。一般组织固定2-3小时后即可 直接投入95%酒精和纯酒精中进行脱水,因此也可作快速固定的固定剂,厚度2-9毫 米的小块组织仅需15分钟即可,外检胸腹水经过离心沉淀后,将沉淀物用 Carrnoy氏液 固定可制作石蜡切片。 醋酸一酒精一福尔马林混合固定液 配方:福尔马林 冰醋酸 70%酒精 这种混合固定液通常简称“AAF`固定液。使用较广泛,配制时一般可以酒精作为 溶剂,然后加入福尔马林,醋酸。酒精可因组织种类不同而采用不同的浓度,在常规 切片中,我们常采用浓度为95%酒精 此液对糖原的固定佳良,就是说在蛋白质成分完全固定之前可以防止糖类溶解 加入醋酸以保证蛋白质的固定,由于酒精和福尔马林二者皆为迅速穿透的试剂,这是 种相当好的快速固定剂,对临床外检工作特别有利,福尔马林对组织染色效果较好, 醋酸可以防止酒精而引起的收缩。常温下,5毫米厚的组织固定4小时即可,加温(60℃) 条件下,一般组织半小时内可固定良好,固定后组织直接放入95%酒精中脱水 AAF固定液的缺点是组织固定后对细胞膜上的蛋白质和细胞内的某些结构有 定破坏作用,而对免疫组织化学染色有一定影响(详见免疫组织化学技术一章)。 其它常用固定液配方 10%甲醛生理盐水液 配方:福尔马林 100ml 氯化钠 9.0g 蒸馏水 900ml Gendre液 配方:苦味酸饱和于95%酒精溶液 福尔马林 15ml 冰醋酸 用此液在室温下3-4小时即可使糖原固定良好 缓冲福尔马林液 配方:福尔马林 磷酸二氢钠(NaH2PO4·2HE0) 0.4g 磷酸氢二钠( NaHPO4) 0.65 蒸馏水 缓冲福尔马林固定剂具有能较好地保存细胞结构和某些细微结构,适于免疫组织 化学染色和电镜观察,并且可较长时间保存组织(半年至一年)而又不影响制片和染 色。是近年来越来越受到重视的固定剂
13 冰醋酸 10ml 此液穿透力非常块、固定力强,对核固定良好,并可保存糖原也用于糖类的固定。 于脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的固定。一般组织固定2-3小时后即可 直接投入95%酒精和纯酒精中进行脱水,因此也可作快速固定的固定剂,厚度2-9毫 米的小块组织仅需15分钟即可,外检胸腹水经过离心沉淀后,将沉淀物用Carrnoy氏液 固定可制作石蜡切片。 醋酸-酒精-福尔马林混合固定液 配方:福尔马林 10ml 冰醋酸 5ml 70%酒精 85ml 这种混合固定液通常简称“AAF”固定液。使用较广泛,配制时一般可以酒精作为 溶剂,然后加入福尔马林,醋酸。酒精可因组织种类不同而采用不同的浓度,在常规 切片中,我们常采用浓度为95%酒精。 此液对糖原的固定佳良,就是说在蛋白质成分完全固定之前可以防止糖类溶解, 加入醋酸以保证蛋白质的固定,由于酒精和福尔马林二者皆为迅速穿透的试剂,这是 一种相当好的快速固定剂,对临床外检工作特别有利,福尔马林对组织染色效果较好, 醋酸可以防止酒精而引起的收缩。常温下,5毫米厚的组织固定4小时即可,加温(60℃) 条件下,一般组织半小时内可固定良好,固定后组织直接放入95%酒精中脱水。 AAF固定液的缺点是组织固定后对细胞膜上的蛋白质和细胞内的某些结构有一 定破坏作用,而对免疫组织化学染色有一定影响(详见免疫组织化学技术一章)。 其它常用固定液配方 10%甲醛生理盐水液 配方:福尔马林 100ml 氯化钠 9.0g 蒸馏水 900ml Gendre液 配方:苦味酸饱和于95%酒精溶液 80ml 福尔马林 15ml 冰醋酸 5ml 用此液在室温下3-4小时即可使糖原固定良好。 缓冲福尔马林液 配方:福尔马林 10ml 磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O) 0.4g 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 0.65g 蒸馏水 100ml 缓冲福尔马林固定剂具有能较好地保存细胞结构和某些细微结构,适于免疫组织 化学染色和电镜观察,并且可较长时间保存组织(半年至一年)而又不影响制片和染 色。是近年来越来越受到重视的固定剂
