要选择使用。1514122313451261116O78L9-101.物镜转换器2.物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6.彩虹光阑7.光源8.镜座9.电源开关10.光源亮度螺旋11.粗调螺旋12.微调螺旋13.镜臂14.镜筒15.目镜16.标本移动螺旋图1普通光学显微镜的结构8.物镜（2）：安装于物镜转换器上，由一系列复式透镜组成，利用入射光线形成被检物的第一次成像。物镜转换器上可装2-4个物镜。通常物镜的放大倍数有4x、10×、40x等。般将8×或10×的物镜称为低倍镜（而将5×以下的称为放大镜）：将40x或45×的称为高倍镜：将90×或100×的称为油镜（这种镜头在使用时需浸在镜油中)。简单低倍物镜一一放大倍数很低，用来作标本的全面观察：低倍镜——观察标本全貌；高倍镜——观察标本局部特征；油镜一一放大倍数很高，当观察标本时，在物镜与标本制片之间加一滴香柏油，此外，亦须在聚光镜的上透镜和制片的正文面上香柏油作为媒质。9.聚光器（5）：位于载物台的通光孔下方，由聚光镜和光圈构成，其主要功能是将光线集中到所要观察的标本上。聚光镜由两三个透镜组合而成，其作用相当于一个凸透镜，可将光线汇集成束。在聚光器的左下方有一调节螺旋可使其上升或下降，从而调节光线的强弱，升高聚光器可使光线增强，反之则光线变弱。10.彩虹光阑（6）：位于聚光器的下端，是一种能控制进入聚光器光束大小的可变光阑。它由十几张金属薄片组合排列而成，其外侧有一小柄，可使光圈的孔径开大或缩小，以调节光线的强弱。在光圈的下方常装有滤光片框，可放置不同颜色的滤光片。9
9 要选择使用。 1.物镜转换器 2.物镜 3.游标卡尺 4.载物台 5.聚光器 6.彩虹光阑 7.光源 8.镜座 9.电源开关 10.光源亮度螺旋 11.粗调螺旋 12.微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋 图 1 普通光学显微镜的结构 8. 物镜（2）：安装于物镜转换器上，由一系列复式透镜组成，利用入射光线形成被检 物的第一次成像。物镜转换器上可装 2-4 个物镜。通常物镜的放大倍数有 4×、10×、40×等。 一般将 8×或 10×的物镜称为低倍镜(而将 5×以下的称为放大镜)；将 40×或 45×的称为高倍镜； 将 90×或 100×的称为油镜(这种镜头在使用时需浸在镜油中)。 简单低倍物镜——放大倍数很低，用来作标本的全面观察； 低倍镜——观察标本全貌； 高倍镜——观察标本局部特征； 油镜——放大倍数很高，当观察标本时，在物镜与标本制片之间加一滴香柏油，此外， 亦须在聚光镜的上透镜和制片的正文面上香柏油作为媒质。 9. 聚光器（5）：位于载物台的通光孔下方，由聚光镜和光圈构成，其主要功能是将光 线集中到所要观察的标本上。聚光镜由两三个透镜组合而成，其作用相当于一个凸透镜，可 将光线汇集成束。在聚光器的左下方有一调节螺旋可使其上升或下降，从而调节光线的强弱， 升高聚光器可使光线增强，反之则光线变弱。 10.彩虹光阑（6）：位于聚光器的下端，是一种能控制进入聚光器光束大小的可变光阑。 它由十几张金属薄片组合排列而成，其外侧有一小柄，可使光圈的孔径开大或缩小，以调节 光线的强弱。在光圈的下方常装有滤光片框，可放置不同颜色的滤光片
