二、载体 1、重组DNA技术 重组DNA:指利用不同生物來源的DNA分子拼接的杂种DNA 分子,是自然界中不存在的DNA分子 重组DNA技术是基因克隆的关键技术,其主要步骤为: 1)从细胞或组织获得DNA并纯化 2)用限制酶切害DNA 3)将获得的限制片段连接到载体上,形成重组DNA分 子 4)重组DNA导入宿主细胞,在宿主细胞内复制,产生 大 量相同拷贝的重组DNA分子-克隆 5)克隆的DNA分子可以从宿主细胞中回收,纯化 6)克隆的DNA可以转录和翻译,其产品可以被分禽出来
二、载体 1、重组DNA技术 重组DNA：指利用不同生物来源的DNA分子拼接的杂种DNA 分子，是自然界中不存在的DNA分子 重组DNA技术是基因克隆的关键技术，其主要步骤为： 1) 从细胞或组织获得DNA并纯化 2) 用限制酶切割DNA 3) 将获得的限制片段连接到载体上,形成重组DNA分 子 4) 重组DNA导入宿主细胞，在宿主细胞内复制，产生 大 量相同拷贝的重组DNA分子--克隆 5) 克隆的DNA分子可以从宿主细胞中回收，纯化 6) 克隆的DNA可以转录和翻译，其产品可以被分离出来 用于研究或商业开发
宿主细胞染色体 待克隆的DNA片段用同种限制性酶酶切 质粒的抽提 和利用限制性酶酶切 两种DNA分子构成一个重组分子 导入宿主细胞 利用抗性筛选或颜色反应来选择带有重组质粒的细胞 图12-5重组DNA技术流程
图 12-5 重组DNA技术流程