第三节大体标本的处理和固定 解剖所得的脏器标本,可提供临床病理讨论及教学和科研之用,除对有典型的病 变脏器制成标本外,对有重要病变的脏器亦应固定保存,条件允许可将全部脏器切成 需要的大小保留。 通常所用的固定液是10%甲醛(即福尔马林)水溶液(市售甲醛溶液用水稀释1: 9)。这样既可使组织内的蛋白和脂类等成分凝固,又可使组织不致腐烂。为了保存组 织内的各种水溶性成分、如粘液、肝淀粉和尿酸盐结晶等,应在剖验当时将部分脏器 切成组织块放入纯酒精液固定,切不可着水。 只有细心且有计划地进行尸体剖检,并在切除器官后仔细处理才能获得良好地陈 列标本。剖检过程中的粗心和草率,很容易破坏一个有价值的标本。因为今天的常见 病明天会成为罕见病例,为此重要的是保持这些病理标本原有的形态和色泽。有时外 科手术摘除的标本,如经适当处理也可以成为最好的陈列标本 常规的福尔马林固定后,大体标本常呈灰褐色,用下述方法拟可保存大体标本的 色泽,使之更接近自然色彩 配方:甲醛 20ml 硝酸钾 醋酸钾 生理盐水加至100ml 固定时间视标本的大小而定,一般24-72小时。固定后经充分的流水冲洗后再放 入下述保存液中长期保存。 甘油 醋酸钾 麝香草酚 0.2g 蒸馏水加至100ml(PH=8) 第四节陈列标本的固定 为供日后临床病理讨论、教学和研究用的标本,必须将有关主要病变的脏 器和其它继发变化的脏器一并保留,这样就保持了各脏器病变的联系性和整体性 二.将每一尸体的内脏放入一个较大的玻璃缸内。这种园缸应有紧密的玻璃 盖,使之不漏气。缸内先装半缸10%甲醛液,再将需要保留的各脏器放入,一定要 浸在固定剂内,若听任露在液面外的组织变干,则会造成一块永久的暗色区。 各标本如肝、脾和肾等应具有一光滑平整地切面(须以锋利的长刃刀一次 切出)。轻放在缸内,以免弯曲变形,缸内切不可多装标本,特别是新鲜的软标本 和对有教学价值的标本要分别固定,以免挤压、防止固定不足和变形而失去原有 的特征。缸内固定液的量是标本体积的4-5倍。一般实质性脏器制作标本时,其 厚度宜在1.5厘米左右,过厚则固定液不易渗透入内,过薄则易变形翘起。 四.肺脏标本比重较轻,易漂浮在液面,可用薄层脱脂棉花覆盖其表面、借以
14 第三节 大体标本的处理和固定 解剖所得的脏器标本,可提供临床病理讨论及教学和科研之用,除对有典型的病 变脏器制成标本外,对有重要病变的脏器亦应固定保存,条件允许可将全部脏器切成 需要的大小保留。 通常所用的固定液是10%甲醛(即福尔马林)水溶液(市售甲醛溶液用水稀释1: 9)。这样既可使组织内的蛋白和脂类等成分凝固,又可使组织不致腐烂。为了保存组 织内的各种水溶性成分、如粘液、肝淀粉和尿酸盐结晶等,应在剖验当时将部分脏器 切成组织块放入纯酒精液固定,切不可着水。 只有细心且有计划地进行尸体剖检,并在切除器官后仔细处理才能获得良好地陈 列标本。剖检过程中的粗心和草率,很容易破坏一个有价值的标本。因为今天的常见 病明天会成为罕见病例,为此重要的是保持这些病理标本原有的形态和色泽。有时外 科手术摘除的标本,如经适当处理也可以成为最好的陈列标本。 常规的福尔马林固定后,大体标本常呈灰褐色,用下述方法拟可保存大体标本的 色泽,使之更接近自然色彩。 配方:甲醛 20ml 硝酸钾 3g 醋酸钾 3g 生理盐水 加至 100ml 固定时间视标本的大小而定,一般24-72小时。固定后经充分的流水冲洗后再放 入下述保存液中长期保存。 甘油 20ml 醋酸钾 4g 麝香草酚 0.2g 蒸馏水 加至 100ml(PH=8) 第四节 陈列标本的固定 一.为供日后临床病理讨论、教学和研究用的标本,必须将有关主要病变的脏 器和其它继发变化的脏器一并保留,这样就保持了各脏器病变的联系性和整体性。 二.将每一尸体的内脏放入一个较大的玻璃缸内。这种园缸应有紧密的玻璃 盖,使之不漏气。缸内先装半缸10%甲醛液,再将需要保留的各脏器放入,一定要 浸在固定剂内,若听任露在液面外的组织变干,则会造成一块永久的暗色区。 三.各标本如肝、脾和肾等应具有一光滑平整地切面(须以锋利的长刃刀一次 切出)。轻放在缸内,以免弯曲变形,缸内切不可多装标本,特别是新鲜的软标本 和对有教学价值的标本要分别固定,以免挤压、防止固定不足和变形而失去原有 的特征。缸内固定液的量是标本体积的4-5倍。一般实质性脏器制作标本时,其 厚度宜在1.5厘米左右,过厚则固定液不易渗透入内,过薄则易变形翘起。 四.肺脏标本比重较轻,易漂浮在液面,可用薄层脱脂棉花覆盖其表面、借以
