常见细胞因子3H-TdR掺入检测法所需细胞及参考试验条件 细 胞 株 所需浓度(细胞数/ml) 3H-TdR前培养时间 3H-TdR后培养时间 检测细胞因子 D10G4.1 2×105 48 18-20 IL-1 L929 2×105 56 16 IL-1 CTLL-2 105 24 4-6 IL-2 FDC-P1,32DCL-27 5×104 24 4-8 IL-3 CT.4S 105 24 4-6 IL-4 CH12 5×103 48 6 IL-5 B13 5×104 36 12 IL-5 T88-M 1×105 24 12 IL-5 BCL1 105 72 6 IL-5 Clone-K,I×N/2bx 105 24 4-6 IL-7 TS1 3×104 66 6 IL-9 T10 105 72 6 IL-11 UT-7 1.5×105 72 6 SCF (干细胞因子) CCL-64* 5×108 72 8 TGF-β DA3.15, IF 5×104 24 4-8 GM-CSF M14/NES60.4 5×104 24 4-8 M-CSF/G-CSF
常见细胞因子3H-TdR掺入检测法所需细胞及参考试验条件 细 胞 株 所需浓度(细胞数/ml) 3H-TdR前培养时间 3H-TdR后培养时间 检测细胞因子 D10G4.1 2×105 48 18-20 IL-1 L929 2×105 56 16 IL-1 CTLL-2 105 24 4-6 IL-2 FDC-P1,32DCL-27 5×104 24 4-8 IL-3 CT.4S 105 24 4-6 IL-4 CH12 5×103 48 6 IL-5 B13 5×104 36 12 IL-5 T88-M 1×105 24 12 IL-5 BCL1 105 72 6 IL-5 Clone-K,I×N/2bx 105 24 4-6 IL-7 TS1 3×104 66 6 IL-9 T10 105 72 6 IL-11 UT-7 1.5×105 72 6 SCF (干细胞因子) CCL-64* 5×108 72 8 TGF-β DA3.15, IF 5×104 24 4-8 GM-CSF M14/NES60.4 5×104 24 4-8 M-CSF/G-CSF
特点:不使用放射性核素, 以细胞代谢变化为增殖指征 指示细胞的增殖情况与线粒体代谢活性相关 测定步骤类似 与同位素掺入法相比 掺入物:MTT而非3H-TdR; 反应条件:选用的细胞及其浓度、 培养时间不同 (2) MTT 比色法
特点:不使用放射性核素, 以细胞代谢变化为增殖指征 指示细胞的增殖情况与线粒体代谢活性相关 测定步骤类似 与同位素掺入法相比 掺入物:MTT而非3H-TdR; 反应条件:选用的细胞及其浓度、 培养时间不同 (2) MTT 比色法
细胞株/原代细胞 细胞终浓度(细胞数/ml) 加入MTT前温育时间(h) 检测细胞因子 B9,MH60,BSF2,TTD1 5×10 4/2×10 5 96/48 IL-6 B9-11 5×10 4 96 IL-11 B9-1-3 5×10 4 96 IL-13 KYM-1D4 2×10 3 72 MV-3D9 5×103 120 TGF-β WEHI-164/clone13 2×10 3 72 TNF 32D/Mp110S 1×10 3 44 L929 2×10 5 56 TNF CTLL-2 105 22-24 IL-2 小鼠基质细胞, 32DCL-27 1.5×105 72 IL-3 细胞增殖或抑制活性检测的MTT比色法常用靶细胞
细胞株/原代细胞 细胞终浓度(细胞数/ml) 加入MTT前温育时间(h) 检测细胞因子 B9,MH60,BSF2,TTD1 5×10 4/2×10 5 96/48 IL-6 B9-11 5×10 4 96 IL-11 B9-1-3 5×10 4 96 IL-13 KYM-1D4 2×10 3 72 MV-3D9 5×103 120 TGF-β WEHI-164/clone13 2×10 3 72 TNF 32D/Mp110S 1×10 3 44 L929 2×10 5 56 TNF CTLL-2 105 22-24 IL-2 小鼠基质细胞, 32DCL-27 1.5×105 72 IL-3 细胞增殖或抑制活性检测的MTT比色法常用靶细胞