具体的操作过程: 无菌的块茎或块根,用钻孔器钻出一批同一类薄 壁组织圆柱形的组织,平行排列好。多把刀片等 距离地固定在一组金属片之间,一次切下去得到 许多个长短一致的圆柱形的外植体
具体的操作过程: 无菌的块茎或块根,用钻孔器钻出一批同一类薄 壁组织圆柱形的组织,平行排列好。多把刀片等 距离地固定在一组金属片之间,一次切下去得到 许多个长短一致的圆柱形的外植体
园柱形大量地、准确地得到外形相同的外植体。 圆柱体的表面积大,利于组织块和外界气体和营 养物的交换。 外植体的损伤表面分泌物,具有促进愈伤组织形 成的能力,因此表面积越大,产生分泌物数量也 越多,愈伤组织的得率也越高。 外植体的体积应尽可能小,从而得到较大数量的 外植体。外植体最小的限度由其亲本组织细胞的 平均大小来决定。细胞数目
圆柱形大量地、准确地得到外形相同的外植体。 圆柱体的表面积大,利于组织块和外界气体和营 养物的交换。 外植体的损伤表面分泌物,具有促进愈伤组织形 成的能力,因此表面积越大,产生分泌物数量也 越多,愈伤组织的得率也越高。 外植体的体积应尽可能小,从而得到较大数量的 外植体。外植体最小的限度由其亲本组织细胞的 平均大小来决定。细胞数目
例如菊芋的细胞比胡萝卜根次生韧皮部的细胞 大三倍,一个3.8毫克的胡萝卜外植体大约包含 25,000个细胞,这样一个外植体是能够成活的。 而同样重量的菊芋外植体,由于细胞大而数目 少,在分离过程中造成损伤往往难以成活。必 须重量达到8毫克才包含约20,000个细胞,使 之易于成活
例如菊芋的细胞比胡萝卜根次生韧皮部的细胞 大三倍,一个3.8毫克的胡萝卜外植体大约包含 25,000个细胞,这样一个外植体是能够成活的。 而同样重量的菊芋外植体,由于细胞大而数目 少,在分离过程中造成损伤往往难以成活。必 须重量达到8毫克才包含约20,000个细胞,使 之易于成活
第四节愈伤组织的培养 培养基 培养基一般包括大量元素、微量元素和一种碳 水化合物,最常用的碳水化合物是蔗糖, 这样简单的培养基(基本培养基)只有很少几种植 物组织能够培养和维持下去,大多数组织需要 添加各种各样的附加物(完全培养基),如维 生素、氨基酸、糖醇,生长素、细胞分裂素、 赤霉素、螯合剂如EDTA、各种营养性的提取物
第四节 愈伤组织的 培养 一、培养基 培养基一般包括大量元素、微量元素和一种碳 水化合物,最常用的碳水化合物是蔗糖。 这样简单的培养基(基本培养基)只有很少几种植 物组织能够培养和维持下去,大多数组织需要 添加各种各样的附加物(完全培养基),如维 生素、氨基酸、糖醇,生长素、细胞分裂素、 赤霉素、螯合剂如EDTA、各种营养性的提取物 如椰子汁等
注意:选用完全已知的合成化合物,不大主张用 复杂的天然产物,如酵母提取物、番茄汁、椰子 汁等。 必须强调: 适合于诱发愈伤组织的培养基不一定适合于维持 这些愈伤组织;适合于液体培养的培养基也不一 定适合于固体培养
注意:选用完全已知的合成化合物,不大主张用 复杂的天然产物,如酵母提取物、番茄汁、椰子 汁等。 必须强调: 适合于诱发愈伤组织的培养基不一定适合于维持 这些愈伤组织;适合于液体培养的培养基也不一 定适合于固体培养