原始序列 5'-AUG CCU UCA AGA UGU GGG CAA-3 Met Po Ser Arg Cys ly gIn 同义突变——同样的氨基酸插入 5 AUG CCU UCA AGA UGU GGA CAA-3 Met Po Ser Arg Cys Gly GIn 错义突变不同的氨基酸插人 5'-AUG CCU UCA GGA UGU GGG CAA-3 无义宴变—产生一个终业密码蛋白质合成停止 5-AUG CCU UCA AGA UGA GGG CAA-3 Met Pro Ser An终止 移码突变——擂人或缺失一个碱基从突变点开始氨基酸改变 缺失或插人1或2个碱基 S-AUG CCU UCA AGa GUG GGC AA-3 Met Pro Ser Ser Val gly等 图E12点突变的性质正如所看到的在mRNA上的序列和推断蛋白质上的序列
4 olation of mutation突变株的分离 4.1有毒化合物抗性突变株,如对抗生素或者对噬菌体侵染的抗 性。这些突变株能够通过在有毒药剂或者噬菌体存在的条件下来 选择 4.2营养缺陷型的突变株,如不能合成某一种氨基酸和维生素。 这些突变株可以通过影印培养法来筛选。 4.3不能利用某种特殊底物突变株,如不能利用乳糖和麦芽糖生 长的突变株,也可以通过影印培养法鉴别
4.Isolation of mutation突变株的分离 ◼ 4.1 有毒化合物抗性突变株，如对抗生素或者对噬菌体侵染的抗 性。这些突变株能够通过在有毒药剂或者噬菌体存在的条件下来 选择。 ◼ 4.2 营养缺陷型的突变株，如不能合成某一种氨基酸和维生素。 这些突变株可以通过影印培养法来筛选。 ◼ 4.3 不能利用某种特殊底物突变株，如不能利用乳糖和麦芽糖生 长的突变株，也可以通过影印培养法鉴别
5 Replica plating影印培养法 5.1影印培养法是筛选大量特殊突变菌落的一种方法。 5.2操作步骤: 釆用亲本和突变株均能生长的培养基,能形成单个菌落的稀释度, 将细菌铺成平板; 培养后用一个无菌的丝绒布包裹的圆柱章的圆垫转移上述菌落到可 以检出突变株的培养基平板上。 通过比较,即可确定突变株
5.Replica plating 影印培养法 ◼ 5.1 影印培养法是筛选大量特殊突变菌落的一种方法。 ◼ 5.2 操作步骤： ◼ 采用亲本和突变株均能生长的培养基，能形成单个菌落的稀释度， 将细菌铺成平板； ◼ 培养后用一个无菌的丝绒布包裹的圆柱章的圆垫转移上述菌落到可 以检出突变株的培养基平板上。 ◼ 通过比较，即可确定突变株
柄 灭菌的丝绒布 无菌包裹丝绒布的圆柱章 用于转移菌落 转移菌落和培育 从非选择培养 基纯化突变株 假定的突变株不能 在选择培养基上生长 最初平板 影印培养法 影印培养法 非选择培养基 选择培养基 图El3分离突变株菌落的影印培养法
影印法图
Section E Bacterial genetics 细菌的遗传 个细菌细胞含有 E2 Mutagenesis 诱变 DHA被复制 形成新的细胞 个细菌分裂成 两个细菌
Section E Bacterial genetics 细菌的遗传 E2 Mutagenesis 诱变