2. SOD测定原理 检测SOD常用间接的化学方法 在反应系统中,存在 产生O2 .体系(如核黄素照光或黄嘌呤-黄嘌呤氧化 酶等) 被氧化或还原后可检测的物质(如NBT, Cytc或 邻苯三酚,肾上腺素等) 通过光谱吸收,测定被氧化或还原后物质的变化, 从而计算出SOD的活性。 氮蓝四唑(NBT)光化还原的方法常用于植物组 织的SOD活性测定和SOD同工酶带显示。 酶单位/样品量 =
2. SOD测定原理 检测SOD常用间接的化学方法 在反应系统中,存在 产生O2 .体系(如核黄素照光或黄嘌呤-黄嘌呤氧化 酶等) 被氧化或还原后可检测的物质(如NBT, Cytc或 邻苯三酚,肾上腺素等) 通过光谱吸收,测定被氧化或还原后物质的变化, 从而计算出SOD的活性。 氮蓝四唑(NBT)光化还原的方法常用于植物组 织的SOD活性测定和SOD同工酶带显示。 酶单位/样品量 =
3. 丙二醛测定原理 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在 酸性和高温条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA) 反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑 2,4-二酮),其最大吸收波长在532 nm。可采 用分光光度法计算MDA含量。 直线回归法:Y532 =-0.00198+0.088D450 双组分分光光度计法 : C1(mmol/L)=11.71D450 C2(umol/L)=6.45(D532-D600)-0.56D450
3. 丙二醛测定原理 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在 酸性和高温条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA) 反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑 2,4-二酮),其最大吸收波长在532 nm。可采 用分光光度法计算MDA含量。 直线回归法:Y532 =-0.00198+0.088D450 双组分分光光度计法 : C1(mmol/L)=11.71D450 C2(umol/L)=6.45(D532-D600)-0.56D450
三.实验设计 ⚫ 选材 ⚫ 营养液的选择和配制(药品提前开出并上交) ⚫ 实验操作设计及注意事项 – 材料的选择和处理 – 实验组和对照组的设计 ⚫ 生理指标(SOD和MDA)的测定(取样要科学) – 原理的理解 – 所需仪器药品及药品配制 – 详细的操作过程 ⚫ 数据的整理和分析 ⚫ 结论
三.实验设计 ⚫ 选材 ⚫ 营养液的选择和配制(药品提前开出并上交) ⚫ 实验操作设计及注意事项 – 材料的选择和处理 – 实验组和对照组的设计 ⚫ 生理指标(SOD和MDA)的测定(取样要科学) – 原理的理解 – 所需仪器药品及药品配制 – 详细的操作过程 ⚫ 数据的整理和分析 ⚫ 结论
选材
选材
四.实验安排 ⚫ 四人一组自行组合、设计、选材 ⚫ 实验四周(保鲜液更换、形态观察、 SOD和MDA测定) ⚫ 数据统计分析,实验总结 ⚫ 课堂汇报 ⚫ 根据所提意见对实验总结进行修改,撰 写实验报告
四.实验安排 ⚫ 四人一组自行组合、设计、选材 ⚫ 实验四周(保鲜液更换、形态观察、 SOD和MDA测定) ⚫ 数据统计分析,实验总结 ⚫ 课堂汇报 ⚫ 根据所提意见对实验总结进行修改,撰 写实验报告