载体构建的条件： • 1. 能在受体细胞中独立复制。 • 2. 分子量小，易于分离、纯化、导入 • 3. 有限制性内切酶位点。 • 4. 有可供选择的遗传标志。 • 5. 易于导入受体细胞
载体构建的条件： • 1. 能在受体细胞中独立复制。 • 2. 分子量小，易于分离、纯化、导入 • 3. 有限制性内切酶位点。 • 4. 有可供选择的遗传标志。 • 5. 易于导入受体细胞
1．质粒： 是存在于天然细菌体内的一种独 立于细菌染色体之外的双链环状DNA，具有 独立复制的能力，通常带有细菌的抗药基因。 最早使用的质粒DNA是人工构建的pBR322， 该质粒分子大小为4.3kb，带有抗四环素和抗 氨苄青霉素基因，含EcoRⅠ，BamHⅠ， HindⅢ等单一的限制酶切点
1．质粒： 是存在于天然细菌体内的一种独 立于细菌染色体之外的双链环状DNA，具有 独立复制的能力，通常带有细菌的抗药基因。 最早使用的质粒DNA是人工构建的pBR322， 该质粒分子大小为4.3kb，带有抗四环素和抗 氨苄青霉素基因，含EcoRⅠ，BamHⅠ， HindⅢ等单一的限制酶切点
质粒pUC19的分子结构
质粒pUC19的分子结构
2．噬菌体： l可通过转染方式将其DNA送入细菌 体内进行增殖。常用的为人工构建的 λ噬菌体载体。噬菌体两端的片段对 于其包装是必需的，因而应予保留； 而其中间部分则可进行改造或置换， 使之具有某种单一的限制酶切点。目 的基因与噬菌体DNA进行重组时，可 采用插入重组方式，也可采用置换重 组方式
2．噬菌体： l可通过转染方式将其DNA送入细菌 体内进行增殖。常用的为人工构建的 λ噬菌体载体。噬菌体两端的片段对 于其包装是必需的，因而应予保留； 而其中间部分则可进行改造或置换， 使之具有某种单一的限制酶切点。目 的基因与噬菌体DNA进行重组时，可 采用插入重组方式，也可采用置换重 组方式