二、细胞周期中各不同时相及其主要事件 G1期：合成细胞生长所需的 蛋白质、糖类、脂质等 限制点/起始点 。 Go S期：合成DNA 。 G2期：检查DNA是否完成 G 复制，细胞是否已生长到合 细胞核重建 适大小，环境因素是否利于 与细胞生长 CDK 细胞分裂等 ·M期：细胞分裂 基因组复制 G2 整个细胞周期运行所需要的 分子引擎一细胞周期依赖 中后期转化 与染色体分离 的蛋白激酶复合物(CDK) 纺锤体组装 已知有十多种，在不同时期 G2期检控点 起作用
二、细胞周期中各不同时相及其主要事件 • G1期：合成细胞生长所需的 蛋白质、糖类、脂质等 • S期：合成DNA • G2期：检查DNA 是否完成 复制，细胞是否已生长到合 适大小，环境因素是否利于 细胞分裂等 • M期：细胞分裂 • 整个细胞周期运行所需要的 分子引擎——细胞周期依赖 的蛋白激酶复合物（CDK） • 已知有十多种，在不同时期 起作用
检验点 check point 。1 检验点是作用于细胞 Are all chromosomes Is all DNA replicated? attached to the spindle? 周期转换时序的调控 Is environment favorable? METAPHASE-TO-ANAPHASE TRANSITION 信号通路 G2/M CHECKPOINT TRIGGER ANAPHASE AND ENTER MITOSIS PROCEED TO CYTOKINESIS GS检验点：在酵母中 称start,点，在哺乳动物 G2 CONTROLLER 中称R点 S期检验点 G; - G2M检验点 ENTER CELL CYCLE AND PROCEED TO S PHASE -M中-后期检验点 START CHECKPOINT Is environment favorable? Figure 17-14 Molecular Biology of the Cell(Garland Science 2008)
检验点 check point • 检验点是作用于细胞 周期转换时序的调控 信号通路 – G1 /S检验点：在酵母中 称start点，在哺乳动物 中称R点 – S期检验点 – G2 /M检验点 – M中-后期检验点 Figure 17-14 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Different cell cycle length mitosis cytokinesis metaphase-to-anaphase transition 一般， interphase prophase prometaphase metaphase anaphase telophase 同种细 胞细胞 M PHASE 周期时 INTERPHASE 间长短 DNA replication 相近或 Cell Type Cell-Cycle Times 相同， Early frog embryo cells 30 minutes 而不同 Yeast cells 1.5-3 hours Intestinal epithelial cells -12 hours 种类细 Mammalian fibroblasts in culture -20 hours 胞间相 Human liver cells -1 year 差很大
Different cell cycle length 一般， 同种细 胞细胞 周期时 间长短 相近或 相同， 而不同 种类细 胞间相 差很大
细胞周期时间测定 标记有丝分裂百分率法 (percentage labeled mitosis,PLM) 100 一对测定细胞进行脉冲标 80 记、定时取材、利用放 射自显影技术显示标记 40 细胞，通过统计标记有 20 丝分裂细胞百分数的办 法来测定细胞周期 10 15 20 25 30 Hours after 3H-thymidine addition -放射标记物为H标记的 TdR
细胞周期时间测定 • 标记有丝分裂百分率法 （percentage labeled mitosis，PLM） – 对测定细胞进行脉冲标 记、定时取材、利用放 射自显影技术显示标记 细胞，通过统计标记有 丝分裂细胞百分数的办 法来测定细胞周期 – 放射标记物为3H标记的 TdR
用3H-TdR脉冲标记细胞 群体↓ 离心收集细胞，换正常 培养基培养 每半小时或1小时取样、 时间oh 3h=. 3h Toa+Tism 制片↓ 上涂乳胶， 在暗室曝 光 ↓ 显影、定影、镜检处于 有丝分裂期的标记细胞 1时h=TG+T%mtT乃 h=Tc+7G2 对处于M期的被标记的细胞进行百分计数
用3H-TdR脉冲标记细胞 群体 离心收集细胞，换正常 培养基培养 每半小时或1小时取样、 制片 片上涂乳胶，在暗室曝 光 显影、定影、镜检处于 有丝分裂期的标记细胞 对处于M期的被标记的细胞进行百分计数