棉花纤维的虹吸现象,可不断地浸湿标本。在有条件的情况下,为保证充分固定, 应尽可能向标本内灌注固定剂 五标本放入固定液12小时后应加以翻转,以使标本与缸底或缸壁接触部分能 很好浸透固定液 六.具有空腔的脏器(如大、小肠)膜组织(如胸膜、腹膜等),皮肤等则应 在剪开后用扣针将其边沿钉在硬纸板上,标本朝下浸到固定液内,以保持病变的 形态,使用的扣针需防锈(也可用玻璃,竹签或不锈钢针)以免污染标本 七.囊腔组织如果没有打开可用注射器注入固定液使之充盈:如已打开则需填 入浸有固定剂的脱脂棉以保持其自然状态 八.被胆汁污染或含胆汁的标本,必须分别固定贮存,否则会污染别的标本。 九.标本的外观、标签和目录也同样重要,大体标本的编号最好用布条,用碳 素墨水书写解剖号码,然后将布条浸渍溶化的石蜡,冷却后将标签系于标本上或 投入缸内,标本缸外面亦须贴上解剖号码,以便随时取验 十.大体标本的保存和管理必须予以重视,应定期加入甲醛溶液以补充平时之 挥发。液体内混和少量麝香草酚,作为防霉剂。平时也勤加管理,以防止发霉和 标本腐烂。除有明确病变需要保留的标本外,对废旧标本亦须妥善处理。一般相 隔3-6个月后,集中装于草包内焚化或深埋。 第五节脱钙 组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶,经过固定 后,必先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。如脱钙不全则切片易撕开或碎 裂并损伤切片刀刃。脱去钙盐的过程一一称为脱钙。脱钙时应注意: 1.骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5mm厚的薄骨片,再以10%福尔马林固定 后进行脱钙。(未固定的组织在酸性脱钙液中受到的损伤比已固定的组织约大三倍)。 骨组织过厚则需延长脱钙时间,长时间浸于强酸影响切片染色效果。 2.在不影响诊断的条件下,应将骨组织周围的软组织全部剥去。如果切片目的在 于观察骨髓病变或骨组织肿瘤,最好除去一部分正常的致密的骨组织,以利于脱钙和 制片 3.脱钙前最好先将骨组织进行脱脂 4脱钙要彻底,脱水应充分,在脱水过程中,要注意不使其过度硬化。 脱钙剂 优质脱钙剂的标准是: (a)完全脱钙。 (b)不损伤组织细胞或纤维 (c)不妨碍以后的染色技术
15 棉花纤维的虹吸现象,可不断地浸湿标本。在有条件的情况下,为保证充分固定, 应尽可能向标本内灌注固定剂。 五.标本放入固定液12小时后应加以翻转,以使标本与缸底或缸壁接触部分能 很好浸透固定液。 六.具有空腔的脏器(如大、小肠)膜组织(如胸膜、腹膜等),皮肤等则应 在剪开后用扣针将其边沿钉在硬纸板上,标本朝下浸到固定液内,以保持病变的 形态,使用的扣针需防锈(也可用玻璃,竹签或不锈钢针)以免污染标本。 七.囊腔组织如果没有打开可用注射器注入固定液使之充盈;如已打开则需填 入浸有固定剂的脱脂棉以保持其自然状态。 八.被胆汁污染或含胆汁的标本,必须分别固定贮存,否则会污染别的标本。 九.标本的外观、标签和目录也同样重要,大体标本的编号最好用布条,用碳 素墨水书写解剖号码,然后将布条浸渍溶化的石蜡,冷却后将标签系于标本上或 投入缸内,标本缸外面亦须贴上解剖号码,以便随时取验。 十.大体标本的保存和管理必须予以重视,应定期加入甲醛溶液以补充平时之 挥发。液体内混和少量麝香草酚,作为防霉剂。平时也勤加管理,以防止发霉和 标本腐烂。除有明确病变需要保留的标本外,对废旧标本亦须妥善处理。一般相 隔3-6个月后,集中装于草包内焚化或深埋。 第五节 脱 钙 组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶,经过固定 后,必先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。如脱钙不全则切片易撕开或碎 裂并损伤切片刀刃。脱去钙盐的过程――称为脱钙。脱钙时应注意: 1.骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5mm厚的薄骨片,再以10%福尔马林固定 后进行脱钙。(未固定的组织在酸性脱钙液中受到的损伤比已固定的组织约大三倍)。 骨组织过厚则需延长脱钙时间,长时间浸于强酸影响切片染色效果。 2.在不影响诊断的条件下,应将骨组织周围的软组织全部剥去。如果切片目的在 于观察骨髓病变或骨组织肿瘤,最好除去一部分正常的致密的骨组织,以利于脱钙和 制片。 3.脱钙前最好先将骨组织进行脱脂。 4.脱钙要彻底,脱水应充分,在脱水过程中,要注意不使其过度硬化。 脱钙剂 优质脱钙剂的标准是: (a) 完全脱钙。 (b) 不损伤组织细胞或纤维。 (c) 不妨碍以后的染色技术