2真核细胞 (1酵母酵母菌是研究基因表达最 有效的单细胞真核微生物。其基因 组小,世代时间短,有单倍体双倍 体两种形式,繁殖迅速,无毒性。 能外分泌,产物可糖基化。已有不 少真核基因成功表达
⒉真核细胞 ⑴酵母 酵母菌是研究基因表达最 有效的单细胞真核微生物。其基因 组小,世代时间短,有单倍体双倍 体两种形式,繁殖迅速,无毒性。 能外分泌,产物可糖基化。已有不 少真核基因成功表达
(2)丝状真菌 优点:分泌能力强,能正 确进行翻译后加工(肽剪切糖 基化)有成熟的发酵和后处理 工艺
⑵丝状真菌 优点:分泌能力强,能正 确进行翻译后加工(肽剪切糖 基化)有成熟的发酵和后处理 工艺
(3脯哺乳动物细胞 优点:表达产物可由重组转化 细胞分泌到培养液中,纯化容易。 产物是糖基化的接近天然物。 缺点:生长慢,生产率低,培 养条件苛刻,费用高,培养液浓度 稀
⑶哺乳动物细胞 优点:表达产物可由重组转化 细胞分泌到培养液中,纯化容易。 产物是糖基化的接近天然物。 缺点:生长慢,生产率低,培 养条件苛刻,费用高,培养液浓度 稀
目前使用最广泛的宿主菌 是大肠杆菌和酿酒酵母,已建立 了许多适合它们的克隆载体和 DNA导入方法。许多外源基因已 获得成功表达
目前使用最广泛的宿主菌 是大肠杆菌和酿酒酵母,已建立 了许多适合它们的克隆载体和 DNA导入方法。许多外源基因已 获得成功表达
二、大肠杆菌中的基因表达 载体 基因工程的目的和基本手段,是选 用合适的载体把供体DNA(外源基因) 运载到受体细胞内,从而复制扩增 大量的目的DNA分子或转录表达为相 应的产物
二、大肠杆菌中的基因表达 载体 基因工程的目的和基本手段,是选 用合适的载体把供体DNA(外源基因) 运载到受体细胞内,从而复制扩增 大量的目的DNA分子或转录表达为相 应的产物