SHANDON 冷冻切片机及工作原理
冷冻切片机及工作原理
切片常规脱蜡入水。 苏木精染液15分钟 自来水轻轻漂至细胞核变蓝为止(镜检) 伊红液2秒 95%酒精2-3秒 95%酒精2-3秒 无水酒精2-3秒 无水酒精2-3秒 二甲苯1分钟 4.封固。在切片上滴加中性树胶,用盖玻片进行封 固,保存备用
切片常规脱蜡入水。 苏木精染液15分钟 自来水轻轻漂至细胞核变蓝为止(镜检) 伊红液2秒 95%酒精2-3秒 95%酒精2-3秒 无水酒精2-3秒 无水酒精2-3秒 二甲苯1分钟 4.封固。在切片上滴加中性树胶,用盖玻片进行封 固,保存备用
在制作较硬组织(如骨组织等)或较大组织器官( 如眼球)等切片,可用火棉胶代替石蜡进行浸透包埋, 再进行染色 o 为了较好地保存细胞内酶的活性,可选用冰冻切片 将组织在低温条件下快速冻结,直接切片,进行染色 (二)涂片、铺片、磨片标本的制备 血液等液体材料,可直接在玻片上涂片,干燥后再 进行固定和染色。疏松结缔组织和肠系膜等薄层组织, 可在玻片撕开展平,制成铺片,待干燥后进行固定和染 色。骨和牙等坚硬组织除用酸(稀硝酸等)脱钙后再按 常规制成切片外,还可直接研磨成薄的磨片进行染色观 察
在制作较硬组织(如骨组织等)或较大组织器官( 如眼球)等切片,可用火棉胶代替石蜡进行浸透包埋, 再进行染色。 为了较好地保存细胞内酶的活性 ,可选用冰冻切片 ,将组织在低温条件下快速冻结,直接切片,进行染色 。 (二) 涂片、铺片、磨片标本的制备 血液等液体材料,可直接在玻片上涂片,干燥后再 进行固定和染色。疏松结缔组织和肠系膜等薄层组织, 可在玻片撕开展平,制成铺片,待干燥后进行固定和染 色。骨和牙等坚硬组织除用酸(稀硝酸等)脱钙后再按 常规制成切片外,还可直接研磨成薄的磨片进行染色观 察
(三)组织化学和免疫组织化学方法 组织化学与细胞化学是应用物理、化学和免疫学方 法,对组织、 细胞内某些化学成分的定性、定位和定量 进行研究,从而探讨与其相关的机能活动。 这些方法的目的与特点: 1.组织化学。其原理是在组织切片上或被取材料上 加某种试剂,使它与组织或细胞内某些物质起化学反 应,形成最终反应产物。光镜组织化学要求其最终产物 是有色的沉着物;电镜细胞化学要求其最终产物是重金 属沉着物。观察其沉着物的颜色、深浅或电子密度,可 对某种物质进行定性、定位和定量
(三)组织化学和免疫组织化学方法 组织化学与细胞化学是应用物理、化学和免疫学方 法,对组织、细胞内某些化学成分的定性、定位和定量 进行研究,从而探讨与其相关的机能活动。 这些方法的目的与特点: 1.组织化学。其原理是在组织切片上或被取材料上 ,加某种试剂,使它与组织或细胞内某些物质起化学反 应,形成最终反应产物。光镜组织化学要求其最终产物 是有色的沉着物;电镜细胞化学要求其最终产物是重金 属沉着物。观察其沉着物的颜色、深浅或电子密度,可 对某种物质进行定性、定位和定量
2.免疫细胞化学。是将免疫学基本理论与细胞化学 技术相结合而建立起来的新技术。主要是应用抗原与抗 体特异性结合的特点,检测细胞内某些肽类和蛋白质等 大分子物质的分布。肽类和蛋白质种类繁多,均具抗原 性。提取动物的某些肽类和蛋白质,作为抗原注入另一 种动物体内,则产生与抗原相应的特异性抗体(免疫球 蛋白),从血清中制备该抗体。如使抗体与荧光素结合 ,则形成荧光标记抗体。常用的荧光素为异硫氰酸荧光 素(FITC), 当用该荧光素标记抗体处理组织切片时, 则与组织内相应抗原发生特异结合,在荧光显微镜下呈 黄绿色荧光部分,即为抗原抗体复合物,称此为荧光标 记抗体法。如抗体与辣根过氧化物酶(HRP)等酶标记, 与抗原结合后呈棕红色,可在光镜或电镜下观察,此即 酶标抗体法
2.免疫细胞化学。是将免疫学基本理论与细胞化学 技术相结合而建立起来的新技术。主要是应用抗原与抗 体特异性结合的特点,检测细胞内某些肽类和蛋白质等 大分子物质的分布。肽类和蛋白质种类繁多,均具抗原 性。提取动物的某些肽类和蛋白质,作为抗原注入另一 种动物体内,则产生与抗原相应的特异性抗体(免疫球 蛋白),从血清中制备该抗体。如使抗体与荧光素结合 ,则形成荧光标记抗体。常用的荧光素为异硫氰酸荧光 素(FITC),当用该荧光素标记抗体处理组织切片时, 则与组织内相应抗原发生特异结合,在荧光显微镜下呈 黄绿色荧光部分,即为抗原抗体复合物,称此为荧光标 记抗体法。如抗体与辣根过氧化物酶(HRP)等酶标记, 与抗原结合后呈棕红色,可在光镜或电镜下观察,此即 酶标抗体法