11.光源亮度螺旋（10）：位于镜座上，用于调整光的亮度三、显微镜的使用方法1.低倍镜检视法镜检时必须由低倍镜开始。因为观察标本，先要了解概貌，然后进行目的部分的仔细观察。如果一开始就用高倍镜，由于视野暗和不易调焦点，很难找到目的物。（1）对光打开显微镜上的电源开关，转动粗调螺旋，使镜筒略升高（或使载物台下降），调节物镜转换器，使低倍镜转到工作状态（即对准通光孔），当镜头完全到位时，可听到轻微的扣碰声。打开光圈并使聚光器上升到适当位置（以聚光镜上端透镜平面稍低于载物台平面的高度为宜），然后用向着目镜内观察（注意两眼应同时静开），同时调节亮度旋钮，使视野内的光线均匀、亮度适中。（2）放置玻片标本将玻片标本放置到载物台上，用标本移动器上的弹簧夹固定好（注意：使有盖玻片或有标本的一面朝上），然后转动标本移动器的螺旋，使需要观察的标本部位对准通光孔的中央。（3）调节焦距用眼睛从侧面注视低倍镜，同时用粗调螺旋使镜头下降（或载物台上升），直至低倍镜头距玻片标本的距离小于0.6cm（注意：操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离，以避免镜头碰破玻片）。然后用在自镜上观察，同时用左手慢慢转动粗调螺旋使镜筒上升（或便载物台下降)直至视野中出现物像为止，再转动微调螺旋，使视野中的物像最清晰。如果需要观察的物像不在视野中央，甚至不在视野内，可用标本移动螺旋前后、左右移动标本的位置，使物像进入视野并移至中央。在调焦时如果镜头与玻片标本的距离已超过1cm还未见到物像时，应严格按上述步骤重新操作。2.高倍镜检视法（1）移动标本制片：把要观察的目的物移至视野中央。（2）换置高倍镜：在低倍物镜对准清晰后，再转动换镜转盘，使高倍镜的小槽嵌入镜筒下方的弹簧夹中。此时动作须十分细心；如遇高倍镜碰击盖片，勿使强力，以致压碎盖片，伤及镜头。（3）调节焦点：换置高倍镜后，从目镜观察，但所见物象往往不清楚，再以左手轻向后转动微调螺旋，使镜筒微微上升，至物象清晰为止。在转动微调螺旋时，如果已经转到限界，应倒转微调螺旋重新自低倍镜开始。（4）调节光阑：高倍镜下视野一般较暗，应将光阑开得稍大。用高倍观察完毕，须先转回低倍镜，或将高倍镜头移开后，再取制片，切勿在高倍显微镜下取出或放入制片，以免损坏透镜。3.油镜的使用方法（1）用高倍镜找到所需观察的标本物像，并将需要进一步放大的部位移至视野中央。（2）将聚光器升至最高位置并将光圈开至最大（因油镜所需光线较强）。（3）转动物镜转换盘，移开高倍镜，往玻片标本上需观察的部位（载玻片的正面，相当于通光孔的位置)滴一滴香柏油（折光率1.51)或液状石蜡（折光率1.46)作为介质，然后在眼晴10
10 11. 光源亮度螺旋（10）：位于镜座上，用于调整光的亮度。 三、显微镜的使用方法 1. 低倍镜检视法 镜检时必须由低倍镜开始。因为观察标本，先要了解概貌，然后进行目的部分的仔细观 察。如果一开始就用高倍镜，由于视野暗和不易调焦点，很难找到目的物。 （1）对光 打开显微镜上的电源开关，转动粗调螺旋，使镜筒略升髙(或使载物台下降)，调节物镜 转换器，使低倍镜转到工作状态(即对准通光孔)，当镜头完全到位时，可听到轻微的扣碰声。 打开光圈并使聚光器上升到适当位置(以聚光镜上端透镜平面稍低于载物台平面的高度 为宜)，然后用向着目镜内观察(注意两眼应同时睁开)，同时调节亮度旋钮，使视野内的光线 均匀、亮度适中。 （2）放置玻片标本 将玻片标本放置到载物台上，用标本移动器上的弹簧夹固定好(注意：使有盖玻片或有 标本的一面朝上)，然后转动标本移动器的螺旋，使需要观察的标本部位对准通光孔的中央。 （3）调节焦距 用眼睛从侧面注视低倍镜，同时用粗调螺旋使镜头下降(或载物台上升)，直至低倍镜头 距玻片标本的距离小于 0.6cm(注意：操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离，以避免镜头 碰破玻片)。然后用在目镜上观察，同时用左手慢慢转动粗调螺旋使镜筒上升(或使载物台下 降)直至视野中出现物像为止，再转动微调螺旋，使视野中的物像最清晰。 如果需要观察的物像不在视野中央，甚至不在视野内，可用标本移动螺旋前后、左右移 动标本的位置，使物像进入视野并移至中央。在调焦时如果镜头与玻片标本的距离已超过 1cm 还未见到物像时，应严格按上述步骤重新操作。 2. 高倍镜检视法 （1）移动标本制片：把要观察的目的物移至视野中央。 （2）换置高倍镜：在低倍物镜对准清晰后，再转动换镜转盘，使高倍镜的小槽嵌入镜筒 下方的弹簧夹中。此时动作须十分细心；如遇高倍镜碰击盖片，勿使强力，以致压碎盖片， 伤及镜头。 （3）调节焦点：换置高倍镜后，从目镜观察，但所见物象往往不清楚，再以左手轻向后 转动微调螺旋，使镜筒微微上升，至物象清晰为止。在转动微调螺旋时，如果已经转到限界， 应倒转微调螺旋重新自低倍镜开始。 （4）调节光阑：高倍镜下视野一般较暗，应将光阑开得稍大。用高倍观察完毕，须先转 回低倍镜，或将高倍镜头移开后，再取制片，切勿在高倍显微镜下取出或放入制片，以免损 坏透镜。 3. 油镜的使用方法 （1）用高倍镜找到所需观察的标本物像，并将需要进一步放大的部位移至视野中央。 （2）将聚光器升至最高位置并将光圈开至最大(因油镜所需光线较强)。 （3）转动物镜转换盘，移开高倍镜，往玻片标本上需观察的部位(载玻片的正面，相当 于通光孔的位置)滴一滴香柏油(折光率 1.51)或液状石蜡(折光率 1.46)作为介质，然后在眼睛
的注视下，使油镜转至工作状态。此时油镜的下端镜面一般应正好浸在油滴中，（4）注视目镜中，同时小心而缓慢地转动微调螺旋（注意：这时只能使用微调螺旋，千万不要使用粗调螺旋)使镜头微微上升(或使载物台下降），直至视野中出现清晰的物像。操作时不要反方向转动微调螺旋，以免镜头下降压碎标本或损坏镜头。（5）油镜使用完后，必须及时将镜头上的油擦拭干净。操作时先将油镜升高1cm，并将其转离通光孔，先用干擦镜纸措擦一次，把大部分的油去掉，再用蘸有少许清洁剂或二甲本的擦镜纸擦一次，最后再用干擦镜纸措擦一次。至于玻片标本上的油，如果是有盖玻片的永久制片，可直接用上述方法擦干净：如果是无盖玻片的标本，则载玻片上的油可用拉纸法措擦，即先把小张擦镜纸盖在油滴上，再往次即可干净纸上滴几滴清洁剂或二甲苯，趁湿将纸往外拉，如此反复几次即可干净。四、使用显微镜的注意事项1在使用镜筒直立式显微镜时，镜筒倾斜的角度不能超过45°，以免重心后移使显微镜倾倒。在观察带有液体的临时装片时，不要使用倾斜关节，以免由于载物台的倾斜而使液体流到显微镜上。2.不可随意拆卸显微镜上的零部件，以免丢失损坏或使灰尘落入镜内。3.显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指措擦，以免磨损镜面，需要时只能用擦镜纸轻轻擦拭。机械部分可用纱布等擦拭。4.在任何时候，特别是使用高倍镜或油镜时，都不要一边在目镜中观察，一边下降镜筒或上升载物台），以避免镜头与玻片相撞，损坏镜头或玻片标本。5.显微镜使用完后应及时复原。先升高镜筒（或下降载物台），取下玻片标本，使物镜转离通光孔。