固相NC膜
固相NC膜
Solid phase Membcane-Based muo孕ay ■NITROCELLULOSE AND Putting the Pieces Together CELLULOSE ACETATE POLYMERS ●STRUCTURES ◆ CELLULOSE NITRATE ONO CH.O ONOCH ONO ◆CELLULOSE ACETATE CHO OCOCH HccOO C OcOCHs MEMBRANE TECHNOLOGY 3
Solid phase Putting the Pieces Together MECHANISM OF PROTEIN BINDING TO NITROCELLULOSE MEMBRANES Electrostatic adsorption(non-ionic) δ 6+ O Cellulose-O-N 8 R-C-NH-R2 O 6+ POLYMER PEPTIDE BOND Instantaneous (zero order kinetics) Potentially reversible ◇Risk is decreased by: Complete drying Avoiding/minimizing chaotropic detergents (Tween. Triton) Avoiding larger proteins as blocking agents MEMBRANE TECHNOLOGY 15
第二节 免疫金标记技术 免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标 蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些 标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色 或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫 检测。这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大， 称之为免疫金银染色（immunogold silver staining， IGSS）
第二节 免疫金标记技术 免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标 蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些 标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色 或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫 检测。这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大， 称之为免疫金银染色（immunogold silver staining， IGSS）
一、胶体金制备 胶体金（colloidal gold）的制备一般采用 还原法，常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、 抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。向一定浓度 的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子还 原成金原子，形成金颗粒悬液，也称金溶胶 （gold solution）
一、胶体金制备 胶体金（colloidal gold）的制备一般采用 还原法，常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、 抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。向一定浓度 的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子还 原成金原子，形成金颗粒悬液，也称金溶胶 （gold solution）