4.同功异源酶(i soch i zomers): 来源不同，识别和切割位点相同 如：BamH1和Bst1 5.同尾酶(i soaudamers): 识别序列不同，但产生相同的粘性末端 BamH 1 GVGATCC Sau3A 1:NVGATCN 11
11 5.同尾酶(isoaudamers): 识别序列不同,但产生相同的粘性末端 BamH 1 :GGATCC Sau3A 1: NGATCN 4.同功异源酶(isochizomers): 来源不同, 识别和切割位点相同 如:BamH 1 和 Bst 1
二修饰酶 对DNA或RNA末端进行剪切、补平、连接及化 学修饰的酶。 1、DNA聚合酶 大肠杆菌中第一个发现，MW109KD 方向：5'→3 还具有5‘→3’及3‘→5’外切酶 活性 缺口平移法标记DNA时常用 12
12 1、DNA聚合酶 大肠杆菌中第一个发现，MW 109KD 方向：5＇3＇ 还具有5‘3’及3‘5’外切酶 活性.缺口平移法标记DNA时常用 二 修饰酶 对DNA 或RNA 末端进行剪切、补平、连接及化 学修饰的酶
2、逆转录酶 (reverse transcriptase) 两类：「禽类成骨细胞性白血病病毒逆转录酶(AMV) mo oney小鼠白血病病毒逆转录酶(MMLV) 方向：5‘→3 作用：以RNA为模板合成DNA,构建cDNA文库 3、T4DNA连接酶(T4 DNA ligase) 将3'-0H与5'-P连接形成3'，5'-磷酸二 酯键 13
13 两类：禽类成骨细胞性白血病病毒逆转录酶（AMV） moloney小鼠白血病病毒逆转录酶（MMLV） 方向：5‘3’ 作用：以RNA为模板合成DNA，构建cDNA文库 2、逆转录酶 （reverse transcriptase） 将3＇-OH 与5＇-P 连接形成3＇ , 5＇-磷酸二 酯键 3、T4 DNA连接酶（T4 DNA ligase）
4、碱性磷酸(alkal ine phosphatase) 去除DNA or RNA5'-P,制备载体时可防止载 体自身连接，提高重组效率。 5、末端脱氧核苷酰转移酶 :末端转移酶 作用：在DNA的3'-OH上，加上dNTP 6、Tag DNA聚合酶和其它耐热DNA聚合酶 PCR时 14
14 4、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase） 6、Taq DNA聚合酶 和其它耐热DNA聚合酶 去除DNA or RNA 5＇-P，制备载体时可防止载 体自身连接， 提高重组效率。 5、末端脱氧核苷酰转移酶 ：末端转移酶 作用：在DNA的3＇-OH上，加上 dNTP PCR时
内切酶、碱性磷酸酶、 连接酶的作用 BamHI BamHI BamHI (3) BamHI (1) BamHI (2) Alkaline (4)DNA ligase phosphatase 5 DNA ligase No self-ligation
15 内切酶、碱性磷酸酶、连接酶的作用