例如，镜筒、载物台是倾斜的，应恢复直立或水平状态。然后下降镜筒（或上升载物台），使物镜与载物台相接近。垂直反光镜，下降聚光器，关小光圈，关闭电源。6.在利用显微镜观察标本时，要养成两眼同时静开，双手并用（左手操纵调焦螺旋，右手操纵标本移动器）的习惯，必要时应一边观察一边记录。实验五木材显微切片技术一、实验目的学习木材永久切片和临时切片的制作方法，为今后木材解剖研究与木材鉴定工作打好基础，练好技能。二、实验材料木材样品（标本)、乙醇、冰醋酸、双氧水、甘油、番红、铁钒、二甲苯、中性树胶。三、实验仪器设备光学显微镜、木材切片机、切片刀、单面刀片、水浴锅、培养皿、解针、镊子、毛笔、载玻片和盖玻片。11
11 的注视下，使油镜转至工作状态。此时油镜的下端镜面一般应正好浸在油滴中。 （4）注视目镜中，同时小心而缓慢地转动微调螺旋(注意：这时只能使用微调螺旋，千 万不要使用粗调螺旋)使镜头微微上升(或使载物台下降)，直至视野中岀现凊晰的物像。操作 时不要反方向转动微调螺旋，以免镜头下降压碎标本或损坏镜头。 （5）油镜使用完后，必须及时将镜头上的油擦拭干净。操作时先将油镜升高 1cm，并将 其转离通光孔，先用干擦镜纸揩擦一次，把大部分的油去掉，再用蘸有少许清洁剂或二甲苯 的擦镜纸擦一次，最后再用干擦镜纸揩擦一次。至于玻片标本上的油，如果是有盖玻片的永 久制片，可直接用上述方法擦干净；如果是无盖玻片的标本，则载玻片上的油可用拉纸法揩 擦，即先把小张擦镜纸盖在油滴上，再往次即可干净纸上滴几滴清洁剂或二甲苯，趁湿将纸 往外拉，如此反复几次即可干净。 四、使用显微镜的注意事项 1. 在使用镜筒直立式显微镜时，镜筒倾斜的角度不能超过 45°，以免重心后移使显微镜 倾倒。在观察带有液体的临时装片时，不要使用倾斜关节，以免由于载物台的倾斜而使液体 流到显微镜上。 2. 不可随意拆卸显微镜上的零部件，以免丢失损坏或使灰尘落入镜内。 3. 显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指揩擦，以免磨损镜面，需要 时只 能用擦镜纸轻轻擦拭。机械部分可用纱布等擦拭。 4. 在任何时候，特别是使用高倍镜或油镜时，都不要一边在目镜中观察，一边下降镜 筒或上升载物台)，以避免镜头与玻片相撞，损坏镜头或玻片标本。 5. 显微镜使用完后应及时复原。先升高镜筒(或下降载物台)，取下玻片标本，使物镜转 离通光孔。例如，镜筒、载物台是倾斜的，应恢复直立或水平状态。然后下降镜筒(或上升 载物台)，使物镜与载物台相接近。垂直反光镜，下降聚光器，关小光圈，关闭电源。 6. 在利用显微镜观察标本时，要养成两眼同时睁开，双手并用(左手操纵调焦螺旋，右 手操纵标本移动器)的习惯，必要时应一边观察一边记录。 实验五 木材显微切片技术 一、实验目的 学习木材永久切片和临时切片的制作方法，为今后木材解剖研究与木材鉴定工作打好基 础，练好技能。 二、实验材料 木材样品(标本)、乙醇、冰醋酸、双氧水、甘油、番红、铁钒、二甲苯、中性树胶。 三、实验仪器设备 光学显微镜、木材切片机、切片刀、单面刀片、水浴锅、培养皿、解剖针、镊子、毛笔、 载玻片和盖玻片
