第二节HPLC的主要类型 液一漩分配色谱渎(LLPC 在液液色谱中流动相和固定相都是 液体,它能适用于各种样品类型的分离和分 析,无论是极性的和非极性的,水溶性和 油溶性的,离子型的和非离子型的化合物
第二节 HPLC的主要类型 一、液一液分配色谱法(LLPC) 在液-液色谱中,流动相和固定相都是 液体,它能适用于各种样品类型的分离和分 析,无论是极性的和非极性的,水溶性和 油溶性的,离子型的和非离子型的化合物
1.分离原理 液液分配色谱的分离原理基本与液 液萃取相同,都是根据物质在两种互不相 溶的液体中溶解度的不同,具有不同的分 配系数。所不同的是液液色谱的分配是在 柱中进行的,使这种分配平衡可反复多次 进行,造成各组分的差速迁移,提高了分 离效率,从而能分离各种复杂组分
1.分离原理 液液分配色谱的分离原理基本与液 液萃取相同,都是根据物质在两种互不相 溶的液体中溶解度的不同,具有不同的分 配系数。所不同的是液液色谱的分配是在 柱中进行的,使这种分配平衡可反复多次 进行,造成各组分的差速迁移,提高了分 离效率,从而能分离各种复杂组分
2固定相 液液色谱的固定相由载体和固定液 组成。常用的载体有下列几类: (1)全多孔型载体:由硅胶、硅藻土 等材料制成,直径约100m的全多孔型 颗粒。 这类固定相由于颗粒很细,孔仍然 较浅,传质速率快,易实现高效、高速 特别适合复杂混合物分离及痕量分析
2.固定相 液液色谱的固定相由载体和固定液 组成。常用的载体有下列几类: (1)全多孔型载体:由硅胶、硅藻土 等材料制成,直径约100 m的全多孔型 颗粒。 这类固定相由于颗粒很细,孔仍然 较浅,传质速率快,易实现高效、高速。 特别适合复杂混合物分离及痕量分析
(2)表面多孔型载体(薄壳型微珠载 体):由直径为30~40μm的实心玻璃球 和厚度约为1~2μm的多孔性外层所组 成。目前,这种载体粒度为5~10pm。 这类固定相的多孔层厚度小、孔浅,相 对死体积小,出峰迅速、柱效亦高;颗粒较大, 渗透性好,装柱容易,梯度淋洗时能迅速达平 衡,较适合做常规分析。由于多孔层厚度薄, 最大允许量受限制
(2)表面多孔型载体(薄壳型微珠载 体):由直径为30 ~ 40m的实心玻璃球 和厚度约为1 ~ 2 m的多孔性外层所组 成。目前,这种载体粒度为5 ~ 10 m。 这类固定相的多孔层厚度小、孔浅,相 对死体积小,出峰迅速、柱效亦高;颗粒较大, 渗透性好,装柱容易,梯度淋洗时能迅速达平 衡,较适合做常规分析。由于多孔层厚度薄, 最大允许量受限制
3)化学键合固定相:它是将各种不同有机 基团通过化学反应键合到载体表面的一种方法。 它代替了固定液的机械涂渍,因此它的产 生对液相色谱法迅速发展起着重大作用,可以 认为它的出现是液相色谱法的一个重大突破 它是目前应用最广泛的一种固定相。 据统计,约有3/4以上的分离问题是在化 学键合固定相上进行的
⑶化学键合固定相:它是将各种不同有机 基团通过化学反应键合到载体表面的一种方法。 它代替了固定液的机械涂渍,因此它的产 生对液相色谱法迅速发展起着重大作用,可以 认为它的出现是液相色谱法的一个重大突破。 它是目前应用最广泛的一种固定相。 据统计,约有3/4以上的分离问题是在化 学键合固定相上进行的