实验3: 体外蛋白质合成体系的建立:在会有 tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其它蛋白 质因子的细胞抽提物中加入mRNA或人工合 成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、氦基酸 等成分时又能合成新的肽链,新生肽链的氨 基酸顺序由外加的模板来决定。 1961年,Nirenberg等以poly(U)作模 板时发现合成了多聚苯丙氨酸,从而推出 UUU代表苯丙氨酸(Phe)。开创了破译遗 传密码的先河
实验4: 在取得第一阶段突破性成果之后,1963 年,Nirenberg:和Ochoa等以随机或特定序 列的共聚物实验对密码子中碱基组成进行 测定
实验5:共聚三核苷酸作为模板 ÷如以多聚(UUC)为模板,可能有3种起读方式: 5'...UUCUUC UUC UUC UUC...3' 分别产生UUC(Phe)、UCU(Ser)或CUU(Leu)。 ÷多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种多肽: 5'...GUA GUAGUA GUAGUA...3' 儿 由第二种读码方式产生的密码子UAG是终止密码,不编码 任何氨基酸,因此,只产生GUA(Val)或AGU (Ser)
”实验6: ”为了搞请密码子中核苷酸顺序,尼伦贝格 巧妙地设计了第三阶段的实验。他采用的 是核糖体结合法新技术,并加入的模板一 律改为具有一定顺序的单个三联体。实验 仍在无细胞体象中进行
遗传密码的破译,即确定代表每种氨基酸的具体密码。 Second letter A UG Cysteine Serine Leucine Stop codor c 脚 Glutamine A AUA 恕 Asparagine A Serine Lysine Arginine 贸 Valine Alanine Glycine Ad Clgsmie G ●至1966年, 20种氨基酸对应的61个密码子和三 个终止密码子全部被查清