四、实验步骤1.试样制备通常取材于胸高(1.3米）处或者以上正常部位。试材尺寸（弦向×径向×纵向）为15mm×15mm×3mm，必须具备标准的三切面，便于观察各切面上细胞排列的情况。2.排除空气切片前木块内部的空气要进行排除，通常置木块于水中煮沸，再浸于冷水中使其冷却，反复数次，使细胞腔内空气排出，充分吸水；或者用水煮至沉底。水煮兼有使木材软化的效果，部分针叶树材或软阔叶树材，经水反复煮沸，即可供切片用。3.软化木材因木材坚硬，切片时不但不易切削，且易损坏刀口。所以排除空气之后，需用药剂处理木材，使之软化后才能进行切片。软化方法有以下儿种：甘油、酒精软化法一一试材先经排除空气处理，再以浓甘油与90%酒精各的混合液浸渍，软化时间视树种而异，由两个星期至数月不等，这种混合液，使木材组织经久不破坏，但若贮存过久，会造成木材染色困难。水醋酸、双氧水混合剂软化法一冰醋酸1份，30%双氧水2份的混合剂，试材置于其中并在水浴锅中加热，软化时间视树种而异，一般针叶树材约45分钟，阔叶树材约为2-3小时，有时也可用此混合液浸泡木材，使其软化。经此法软化后的木材，须置手流水中冲洗数小时除去木材中的酸液，避免腐蚀刀口。经冲洗去酸后，可贮存于甘油、酒精混合剂中以备切片。氟氢酸软化法一一木材排除空气后，浸入氟氢酸水溶液中，氟氢酸的浓度有10%、20%、40%，根据木材不同的硬度来选定，50%以上的浓度很少用。浸泡时间常在1-2个星期，极硬的木材，须1-2个月开始软化。自氟氢酸中取出材料，须用流水冲洗，再用水煮沸，反复数次待酸液去净，用剃刀试切片，如易切片才可用，否则仍放回氟氢酸溶液中。此法适用于比较硬的木材，准备试材时木块宜大些，避免木材组织完全破坏。酸醋酸纤维素软化法一一适用于极硬的木材。将小块试材先浸于酒精中1-2天，移入纯酮中约2小时，再浸于酒精：然后移入12%醋酸纤维素丙酮液中，（配方为：醋酸纤维素12克溶于100毫升的丙酮中，待完全溶解后即成），浸泡时间，视树种硬度而异材质较软的木材，约两天，坚硬木材约一星期左右，极硬的木材，约2-3星期，如将此溶液加热至40℃，可缩短软化时间。软化后的木材，可移入丙酮中溶去醋酸纤维素，然后，置于酒精中，即可进行切片。甘油煮沸软化法一一木材经排除空气，置于甘油（用水稀释），放置水浴锅中反复煮沸，木材即可软化。4.切片（1)切片到安装：将切片刀紧旋在切片机上，并调整切片刀的刀刃与试样切面的角度。(2)试样安装：先将试样紧旋在切片机的试件夹中然后转动试件夹的螺旋，使被切的试样切面成水平面，并将螺旋打紧。(3)切片操作：先调整试件夹螺旋，使试样切面接近刀刃，并将螺旋拧紧。然后调整切片厚度上升刻度，右手推动推杆，左手用毛笔接片并置于盛有蒸馏水的培养皿中。12
12 四、实验步骤 1. 试样制备 通常取材于胸高(1.3 米)处或者以上正常部位。试材尺寸（弦向×径向×纵向）为 15mm×15mm×3mm，必须具备标准的三切面，便于观察各切面上细胞排列的情况。 2. 排除空气 切片前木块内部的空气要进行排除，通常置木块于水中煮沸，再浸于冷水中使其冷却， 反复数次，使细胞腔内空气排出，充分吸水；或者用水煮至沉底。水煮兼有使木材软化的效 果，部分针叶树材或软阔叶树材，经水反复煮沸，即可供切片用。 3. 软化木材 因木材坚硬，切片时不但不易切削，且易损坏刀口。所以排除空气之后，需用药剂处理 木材，使之软化后才能进行切片。软化方法有以下几种： 甘油、酒精软化法——试材先经排除空气处理，再以浓甘油与 90%酒精各的混合液浸 渍，软化时间视树种而异，由两个星期至数月不等，这种混合液，使木材组织经久不破坏， 但若贮存过久，会造成木材染色困难。 水醋酸、双氧水混合剂软化法——冰醋酸 1 份,30%双氧水 2 份的混合剂，试材置于其 中并在水浴锅中加热，软化时间视树种而异，一般针叶树材约 45 分钟，阔叶树材约为 2-3 小时，有时也可用此混合液浸泡木材，使其软化。