紫外吸收光谱法的应用 定性分析 ·推断分子结构 ·纯度检查 ·定量测定
紫外吸收光谱法的应用 • 定性分析 • 推断分子结构 • 纯度检查 • 定量测定
(四)定量测定 Lambert-Beer定律：A=ebc 1.普通分光光度法 2.双波长分光光度法 3.导数分光光度法（导数光谱法） 4.示差分光光度法
（四）定量测定 Lambert-Beer定律：A=ebc 1. 普通分光光度法 2. 双波长分光光度法 3. 导数分光光度法（导数光谱法） 4. 示差分光光度法
Lambert-Beer定律 光吸收基本定律 Lambert-Beer定律是说明物质对单色光吸收的强弱与吸光物 质的浓度（C)和液层厚度（1)间的关系的定律，是光吸收的基 本定律，是紫外一可见光度法定量的基础。 透光率：T T= Sample (conc.C) Io 吸光度：AA=-gT=lg Path length b Lambert-Beer定律：当一束平行的单色光通过溶液时，溶液的吸 光度(4)与溶液的浓度(c)和光程(b)的乘积成正比。 朗伯定律(1760)A=lg/)=k1b 比尔定律(1852)A=lg(L/)=k2c
Lambert-Beer 定律——光吸收基本定律 Lambert-Beer 定律是说明物质对单色光吸收的强弱与吸光物 质的浓度（C）和 液层厚度（l）间的关系的定律，是光吸收的基 本定律，是紫外—可见光度法定量的基础。 Sample (conc. C) Path length b I0 It Lambert-Beer 定律: 当一束平行的单色光通过溶液时，溶液的吸 光度 (A) 与溶液的浓度 (c) 和光程 (b) 的乘积成正比。 A = a·c·b 朗伯定律(1760) A=lg(I0 /It )=k1b 比尔定律(1852) A=lg(I0 /It )=k2c 透光率：T 0 I I T t = 吸光度：A t o I I A = −lgT = lg
摩尔吸光系数 当b以cm,c以mol/L为单位，a称为摩 尔吸光系数，用表示。 的单位为L/mocm,它表示物质的浓度 为1mo/L,液层厚度为1cm时，溶液的吸光 度。 a与的关系为：a=elM（M为摩尔质量) M-8mb/A 相对分子量的测定
当b 以cm，c 以 mol/L为单位，a称为摩 尔吸光系数，用 ε表示。 摩尔吸光系数 M=emb/A 相对分子量的测定 ε的单位为 L/mol·cm，它表示物质的浓度 为1 mol/L，液层厚度为1 cm时，溶液的吸光 度。 a与ε的关系为：a =ε/M （M为摩尔质量）
吸光度的加和性 溶液中含有多种吸光物质且各组分之间不存在相互作用， 则该溶液对光的总吸光度等于各组分的吸光度之和。 比尔定律的局限 本身的局限性：只适用于稀溶液c<0.01mol/L 化学偏离：分析物质与溶剂发生缔合、离解及 溶剂化反应，生成物与分析物质具有不同的吸收光谱。 仪器偏离：单色光不纯引起的偏离
吸光度的加和性 溶液中含有多种吸光物质且各组分之间不存在相互作用， 则该溶液对光的总吸光度等于各组分的吸光度之和。 比尔定律的局限 本身的局限性：只适用于稀溶液c<0.01 mol/L 化 学 偏 离 ： 分 析 物 质 与 溶 剂 发 生 缔 合 、 离解及 溶剂化反应，生成物与分析物质具有不同的吸收光谱。 仪器偏离：单色光不纯引起的偏离