Dept. Biochem Mol Biol 如何定性? 利用吸收光谱鉴定化合物 利用分光光度计绘制吸收光谱曲线 用各种不同的单色光分别通过某一溶液,测定此溶液 对每一种单色光的吸收度,以波长为横坐标,以吸光度为 纵坐标绘制吸光度-波长曲线,即吸收光谱曲线。 每种物质有其特征性的吸收光谱 上医生化
— 利用吸收光谱鉴定化合物 利用分光光度计绘制吸收光谱曲线 用各种不同的单色光分别通过某一溶液，测定此溶液 对每一种单色光的吸收度，以波长为横坐标，以吸光度为 纵坐标绘制吸光度-波长曲线，即吸收光谱曲线。 如何定性？ 每种物质有其特征性的吸收光谱
Dept. Biochem Mol Biol 3o5 670 0.01 400 500 600 Wavelength 胡萝卜素蛋白复合物室温吸收光谱 上医生化
胡萝卜素蛋白复合物室温吸收光谱
Dept. Biochem Mol Biol 如何定量? 一 Lambert-Beer定律 1.朗伯( Lambert)定律 束单色光通过一光吸收介质时,其光强度随吸收光 介质的厚度增加呈指数减少。 LgIo/I=KL 入射光强度;I:透射光强度;L:介质厚度 K:吸光系数 上医生化
1. 朗伯（Lambert）定律 一束单色光通过一光吸收介质时，其光强度随吸收光 介质的厚度增加呈指数减少。 LgI0/I=KL I0 :入射光强度； I :透射光强度；L ：介质厚度 K：吸光系数 — Lambert - Beer定律 如何定量？
Dept. Biochem Mol Biol 2.比尔(Beer)定律 束单色光通过一光吸收介质时,其光强度随吸收光 介质的浓度的增加呈指数减少。 LgIo/I=KC 入射光强度;I:透射光强度;C:介质浓度 K:吸光系数 上医生化
2．比尔（Beer）定律 一束单色光通过一光吸收介质时，其光强度随吸收光 介质的浓度的增加呈指数减少。 LgI0/I=KC I0 :入射光强度； I :透射光强度；C ：介质浓度 K：吸光系数
Dept. Biochem Mol Biol 3. Lambert-beer'slaw的合并 束单色光通过某溶液时,光波被溶液吸收一部分,吸 收多少与溶液中溶质的浓度和溶液厚度成正比 A=-Igt=-Igl/I=KcL A:吸光度;C:溶液浓度;L:液层厚度;T:透光度 K:即吸光系数,是指当溶液浓度为1mol/L,光程(溶液厚 度)为1cm时的吸光度。 上医生化
3.Lambert-beer’s law的合并 一束单色光通过某溶液时，光波被溶液吸收一部分，吸 收多少与溶液中溶质的浓度和溶液厚度成正比。 A= -lgT= -lg I/ I 0 =KCL A：吸光度； C：溶液浓度； L：液层厚度；T：透光度 K：即吸光系数，是指当溶液浓度为1mol/L,光程(溶液厚 度)为1cm时的吸光度