经此法软化后的木材，须置于流水中冲洗 数小时除去木材中的酸液，避免腐蚀刀口。经冲洗去酸后，可贮存于甘油、酒精混合剂中以 备切片。 氟氢酸软化法——木材排除空气后，浸入氟氢酸水溶液中，氟氢酸的浓度有 10%、20%、 40%，根据木材不同的硬度来选定，50%以上的浓度很少用。浸泡时间常在 1-2 个星期，极 硬的木材，须 1-2 个月开始软化。自氟氢酸中取出材料，须用流水冲洗，再用水煮沸，反复 数次待酸液去净，用剃刀试切片，如易切片才可用，否则仍放回氟氢酸溶液中。此法适用于 比较硬的木材，准备试材时木块宜大些，避免木材组织完全破坏。 酸醋酸纤维素软化法——适用于极硬的木材。将小块试材先浸于酒精中 1-2 天，移入纯 酮中约 2 小时，再浸于酒精；然后移入 12%醋酸纤维素丙酮液中，(配方为：醋酸纤维素 12 克溶于 100 毫升的丙酮中，待完全溶解后即成)，浸泡时间，视树种硬度而异材质较软的木 材，约两天，坚硬木材约一星期左右，极硬的木材，约 2-3 星期，如将此溶液加热至 40℃， 可缩短软化时间。软化后的木材，可移入丙酮中溶去醋酸纤维素，然后，置于酒精中，即可 进行切片。 甘油煮沸软化法——木材经排除空气，置于甘油(用水稀释)，放置水浴锅中反复煮沸， 木材即可软化。 4. 切片 (1)切片到安装：将切片刀紧旋在切片机上，并调整切片刀的刀刃与试样切面的角度。 (2)试样安装：先将试样紧旋在切片机的试件夹中然后转动试件夹的螺旋，使被切的试 样切面成水平面，并将螺旋拧紧。 (3)切片操作：先调整试件夹螺旋，使试样切面接近刀刃，并将螺旋拧紧。然后调整切 片厚度上升刻度，右手推动推杆，左手用毛笔接片并置于盛有蒸馏水的培养皿中
5.染色由于各类细胞的细胞壁厚薄不同，细胞腔内含物有无与内含物种类不同，对不同的染色剂会发生不同的物理、化学反应，各类细胞的细胞壁或细胞腔内含物会呈现不同的颜色。根据这一原理，可对切片进行多重染色。木材切片通常用番红染成红色。碱性配方为番红1.0克，蒸馏水100毫升，或者番红1.0克，乙醇50%或70%100毫升。染色前，先将切片用蒸馏水洗干净，后将切片置于盛有番红染液的培养皿中，染色时间随切片的厚度及树种而定。染色流程为蒸馏水漂洗(3-5次）→铁矾液(10min）→蒸馏水漂洗(3-5次）→番红染液(0.5-2d)。6.脱水用不同浓度的酒精由低浓度到最后纯酒精来除净木材中的水分。木材切片用番红水溶液染色，经过50%、70%、85%、95%、100%酒精脱水，再经100%酒精与二甲苯各半混合液中，最后至二甲苯中透明。7.透明采用二甲苯透明，一般处理5-10分钟即可。若不透明，需再用100%酒精处理，直至置切于二甲苯中呈透明为止。8.封固经过透明的切片，取出放在载玻片上，三个切面上滴少许加拿大树脂胶，加盖盖玻片，使其边与载玻片相接触，轻轻放下，盖玻片自然落下，再在盖玻片上用镊子末端轻微施力，驱除气泡，挤出多余树胶。如遇到切片内有气泡或混浊不清的湿气，将切片再置纯酒精中脱水，历时不宜久，即入二甲苯中透明，取出装片。然后，将制片放于无灰尘处任其树脂自然干燥，或放入低温烘箱（30℃)中加速干燥，树脂干燥后，用小刀刮去多余树脂，再用二甲苯指净制片，在载玻片左面贴上标签，标明学名、中文名、产地制片日期等，即为永久制片。9.临时切片的制作方法试样制备与试样软化与永久玻片制作方法相同，甚至试样可以不经软化处理。