4.注意事项 用电泳法进行同工酶分析时,如显示的区带数与同 工酶数不一致时,要特别注意巨分子酶的存在。巨分子 酶形成的原因主要有: ①酶与免疫球蛋白形成的复合物,如CKBB-1gG、 ck-mm-ga、ld-gA等; ②酶与其他蛋白质形成的复合物,如LD-β-脂蛋 白;③酶亚基或酶分子之间形成的聚合物,如CKMt 聚合物、LD亚基自身聚合等。 如患者临床症状不明显,血清酶活性不正常,同工 酶图谱异常时要特别警惕血清中有无巨分子酶,以免造 成对酶测定结果的错误判断和临床误诊
4．注意事项 用电泳法进行同工酶分析时，如显示的区带数与同 工酶数不一致时，要特别注意巨分子酶的存在。巨分子 酶形成的原因主要有： ① 酶与免疫球蛋白形成的复合物，如 CK—BB-IgG、 CK-MM-IgA、LD-IgA等； ② 酶与其他蛋白质形成的复合物，如LD-β-脂蛋 白；③ 酶亚基或酶分子之间形成的聚合物，如CK—Mt 聚合物、LD亚基自身聚合等。 如患者临床症状不明显，血清酶活性不正常，同工 酶图谱异常时要特别警惕血清中有无巨分子酶，以免造 成对酶测定结果的错误判断和临床误诊
(二)色谱法 常用色谱法是柱色谱,如离子交换色谱和 亲和色谱等用于同工酶的提纯与制备,但方法 费时繁琐,通常不适合临床同工酶常规检测。 目前国外已有供临床同工酶分析用的商品化微 型色谱柱。也有应用阴离子交换色谱结合免疫 化学法、聚焦色谱结合电化学检测法进行CK亚 型分析和研究的报道
(二)色谱法 常用色谱法是柱色谱，如离子交换色谱和 亲和色谱等用于同工酶的提纯与制备，但方法 费时繁琐，通常不适合临床同工酶常规检测。 目前国外已有供临床同工酶分析用的商品化微 型色谱柱。也有应用阴离子交换色谱结合免疫 化学法、聚焦色谱结合电化学检测法进行CK亚 型分析和研究的报道
(三)免疫分析法 由于同工酶的一级结构不同,因而免疫化 学性质也不同。利用纯化的同工酶免疫动物制 备特异性的抗血清,此抗体只与该同工酶产生 特异性免疫反应。因此,抗原决定簇不同的同 工酶可用特异的免疫反应来识别。应用较多的 免疫分析法有免疫抑制法、免疫沉淀法等
(三)免疫分析法 由于同工酶的一级结构不同，因而免疫化 学性质也不同。利用纯化的同工酶免疫动物制 备特异性的抗血清，此抗体只与该同工酶产生 特异性免疫反应。因此，抗原决定簇不同的同 工酶可用特异的免疫反应来识别。应用较多的 免疫分析法有免疫抑制法、免疫沉淀法等
(四)动力学分析法 (五)蛋白酶水解法
(四) 动力学分析法 (五) 蛋白酶水解法
第七节临床常用血清酶、同工酶及其 亚型分析 临床上可根据酶浓度的变化用以辅助诊断。 若酶浓度变化由细胞坏死或细胞膜通透性变化引 起,表示脏器或组织损伤;若为细胞内酶合成增 加所致,提示组织再生、修复、成骨或异位分泌, 或提示有恶性肿瘤的可能;若为酶排泄障碍引起 者说明有梗阻存在。同工酶的分析与鉴定则能反 应疾病的部位、性质和程度
第七节 临床常用血清酶、同工酶及其 亚型分析 临床上可根据酶浓度的变化用以辅助诊断。 若酶浓度变化由细胞坏死或细胞膜通透性变化引 起，表示脏器或组织损伤；若为细胞内酶合成增 加所致，提示组织再生、修复、成骨或异位分泌， 或提示有恶性肿瘤的可能；若为酶排泄障碍引起 者说明有梗阻存在。同工酶的分析与鉴定则能反 应疾病的部位、性质和程度