迎头分析法:与固定床相同,各个溶质按其在固 定相和流动相间分配系数的大小次序穿透,最先 穿透的组分能以纯粹的状态得到部分回收,之后 均为双组分或双组分以上的混合物。 顶替展开:采用的洗脱液中含有与固定相的亲和 力比料液中各个组分都大的物质,称为顶替剂。 顶替剂将料液中所含溶质按其与固定相亲和力的 大小不同从柱中次序顶替出来。可浓缩,适于处 理大量稀溶液
BUCT 11 迎头分析法:与固定床相同,各个溶质按其在固 定相和流动相间分配系数的大小次序穿透,最先 穿透的组分能以纯粹的状态得到部分回收,之后 均为双组分或双组分以上的混合物。 顶替展开:采用的洗脱液中含有与固定相的亲和 力比料液中各个组分都大的物质,称为顶替剂。 顶替剂将料液中所含溶质按其与固定相亲和力的 大小不同从柱中次序顶替出来。可浓缩,适于处 理大量稀溶液
第二节常用的层析介质 一层析剂 BUCT 定义:用于层析分离技术的分离介质,总称层析剂。 基质 化学惰性物质,对目标物质 和杂质都无法作用。 层析剂 表面的活性功能团 应根据层析分离法 (或活性中心) 而选用或制取。 12
BUCT 12 第二节 常用的层析介质 应根据层析分离法 而选用或制取。 定义: 用于层析分离技术的分离介质,总称层析剂。 一.层析剂 层析剂 基质 表面的活性功能团 (或活性中心) 化学惰性物质,对目标物质 和杂质都无法作用
层析剂特点: BUCT ① 应不溶于流动相(溶剂和展开剂),并具有较 好的化学稳定性和机械强度。 ②具有较大的表面积,且粒度均匀。 ③对分离大分子生物活性物质时,要求层析剂有 一定的孔度,且要求基质对生物活性物质(如 酶等)无毒性。 ④能耐受生物降解作用,且具有好的热稳定性。 13
BUCT 13 ① 应不溶于流动相(溶剂和展开剂),并具有较 好的化学稳定性和机械强度。 ② 具有较大的表面积,且粒度均匀。 ③ 对分离大分子生物活性物质时,要求层析剂有 一定的孔度,且要求基质对生物活性物质(如 酶等)无毒性。 ④ 能耐受生物降解作用,且具有好的热稳定性。 层析剂特点:
分类: BUCT 无机物质层析:氧化铝, 硅胶,活性碳。 多糖类层析剂 :琼脂糖 ,葡聚糖,纤维素。 合成类层析剂:聚丙稀酰氨凝胶。 二无机物质层析剂 氧化铝 有碱性、中性和酸性之分,碱性氧化铝在碱性 下稳定,酸性氧化铝在酸性下稳定。 氧化铝活性与含水量有关,含水量多,活性低 。在400℃、6r下,可得活性L级的层析剂。 可反复使用多次,多用于吸附层析剂
BUCT 14 ➢ 无机物质层析:氧化铝,硅胶,活性碳。 ➢ 多糖类层析剂:琼脂糖,葡聚糖,纤维素。 ➢ 合成类层析剂:聚丙稀酰氨凝胶。 ⚫ 有碱性、中性和酸性之分,碱性氧化铝在碱性 下稳定,酸性氧化铝在酸性下稳定。 ⚫ 氧化铝活性与含水量有关,含水量多,活性低 。在400℃、6hr下,可得活性I-II级的层析剂。 ⚫ 可反复使用多次,多用于吸附层析剂。 分类: 二.无机物质层析剂 1、 氧化铝
2、硅胶 BUCT 具有多孔性的硅氧烷交联结构: Si-OH > 骨架表面有很多硅醇-S-OH基团,能吸附很多水 分,水分多以游离状态存在,加热即除去。 >在高温500℃下,硅醇结构被破坏,硅胶失去活性
BUCT 15 具有多孔性的硅氧烷交联结构: Si O Si OH O O O O ➢骨架表面有很多硅醇-Si-OH基团,能吸附很多水 分,水分多以游离状态存在,加热即除去。 ➢在高温500℃下,硅醇结构被破坏,硅胶失去活性。 2、 硅胶