第一爷初代培养 3、污染防治措施 ▣选择环境污染轻的幼嫩材料。 ▣注重对外植体的清洗与流水冲洗环节。 口选择适宜的消毒剂和消毒方法。 ▣在室内或无菌条件下对植株进行预培养后采集外植体。 口在培养基中添加抗生素抑制内生菌。 ▣严格按照无菌操作规程进行操作
第一爷初代培养 五、外植体褐化 1、褐化（褐变）概念 在初代培养过程中，由于多酚氧化酶被激活，使酚类物质被 氧化产生醌类物质，导致外植体表面开始变褐，并有棕褐色物质 扩散到培养中的现象
第一爷初代培养 2发生褐变的主要原因 口外植体材料的基因型 在不同树种、品种间的褐变现象是不同的。 口生理状态 幼嫩的组织在接种后褐变程度并不明显，而老熟的组织在接种后褐 变程度较为严重。 ▣ 取材时期 一般在旺盛生长期采集外植体。不同种类适宜取材时期差异较大。 口培养基成分 无机盐浓度：过高的无机盐浓度加重褐化。 生长调节物质：细胞分裂素加重褐化。 口培养条件 光照过强、温度过高、培养时间过长等，加重褐化
第一爷初代培养 3、褐化的防治措施 口选择合适的外植体和取材时期 口选择适宜的培养条件 口在培养基中加入抗氧化剂 聚乙烯吡咯烷酮(pvp)0.1-0.5g/L、抗坏血酸Vc、L-半胱氨酸、柠檬酸、 偏二亚疏酸钠、二疏苏糖醇、牛血清蛋白等抗氧化剂。 口在培养基中加入活性炭 用量为0.1%一0.5%；均匀悬浮。 口连续转接 培养基开始褐变时把外植体转接到新鲜培养基上
第一爷初代培养 六、培养材料的观察 要定期进行培养反应的观察和记载，以 便有针对性的调整培养基和培养条件。因培 养材料的不同，所观察的内容也有所差异。 初代培养的主要观察内容有： 口污染率、褐化率统计 口芽萌发率统计 ▣愈伤组织发生情况 口新梢生长量统计 口不定芽、胚状体发生状况 口生根状况 接种第十九天（长出幼叶）