临时玻片要求的切片大小、厚薄都不是很严格，因此可用单面刀片代替切片刀。徒手切片时，右手握刀片，刀口向内，左手握标本，刀片在拟切部位自左上向右下拖动，一气呵成，并将切片置于盛有蒸馏水的培养皿中。将切片漂洗2或3次后置于盛有番红染液的培养皿中，染色10min。将经染色的切片用蒸馏水漂洗干净，后将切片置于培养皿中。然后用不同浓度的乙醇，除净切片材料中的水分，程序与永久片的脱水相同为了增强切片的透光性，也可对切片进行透明处理，但只需经1或2次二甲苯处理即可。取干净的载玻片，并在载玻片中央滴上一小滴甘油，用镊子将切片放置到载玻片中央有甘油的位置上。用镊子将盖玻片把切片盖上即可观察，注意不要让甘油弄脏载玻片及盖玻片。五、实验要求1每位学生制作永久切片或临时切片的数量不少于1个树种。2.实验结束后填写实验报告。13
13 5. 染色 由于各类细胞的细胞壁厚薄不同，细胞腔内含物有无与内含物种类不同，对不同的染色 剂会发生不同的物理、化学反应，各类细胞的细胞壁或细胞腔内含物会呈现不同的颜色。根 据这一原理，可对切片进行多重染色。木材切片通常用番红染成红色。碱性配方为番红 1.0 克，蒸馏水 100 毫升，或者番红 1.0 克，乙醇 50%或 70%100 毫升。染色前，先将切片用蒸 馏水洗干净，后将切片置于盛有番红染液的培养皿中，染色时间随切片的厚度及树种而定。 染色流程为蒸馏水漂洗(3-5 次)→铁矾液(10min)→蒸馏水漂洗(3-5 次)→番红染液(0.5-2d)。 6. 脱水 用不同浓度的酒精由低浓度到最后纯酒精来除净木材中的水分。木材切片用番红水溶液 染色，经过 50%、70%、85%、95%、100%酒精脱水，再经 100%酒精与二甲苯各半混合液 中，最后至二甲苯中透明。 7. 透明 采用二甲苯透明，一般处理 5-10 分钟即可。若不透明，需再用 100%酒精处理，直至置 切于二甲苯中呈透明为止。 8. 封固 经过透明的切片，取出放在载玻片上，三个切面上滴少许加拿大树脂胶，加盖盖玻片， 使其 边与载玻片相接触，轻轻放下，盖玻片自然落下，再在盖玻片上用镊子末端轻微施力，驱除 气泡，挤出多余树胶。如遇到切片内有气泡或混浊不清的湿气，将切片再置纯酒精中脱水， 历时不宜久，即入二甲苯中透明，取出装片。然后，将制片放于无灰尘处任其树脂自然干燥， 或放入低温烘箱(30℃)中加速干燥，树脂干燥后，用小刀刮去多余树脂，再用二甲苯揩净制 片，在载玻片左面贴上标签，标明学名、中文名、产地制片日期等，即为永久制片。 9.临时切片的制作方法 试样制备与试样软化与永久玻片制作方法相同，甚至试样可以不经软化处理。临时玻片 要求的切片大小、厚薄都不是很严格，因此可用单面刀片代替切片刀。徒手切片时，右手握 刀片，刀口向内，左手握标本，刀片在拟切部位自左上向右下拖动，一气呵成，并将切片置 于盛有蒸馏水的培养皿中。将切片漂洗 2 或 3 次后置于盛有番红染液的培养皿中，染色 10min。 将经染色的切片用蒸馏水漂洗干净，后将切片置于培养皿中。然后用不同浓度的乙醇，除净 切片材料中的水分，程序与永久片的脱水相同为了增强切片的透光性，也可对切片进行透明 处理，但只需经 1 或 2 次二甲苯处理即可。取干净的载玻片，并在载玻片中央滴上一小滴甘 油，用镊子将切片放置到载玻片中央有甘油的位置上。用镊子将盖玻片把切片盖上即可观察， 注意不要让甘油弄脏载玻片及盖玻片。 五、实验要求 1. 每位学生制作永久切片或临时切片的数量不少于 1 个树种。 2. 实验结束后填写实验报告