电子科做女学医学院 School of Medicine UESTC > 醛类:4%的甲醛formaldehyde(或4%PFA) 2.5%的戊二醛或与2%多聚甲醛混合液固定,尤对超微结构保存好 >优点:穿透力强、固定快、组织收缩小;适于固定蛋白、肽类、酶、糖。 >缺点:易封闭扰原,必要时鼎扰原修复。 >醇类 70%之醇 >优点:固定蛋白好, 缺点:组织收缩严重; >酮类:70%丙酮 时间:10min。 >优点:渗透快; 缺点:对形态保存不好;用于对冰冻切片和细胞涂片的固定; >混合固定液:Bouins液(PFA、冰醋酸、饱和苦味酸);PLP固定液。 > 四氧化娥(0s04锇酸):常用PBS配制1%锇酸溶液后固定1h,用于免疫组化 及电镜观察。有强烈刺激。鼎在通风橱内操作
Ø 醛类:4%的甲醛formaldehyde(或4%PFA) 2.5%的戊二醛 或与2%多聚甲醛混合液固定,尤对超微结构保存好 Ø 优点:穿透力强、固定快、组织收缩小;适于固定蛋白、肽类、酶、糖。 Ø 缺点:易封闭抗原,必要时需抗原修复。 Ø 醇类 : 70%乙醇 Ø 优点:固定蛋白好, 缺点:组织收缩严重; Ø 酮类:70%丙酮 时间:10min。 Ø 优点:渗透快; 缺点:对形态保存不好;用于对冰冻切片和细胞涂片的固定; Ø 混合固定液:Bouin液(PFA、冰醋酸、饱和苦味酸);PLP固定液。 Ø 四氧化锇(OsO4 锇酸):常用PBS配制1%锇酸溶液后固定1h,用于免疫组化 及电镜观察。有强烈刺激,需在通风橱内操作
电子科战女学医学院 School of Medicine UESTC 4%多聚甲醛液(PFA) 适用组织:实验室常备固定剂,适用多种组织的固定。 配制方法:40%甲醛水溶液120m1+蒸馏水880m1+ 磷酸二氢钠 4g 磷酸氢二钠13g、商品化PFA 固定时间: 4-24小时。 固定后处理: 流水冲洗24小时。 特性:有一定毒性(防护)。大分子
4%多聚甲醛液(PFA) 适用组织: 实验室常备固定剂,适用多种组织的固定。 配制方法:40%甲醛水溶液 120ml +蒸馏水880ml+ 磷酸二氢钠 4g + 磷酸氢二钠 13g、商品化PFA 固定时间: 4-24小时。 固定后处理: 流水冲洗24小时。 特性:有一定毒性(防护)。大分子
电子科战女学医学院 School of Medicine UESTC 乞醇(Ethyl alcohol) 固定浓度: 70%--90% 固定时间: 一般4小时一12小时 固定后处理: 直接入脱水剂 配制方法: 无水乙醇十 蒸馏水 特性: 固定、脱水等多种功能,单独作固定剂使用时其渗透力 较差,因此取材应薄,才能固定好。高浓度乙醇(通常指90%浓 度以上)不溶解细胞内糖原,宜做保存糖原的固定剂。 组织在高浓度乙醇中放置时间过长时,收缩明显,易发脆, 影响制片。50%以上浓度的乙醇可溶解组织内脂肪、类脂体、色 素等,因此不能用作以上物质的固定剂
乙醇(Ethyl alcohol) 固定浓度: 70%--90% 固定时间: 一般4小时—12小时 固定后处理: 直接入脱水剂 配制方法: 无水乙醇 + 蒸馏水 特性: 固定、脱水等多种功能,单独作固定剂使用时其渗透力 较差,因此取材应薄,才能固定好。高浓度乙醇(通常指90%浓 度以上)不溶解细胞内糖原,宜做保存糖原的固定剂。 组织在高浓度乙醇中放置时间过长时,收缩明显,易发脆, 影响制片。50%以上浓度的乙醇可溶解组织内脂肪、类脂体、色 素等,因此不能用作以上物质的固定剂
电子神战女学医学院 School of Medicine UESTC 乙醇一甲醛液(A一F液) 配制方法: 95%乙醇90m1 40%甲醛10m1 固定时间: 组织块固定4一12小时,铺片固定 5-10分钟。 固定后处理: 直接入脱水剂。 适用组织: 组织中的肥大细胞,组织化学中对糖原的固定等等
乙醇—甲醛液(A—F液) 配制方法: 95%乙醇90ml 40%甲醛10ml 固定时间: 组织块固定4—12小时,铺片固定 5—10分钟。 固定后处理: 直接入脱水剂。 适用组织: 组织中的肥大细胞,组织化学中对糖原的固定等等
电子科战女学医学院 School of Medicine UESTC Bouin氏液一一一一固定皮肤 普味酸一疏酸液一一一一胚胎组织,尤以固定鸡胚最好 Carnoy氏液一一一一糖原、染色体、尼氏体等 Hlly氏液一一一一骨髓、脾、肝等造血器官及胰岛、脑垂体前叶等含 特殊颗粒的细胞
Bouin氏液————固定皮肤 苦味酸—硫酸液————胚胎组织,尤以固定鸡胚最好 Carnoy氏液————糖原、染色体、尼氏体等 Helly氏液————骨髓、脾、肝等造血器官及胰岛、脑垂体前叶等含 特殊颗粒的细胞